Bài viết Nghiên cứu khả năng lây nhiễm của vi bào tử trùng Enterocytozoon hepatopanaei trên tôm thẻ chân trắng (Litopennaeus vannamei) được trình bày nhằm xác định khả năng lây nhiễm của vi bào tử trùng Enterocytozoon hepatopanaei (EHP) trên tôm thẻ chân trắng.
Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 02(135)/2022 NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG LÂY NHIỄM CỦA VI BÀO TỬ TRÙNG Enterocytozoon hepatopanaei TRÊN TÔM THẺ CHÂN TRẮNG (Litopennaeus vannamei) Trương Minh Út1*, Lê Minh Khôi2, Nguyễn Trọng Nghĩa3, Từ anh Dung 2* TÓM TẮT Nghiên cứu thực nhằm xác định khả lây nhiễm vi bào tử trùng Enterocytozoon hepatopanaei (EHP) tôm thẻ chân trắng Kết kiểm tra phương pháp RT-PCR cho thấy EHP có khả lây nhiễm điều kiện nuôi nhốt chung tôm bệnh tơm khỏe EHP nguồn nước có mật độ × 105 bào tử/lít thức ăn có × 105 bào tử/gram thức ăn sau 14 ngày thí nghiệm Tơm thí nghiệm nhiễm EHP biểu số dấu hiệu bệnh lý đặc trưng tôm bỏ ăn, mềm vỏ, cịi cọc, gan tụy tơm teo dai, ruột rỗng, thức ăn ruột ngắt qng, phân tơm bị xoắn lị xo, xuất bọt khí, có chứa dịch màu vàng nhạt đến vàng nâu nâu đỏ Phân tích mơ bệnh học mẫu tơm gây nhiễm EHP cho thấy, ống gan tuỵ cấu trúc hình sao; giảm số lượng tế bào B, R; tế bào biểu mơ bong tróc, rơi vào lịng ống tế bào máu tập trung xung quanh ống gan tụy; đồng thời phát cấu trúc plasmodium bào tử EHP trưởng thành tế bào chất tế bào biểu mơ Từ khóa: Tơm thẻ chân trắng, Enterocytozoon hepatopenaei, lây nhiễm I ĐẶT VẤN ĐỀ Enterocytozoon hepatopenaei (EHP) vi bào tử trùng microsporidian kí sinh nội bào bắt buộc thuộc họ Enterocytozoonidae mô tả phát lần Lan, sau bùng phát tôm sú (Penaeus monodon), tôm thẻ chân trắng (Litopenaeus vannamei) nuôi nhiều nước châu Á châu Mỹ Latin Ở nước ta, EHP tìm thấy tôm sú bệnh phân trắng vào năm 2009 trở thành bệnh truyền nhiễm phổ biến, ảnh hưởng nghiêm trọng đến nghề nuôi tôm (Cục ú y, 2021) EHP khơng gây chết cấp tính với tỉ lệ cao cho tôm nuôi ao, nhiên chúng kí sinh gan tụy tơm, sử dụng dinh dưỡng, lượng dự trữ gan tuỵ khiến tôm nuôi không đủ dinh dưỡng cho tăng trưởng lột xác Tơm nhiễm EHP thường có biểu còi cọc, chậm lớn phân đàn Trong số nghiên cứu cho thấy, EHP liên quan đến bệnh phân trắng tôm ( itamadee et al., 2016) eo nhận định Aranguren cộng tác viên (2017) gan tụy tôm bị yếu tố ban đầu làm tổn thương tạo điều kiện cho Vibrio hội gây bệnh Bào tử EHP nhiễm tôm bệnh thải mơi trường theo đường phân, sau tồn nguồn nước, bùn lây nhiễm cho cá thể khác ao Khả lây nhiễm EHP xác định số nghiên cứu Ấn Độ, Mỹ, Lan với kết xác nhận khả lây truyền bệnh EHP từ việc nuôi nhốt chung, nuôi nguồn nước nhiễm EHP, ăn (Kesavan Karthikeyan and Raja Sudhakaran, 2018) Ở Việt Nam, khả lan truyền theo chiều dọc EHP từ tôm bố mẹ sang tôm chứng minh Hung Vu-Khac cộng tác viên (2018) Việc nghiên cứu chế đường lan truyền bệnh cần thiết đặc điểm gây