Đang tải... (xem toàn văn)
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y CHU THỊ THẮM NGHIÊN CỨU ĐỊNH LƯỢNG DIUMANCAL TRONG VIÊN NÉN BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC Giáo vi.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y CHU THỊ THẮM NGHIÊN CỨU ĐỊNH LƯỢNG DIUMANCAL TRONG VIÊN NÉN BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC Giáo viên hướng dẫn: TS Nguyễn Công Bàng ThS Nguyễn Hồng Hải HÀ NỘI-2022 LỜI CẢM ƠN Em xin chân thành cảm ơn Ban giám đốc Học viện, Phịng đào tạo, Viện đào tạo Dược, tồn thể thầy cô giáo kỹ thuật viên trường Học viện Quân y dạy dỗ cung cấp cho em kiến thức ngành Dược, tạo điều kiện tốt cho em suốt năm học tập trường thời gian thực khóa luận tốt nghiệp Trước hết, em xin bày tỏ lịng biết ơn kính trọng sâu sắc tới TS Nguyễn Công Bàng ThS Nguyễn Hồng Hải, thầy cô trực tiếp hướng dẫn, bảo tận tình động viên em suốt thời gian thực khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới thầy cô giáo kỹ thuật viên mơn Hóa dược - Dược lâm sàng giúp đỡ tạo điều kiện để em có khoảng thời gian học tập làm khóa luận hoàn thiện Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến gia đình, người thân bạn bè động viên, quan tâm giúp em hồn thành khóa luận Em xin chân thành cảm ơn Hà Nội, ngày 19 tháng 06 năm 2022 Học viên Chu Thị Thắm MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ HỢP CHẤT LAI NHÓM COUMARIN 1.1.1 Hợp chất lai nhóm courmarin 1.1.2 Tác dụng sinh học hợp chất lai nhóm coumarin 1.1.3 Các thuốc nhóm coumarin 1.2 TỔNG QUAN VỀ DIUMANCAL 1.2.1 Công thức hóa học 1.2.2.Tính chất lý hóa 1.2.3 Dược động học 1.2.4 Tác dụng dược lý 1.2.5 Chỉ định, liều dùng 1.2.6 Tác dụng không mong muốn, chống định 1.2.7 Thận trọng 1.2.8 Một số phương pháp định lượng diumancal 1.3 TỔNG QUAN VỀ HPLC 1.3.1 Khái niệm 1.3.2 Các thông số đặc trưng 1.3.3 Các phương pháp định lượng HPLC 10 1.3.4 Thẩm định quy trình phân tích 10 1.3.4.1 Độ tương thích hệ thống 11 1.3.4.2 Độ đặc hiệu 11 1.3.4.3 Khoảng tuyến tính 11 1.3.4.4 Độ xác 12 1.3.4.5 Độ 12 1.3.4.6 Giới hạn phát 13 1.3.4.7 Giới hạn định lượng 13 CHƯƠNG 2: NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 ĐỐI TƯỢNG, NGUYÊN VẬT LIỆU, THIẾT BỊ 14 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 14 2.1.2 Hóa chất, dung mơi 14 2.1.3 Dụng cụ, thiết bị 14 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.2.1 Xây dựng phương pháp định lượng 15 2.2.1.1 Khảo sát bước sóng phân tích 15 2.2.1.2 Khảo sát hiệu lực cột phân tích 15 2.2.1.3 Khảo sát thành phần pha động 16 2.2.1.4 Khảo sát tỷ lệ dung môi pha động 16 2.2.1.5 Khảo sát tốc độ dòng 17 2.2.2 Thẩm định phương pháp phân tích 17 2.2.2.1 Tính tương thích hệ thống 17 2.2.2.2 Độ đặc hiệu chọn lọc 18 2.2.2.3 Khoảng tuyến tính 18 2.2.2.4 Độ xác 19 2.2.2.5 Độ 20 2.2.2.6 Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) 20 2.2.3 Định lượng diumancal viên nén 21 2.3 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ 21 2.4 ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU 21 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 22 3.1 KẾT QUẢ XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 22 3.1.1 Kết khảo sát bước sóng phân tích 22 3.1.2 Kết khảo sát hiệu lực cột 22 3.1.3 Kết khảo sát thành phần pha động 23 3.1.4 Kết khảo sát tỷ lệ dung môi pha động 25 3.1.5 Kết khảo sát tốc độ dòng 27 3.2 KẾT QUẢ THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG 29 3.2.1 Tính tương thích hệ thống 29 3.2.2 Độ đặc hiệu 30 3.2.3 Khoảng tuyến tính 31 3.2.4 Độ xác 32 3.2.5 Độ 34 3.2.6 Giới hạn phát giới hạn định lượng 35 3.3 KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG DIUMANCAL TRONG VIÊN NÉN 36 KẾT LUẬN 38 KIẾN NGHỊ 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Tên bảng Trang 1.1 Các thuốc nhóm coumarin 1.2 Một số phương pháp định lượng diumancal 2.1 Các hóa chất sử dụng nghiên cứu 14 2.2 Các thông số cột khảo sát 16 2.3 Các loại pha động 16 2.4 Các tỷ lệ dung môi pha động khảo sát 16 3.1 Kết khảo sát hiệu lực cột 22 3.2 Kết khảo sát hệ dung môi 24 3.3 Kết khảo sát tỷ lệ dung môi pha động 25 3.4 Kết khảo sát tốc độ dịng 27 Kết khảo sát tính tương thích hệ thống 3.5 29 sắc ký 3.6 Sự tương quan diện tích pic nồng độ diumancal 31 3.7 Kết khảo sát độ lặp lại 32 3.8 Kết độ xác trung gian 33 3.9 Kết hàm lượng diumancal ngày 34 3.10 Kết khảo sát độ 35 3.11 Kết xác định LOD LOQ 36 3.12 Kết định lượng diumancal viên nén 36 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình Tên hình Trang 1.1 Cấu trúc hóa học hợp chất coumarin 1.2 Cấu trúc hóa học diumancal 3.1 Phổ hấp thụ diumancal có thời gian lưu 9,5 phút 22 3.2 Sắc ký đồ dung dịch diumancal chuẩn nồng độ 20 μg/ml sử dụng cột Agilent 23 3.3 Sắc ký đồ dung dịch diumancal chuẩn nồng độ 20 μg/ml sử dụng cột Phenomenex 23 3.4 Sắc ký đồ diumancal sử dụng dung môi MeOH: H2O/HCOOH 0,1% (50,50,v/v) 24 3.5 Sắc ký đồ diumancal sử dụng dung môi ACN: H2O/HCOOH 0,1% (50,50,v/v) 24 3.6 Sắc ký đồ mẫu dung dịch diumancal chuẩn với tỷ lệ dung môi 60/40 25 3.7 Sắc ký đồ mẫu dung dịch diumancal chuẩn với tỷ lệ dung môi 50/50 25 3.8 Sắc ký đồ mẫu dung dịch diumancal chuẩn với tỷ lệ dung môi 40/60 26 3.9 Sắc ký đồ dung dịch diumancal chuẩn tốc độ dòng 0,6ml/phút 27 3.10 Sắc ký đồ dung dịch diumancal chuẩn tốc độ dòng 27 3.11 Sắc ký đồ dung dịch diumancal chuẩn tốc độ dịng 1ml/phút 28 3.12 Sắc kí đồ mẫu trắng 30 3.13 Sắc kí đồ mẫu chuẩn 30 3.14 Sắc ký đồ mẫu thử 30 3.15 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc tuyến tính nồng độ diện tích pic diumancal 32 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