bệnh, lan truyền bệnh xác định khả chịu đựng/đề kháng dịng tơm ni Tuy nhiên, nghiên cứu lây nhiễm EHP tôm thẻ chân trắng nước ta nhiều hạn chế Do đó, để cung cấp thêm thơng tin khoa học khả lây truyền bệnh EHP tôm thẻ chân trắng ni nước ta, nhằm góp phần xây dựng quy trình phịng bệnh EHP ao ni nên “Nghiên cứu khả lây nhiễm vi bào tử trùng Enterocytozoon hepatopanaei tôm thẻ chân trắng (Litopennaeus vannamei)” thực Nghiên cứu sinh khóa 2016, Khoa Thủy sản (CAF), Trường Đại học Cần Thơ Khoa Thủy sản (CAF), Trường Đại học Cần Thơ Công ty TNHH Một thành viên APC * Tác giả liên hệ: E-mail: ttdung@ctu.edu.vn 126 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 02(135)/2022 II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu Nguồn tơm thí nghiệm: Tơm thẻ chân trắng bệnh, trọng lượng 10 - 12 gram, sản xuất từ Bộ môn Kỹ thuật nuôi Hải sản, Khoa uỷ sản, Đại học Cần Nguồn tôm bệnh: Tôm thẻ chân trắng (Litopennaeus vannamei) tỉnh Sóc Trăng, Trà Vinh, có dấu hiệu đặc trưng tôm bệnh chậm lớn EHP kiểm tra nhiễm EHP phương pháp PCR 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Chuẩn bị dịch EHP Dung dịch EHP chuẩn bị theo phương pháp Hung Nam Mai cộng tác viên (2020) Gan tụy (HP) tôm bị nhiễm EHP thu cân trọng lượng, sau nghiền nước dung dịch đệm phosphate 1X (PBS) pH 7,4, tiếp tục pha loãng với dung dịch nước muối vô trùng 2% theo tỉ lệ : ly tâm tốc độ 2.200 vòng/phút phút u lấy phần dung dịch phía xác định mật độ EHP ban đầu buồng đếm Neubauer theo phương pháp Munlongwongsiri cộng tác viên (2021) 2.2.2 í nghiệm khả lây nhiễm EHP Kết thúc thí nghiệm, thu tất mẫu tơm bể thực phân tích mơ học RT-PCR 2.2.3 Phương pháp tiêu phết kính mẫu tươi Kính phết mơ gan tụy thực với mẫu gan tụy quét nhẹ lên lame Để khơ tự nhiên, sau cố định lame dung dịch methanol phút, nhuộm Wright Giemsa theo phương pháp Humason (1979) Quan sát đọc kết kính hiển vi vật kính 100X 2.2.4 Phương pháp mô học Các mẫu tôm cố định dung dịch Davidson’s 24 sau tiến hành phân tích mơ học thơng qua bước tỉa mẫu, xử lý mẫu, đúc khối, cắt mòng nhuộm mẫu với thuốc nhuộm Hematoxylin Eosin Kết mô học đọc dựa theo nghiên cứu Caro cộng tác viên (2021) nhằm đánh giá mức độ giai đoạn tác động EHP lên mô gan tuỵ tôm thẻ chân trắng sau cảm nhiễm 2.2.5 Phương pháp RT-PCR Mẫu gan ruột tôm thu trữ dung dịch ethanol 100% (Merck) để tiến hành cố định vận chuyển đến nơi phân tích diện EHP phương pháp Real-time PCR Phịng chẩn đốn xét nghiệm bệnh tơm, Chi cục Chăn nuôi ú y tỉnh Cà Mau Bố trí thí nghiệm: Xác định khả lây nhiễm EHP bao gồm nghiệm thức, nghiệm thức lặp lại lần, bao gồm (1) đối chứng âm (không cảm nhiễm EHP), (2) nuôi nhốt chung với tôm nhiễm bệnh theo tỉ lệ tôm bệnh: tôm khỏe (1 : 10), (3) nguồn nước bổ sung EHP mật độ 3,25 × 105 bào tử/L (4) thức ăn nhiễm trộn EHP mật độ 0,5 × 105 bào tử/gram, tơm bố trí bể nhựa (60 L), dụng cụ khử trùng chlorine Bố trí hồn tồn ngẫu nhiên mật độ bố trí 40 tơm/bể 2.2.6 Phương pháp kiểm tra mơi trường nước eo dõi thí nghiệm: í nghiệm theo dõi thời gian 14 ngày Trong trình thí nghiệm tơm cho ăn theo nhu cầu, tần suất lần/ngày suốt thời gian thí nghiệm Các bể thí nghiệm theo dõi hàng ngày ghi nhận tỉ lệ chết, quan sát dấu hiệu bệnh lý kiểm tra số tiêu môi trường (nhiệt độ, oxy hoà tan, pH, độ kiềm-kH, NO2, NH4/NH3+) Mẫu thu vào ngày 14 cho xác định lây nhiễm EHP tôm phương pháp RT-PCR 2.3 Nhiệt độ nước bể thí nghiệm đo nhiệt kế; tiêu pH, độ kiềm, NH3/NH4+ NO2- kiểm tra KIT SERA (Đức) theo hướng dẫn Nhà sản xuất 2.2.7 Xử lý số liệu Số liệu xử lý theo tỷ lệ (%) phân tích từ phần mềm Excel Tỷ lệ tơm chết tính dạng tích lũy ời gian địa điểm nghiên cứu Nghiên cứu thực từ tháng đến tháng năm 2021 Khoa ủy sản, Trường Đại học Cần III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Chất lượng nước Trong suốt trình thí nghiệm nhiệt độ ln dao động mức 28 - 30oC, pH từ - 8, độ kiềm 127 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 02(135)/2022 nằm khoảng 100 - 125 mg CaCO3/L khơng ghi nhận có xuất NH3/NH4+ với NO2- Khi so sánh với tiêu môi trường nuôi tôm Chanratchakool cộng tác viên (1995) cho thấy, tiêu môi trường thí nghiệm nằm ngưỡng thích hợp cho sinh trưởng phát triển tơm, khơng làm ảnh hưởng đến tơm q trình thí nghiệm ngày 14 sau bố trí Ở nghiệm thức đối chứng âm, mẫu thu cho kết âm tính hai lần thu mẫu, thể tính ổn định hệ thống thí nghiệm khơng có nhiễm chéo nghiệm thức Kết âm tính với EHP ghi nhận nghiệm thức lần thu mẫu ngày 07, nhiên sau phát mẫu tơm tất nghiệm thức lây nhiễm lần thu mẫu ngày 14 (Bảng 1) Qua nghiên cứu cho thấy EHP có khả lây nhiễm trình ni nhốt chung, bào tử EHP có nguồn nước cho ăn thức ăn bổ sung bào tử EHP 3.2 Khả lây nhiễm E hepatopenaei tôm thẻ chân trắng (L vannamei) Phương pháp RT-PCR sử dụng để kiểm định khả lây nhiễm EHP thời điểm Bảng Kết kiểm tra PCR sau ngày 14 ngày cảm nhiễm Nghiệm thức Kết PCR sau cảm nhiễm (ngày) 14 (ngày) NT1 (đối chứng âm) (-) (-) NT2 (EHP + thức ăn) (-) (+) NT3 (EHP + nước) (-) (+) NT4 (ni nhốt chung) (-) (+) Hình Gan tụy ruột tôm thẻ chân trắng (L vannamei) thí nghiệm cảm nhiễm EHP sau 14 ngày Ghi chú: (A) Tôm nghiệm thức đối chứng, gan tụy màu nâu đậm ruột đầy thức ăn, (B) gan tụy tôm màu nâu đậm, ruột rỗng thức ăn chứa dịch nâu vàng đoạn nối với gan tụy, (C) gan tụy tôm có màu xanh rêu teo dai, ruột chứa dịch nâu đỏ không liên tục (D) gan tụy tôm nhạt màu teo dai, phần ruột trước có chứa bọt khí, ruột ruột sau xoắn lị xo đứt qng 128 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 02(135)/2022 Kết từ nghiệm thức cảm nhiễm phương pháp nuôi nhốt chung đồng với nghiên cứu Salachan Sritunyalucksana (2017) chứng minh lây truyền theo chiều ngang EHP tôm nhiễm bệnh tôm khỏe điều kiện nuôi nhốt chung với khả lấy nhiễm EHP xác định sau 14 ngày thí nghiệm Các bào tử EHP theo phân tôm bệnh thải môi trường nước, tiếp xúc gây nhiễm lên tôm khỏe nuôi chung bể (Chaijarasphong et al., 2020) eo Hung Nam Mai cộng tác viên (2020), khó để có đồng thời gian lây nhiễm EHP thực phương pháp khác biệt mật độ bào tử EHP có nước thời điểm gây cảm nhiễm giai đoạn tôm cảm nhiễm Mật độ bào tử cao, thời gian lây nhiễm EHP tôm nhanh Điều thể rõ thời gian phát lây nhiễm EHP nghiệm thức bổ sung bào tử trực tiếp vào nước mật độ 3,25 × 105 bào tử/L ngày 14, Pattarayingsakul cộng tác viên (2022) cảm nhiễm tôm thẻ chân trắng giai đoạn PL-12 mật độ bào tử cao 106 bào tử/L, thời gian phát lây nhiễm sau ngày cảm nhiễm Qua nghiên cứu chứng minh EHP cịn lây nhiễm thông qua nguồn thức ăn bổ sung bào tử EHP sau 14 ngày Munkongwongsiri cộng tác viên (2021) nghiên cứu tính lây nhiễm EHP ghi nhận kết tương tự cho ăn liều × 105 CFU/g Tuy nhiên, lây nhiễm không xảy cho tôm ăn mẫu thức ăn nhiễm EHP mà xảy cho ăn thức ăn bổ sung dung dịch bào tử 3.3 Khả gây bệnh EHP tôm thẻ chân trắng 3.3.1 Dấu hiệu bệnh lý tỉ lệ chết Dấu hiệu bệnh lý phát tôm sau 10 ngày thí nghiệm với biểu ban đầu tơm bơi lội, phản ứng chậm với tiếng động, giảm bỏ ăn so với đối chứng Sau 14 ngày thí nghiệm, nghiên cứu ghi nhận số bệnh lý đặc trưng tôm tất nghiệm thức lây nhiễm bỏ ăn, mềm vỏ, còi cọc, độ sáng, bắt xuất nhiều điểm sắc tố Khối gan tụy tôm chuyển sang màu nâu nhạt, nhũn, xanh rêu, trắng sữa teo dai, đường ruột tơm thường rỗng, chứa thức ăn ruột ngắt qng, phân tơm bị xoắn lị xo, xuất bọt khí, có chứa dịch màu vàng nhạt đến vàng nâu nâu đỏ (Hình 1) Các dấu hiệu ghi nhận tương tự với mô tả Kathy cộng tác viên (2016) với mức độ biểu khác nhau, nhiên quan sát rõ mẫu tôm nghiệm thức lây nhiễm EHP phương pháp nuôi nhốt chung tôm bệnh tôm khỏe eo Newman (2015) Suresh cộng tác viên (2018), EHP sử dụng dinh dưỡng tôm cản trở q trình tiêu hóa hấp thu dưỡng chất làm tôm chậm phát triển, tôm không chết tôm dễ mẫn cảm với vi khuẩn Vibrio spp dẫn đến chết Có thể nhận thấy dấu hiệu đặc trưng tôm nhiễm EHP chậm phát triển, dẫn đến thay đổi kích thước sau 14 ngày chúng sử dụng dinh dưỡng lượng gan tụy (Suresh et al., 2018) Tuy nhiên, khơng có trường hợp tơm chết ghi nhận suốt thời gian thí nghiệm 3.3.2 Kết mô học tôm thẻ chân trắng cảm nhiễm EHP Phân tích mơ học thực nhằm quan sát, đánh giá mức độ biến đổi mô gan tụy tôm thẻ chân trắng mức độ tế bào nghiệm thức bố trí sau thí nghiệm Kết phân tích cho thấy ống gan tụy nghiệm thức đối chứng âm hồn tồn bình thường với cấu trúc “hình sao” đặc trưng, diện đầy đủ tế bào biểu mô gan tụy bao gồm B (không bào lớn), tế bào R (không bào nhỏ) tế bào F (Hình 2A) Ở nghiệm thức thí nghiệm lây nhiễm EHP cho thấy có khác biệt biến đổi cấu trúc, ảnh hưởng EHP mức độ tế bào với số biểu mô bệnh học đặc trưng ống gan tuỵ cấu trúc hình sao, giảm số lượng tế bào B, R, tế bào biểu mơ bong tróc rơi vào lòng ống tập trung tế bào máu xung quanh ống gan tụy (Hình 2B) eo Rajendran cộng tác viên (2016), tôm nhiễm EHP cấp tính, biểu bong tróc lịng ống gan tuỵ hay việc tích tụ tế bào lịng ống dấu hiệu điển hình, cho thấy mức độ nhiễm trùng EHP nghiêm trọng số tế bào biểu mô ống gan tuỵ bị hoại tử Kết cho thấy thời gian ủ bệnh dài vi bào tử trùng EHP tôm thẻ chân trắng, sau 14 ngày cảm nhiễm việc quan sát thể nhiễm EHP dày đặc dạng bào nang cho thấy giai đoạn cuối G2 đầu G3 (Hình 2C) Caro cộng tác viên (2021) 129 Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 02(135)/2022 Hình Mơ học tơm thẻ chân trắng cảm nhiễm EHP sau 14 ngày Ghi chú: (A) Gan tụy tơm khỏe, ống gan tụy cấu trúc hình diện tế bào biểu mô ( ), (B) ống gan tụy cấu trúc hình sao, giảm số lượng tế bào biểu mô B, R ( ), tế bào bong biểu mơ bong tróc rơi vào lịng ống ( ) tế bào máu tập trung xung quanh ống gan tụy ( ), (C) plasmodia EHP ( ) (D) bào tử EHP trưởng thành ( ) phân chia hình thái nhiễm EHP tơm thẻ chân trắng bao gồm nhiễm dạng bào nang, plasmodium, hay dạng bào tử trưởng thành tế bào chất Kết mô bệnh học tương tự với kết ghi nhận việc nhiễm EHP mức độ G1, G2 giai đoạn cận G3 nuôi tôm độ mặn 15 ppt (Caro et al., 2021) Ngoài ra, số vùng gan tụy tôm ghi nhận tập trung cụm bào tử EHP (Hình 2D) Các bào tử trưởng thành có cấu trúc ưa acid nằm tế bào chất ống, tế bào biểu mơ gan tụy quan sát tồn tự bên lòng ống gan tụy, thường bao quanh tế bào máu (Narayanan Biju et al., 2016) IV KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận EHP có khả lây truyền sang tơm thẻ chân trắng thông qua điều kiện nuôi nhốt chung, nước nhiễm bào tử EHP thức ăn trộn dung dịch bào tử EHP 130 Sau 10 ngày thí nghiệm, tơm nhiễm bào tử EHP có biểu số dấu hiêu bệnh lý dấu hiệu mô bệnh học đặc trưng tôm bệnh chậm lớn EHP ao ni Khơng có trường hợp tơm chết tất nghiệm thức suốt thời gian thí nghiệm 4.2 Đề nghị Xác định số yếu tố ảnh hưởng đến khả lây nhiễm EHP tôm thẻ chân trắng TÀI LIỆU THAM KHẢO Cục ú y, 2021 Báo cáo nhiệm vụ, giải pháp phòng, chống dịch bệnh tôm nuôi nước lợ năm 2021 Bộ Nông nghiệp & PTNT 2021 Trong Tài liệu Hội nghị trực tuyến “Giải pháp phát triển ngành tôm năm 2021”: 32-52 Aranguren L.F., Jee Eun Han and Kathy F.J Tang., 2017 Enterocytozoon hepatopenaei (EHP) is a risk factor for acute hepatopancreatic necrosis disease (AHPND) and septic hepatopancreatic necrosis (SHPN) in the Paci c white shrimp Penaeus Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 02(135)/2022 vannamei Aquaculture, 471: 37-42 Caro, L.A., Alghamdi, F., De Belder, K., Lin, J., Mai, H.N., Millabas, J., Dhar, A.K., 2021 e e ect of salinity on Enterocytozoon hepatopenaei infection in Penaeus vannamei under experimental conditions BMC Veterinary Research, 17: 1-8 Chaijarasphong T., Natthinee Munkongwongsiri, Grant D Stentiford, Diva J Aldama-Cano, Kwanta ansa, Timothy W Flegel, Kallaya Sritunyalucksana and Ornchuma Itsathitphaisarn, 2020 e shrimp microsporidian Enterocytozoon hepatopenaei (EHP): Biology, pathology, diagnostics and control Journal of Invertebrate Pathology, 186: 107458 Chanratchakool P., F Turnbull, C Funge-Smith and C Limsuwan, 1995 Health Management in Shrimp Ponds 2nd Edition Aquatic Animal Health Research Institute Dept of Fisheries Bangkok 10900, ailand Ill pp Humason, G.L., 1979 Animal tissue techniques e 3th Edition San Francisco, USA: WH Freeman and Company: 111-131 Hung Nam Mai, Roberto Cruz-Flores, Luis Fernando Aranguren Caro, Brenda Noble White and Arun K Dhar, 2020 A comparative study of Enterocytozoon hepatopenaei (EHP) challenge methods in Penaeus vannamei Journal of Invertebrate Pathology, 171: 1-7 Hung Vu-Khac, uy Nguyen i anh, Giang Nguyen i u, Chi Hieu Le and Van Duy Nguyen, 2018 Vertical Transmission and Early Diagnosis of the Microsporidian Enterocytozoon hepatonaei in Whiteleg Shrimp Penaeus vannamei Journal of Pure and Applied Microbiology, 12 (3): 1-7 Kathy F.J., Luis Fernando, Tang Han and Jee Eun, White Noble, Brenda; Schmidt, Margeaux M Piamsomboon, Patharapol Risdiana, Eris Hanggono, Bambang, 2016 Dense populations of the microsporidian Enterocytozoon hepatopenaei (EHP) in feces of Penaeus vannamei exhibiting white feces syndrome and path ways of their transmission to healthy shrimp Journal of Invertebrates Pathology, 140: 1-7 Kesavan Karthikeyan and Raja Sudhakaran, 2018 Experimental horizontal transmission of Enterocytozoon hepatopenaei in post‐larvae of white leg shrimp, Litopenaeus vannamei Journal of Fish Diseases, 42 (3): 1-8 Munkongwongsiri N., Aldama-Cano D.J., Suebsing R., aiue D., Prasartset T., Itsathitphaisarn O., Sritunyalucksana K., 2021 Microsporidian Enterocytozoon hepatopenaei (EHP) spores are inactivated in at 75oC Aquaculture, 533: 736178 https://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2020.736178 Narayanan Biju, Ganesan Sathiyaraj, Mithun Raj, Venu Shanmugam, Babu Baskaran, Umamaheswari Govindan, Gayathri Kumaresan, Karthick Kannan Kasthuriraju and ampi Sam Raj Yohannan Chellamma, 2016 High prevalence of Enterocytozoon hepatopenaei in shrimps Penaeus monodon and Litopenaeus vannamei sampled from slow growth ponds in India Diseases of Aquatic Organisms, 120: 225-230 Newman S.G., 2015 Microsporidian Impacts shrimp production-industry e orts address control, not eradication Global Aquaculture Advocate https:// www.globalseafood.org/advocate/microsporidianimpacts-shrimp-production/ Pattarayingsakul W., Natthinee Munkongwongsiri, Siripong itamadee, Kallaya Sritunyalucksana and Diva J Aldama-Cano, 2022 Shrimp microsporidian EHP spores in culture water lose activity in 10 days or can be inactivated quickly with chlorine Aquaculture, 548(2): 737665 Rajendran K.V., Shivam S., Praveena P.E., Rajan J.J.S., Kumar T.S., Avunje S and Vijayan K.K., 2016 Emergence of Enterocytozoon hepatopenaei (EHP) in farmed Penaeus vannamei (Litopenaeus) in India. Aquaculture, 454: 272-280 doi: 10.1016/j aquaculture.2015.12.034 Salachan P.V, Sritunyalucksana K., 2017 La hepatopancreatic microsporidiosis (HPM) hepatopenaei (EHP) BMC Veterinary Research, 13 (9): 1-7 Suresh K., Srinu R., Devika P and Gadasu R., 2018 Hepatopancreatic Microsporidiasis (HPM) in Shrimp Culture: A Review International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences, (1): 3208-3215 itamadee S., Prachumwat A., Srisala J., Sritunyalucksana K., Flegel T.W and Itsathitphaisarn O., 2016 Review of current disease threats for cultivated penaeid shrimp in Asia Aquaculture, 452: 69-87 131 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 02(135)/2022 Study on infection possibility of Enterocytozoon hepatopanaei in white shrimp (Litopennaeus vannamei) Truong Minh Ut, Le Minh Khoi, Nguyen Trong Nghia, Tu anh Dung Abstract e study was carried out to determine the infectivity of Enterocytozoon hepatopanaei (EHP) microspores in white leg shrimp e tested results by the RT-PCR method showed that EHP was capable of infecting the general condition of the diseased shrimp and healthy shrimp EHP in water had a density of × 105 spores/liter and in feed with × 105 spores/gram of feed a er 14 days of experiment Experimental shrimp infected with EHP showed some typical pathological signs such as anorexia, so shell, stunted growth, atrophy of the hepatopancreas, empty intestines, little food or broken intestines, twisted faeces, gas bubbles appearing, containing a pale yellow to yellow-brown and red-brown uid Histopathological analysis of shrimp samples infected with EHP showed that the hepatopancreas tubules lost their stellate structure; reduce the number of B and R cells; epithelial cells slough o , fall into the lumen, and blood cells gather around the hepatopancreatic tubules; simultaneously detected plasmodium structures and mature EHP spores in the epithelial cell cytoplasm Keywords: White leg shrimp, Enterocytozoon hepatopenaei, infection Ngày nhận bài: 07/3/2022 Ngày phản biện: 13/3/2022 132 Người phản biện: TS Định ị Ngày duyệt đăng: 30/3/2022 ủy ... cứu cho thấy EHP có khả lây nhiễm q trình ni nhốt chung, bào tử EHP có nguồn nước cho ăn thức ăn bổ sung bào tử EHP 3.2 Khả lây nhiễm E hepatopenaei tôm thẻ chân trắng (L vannamei) Phương pháp... lây nhiễm EHP nghiệm thức bổ sung bào tử trực tiếp vào nước mật độ 3,25 × 105 bào tử/ L ngày 14, Pattarayingsakul cộng tác vi? ?n (2022) cảm nhiễm tôm thẻ chân trắng giai đoạn PL-12 mật độ bào tử. .. bào tử/ L, thời gian phát lây nhiễm sau ngày cảm nhiễm Qua nghiên cứu chứng minh EHP cịn lây nhiễm thông qua nguồn thức ăn bổ sung bào tử EHP sau 14 ngày Munkongwongsiri cộng tác vi? ?n (2021) nghiên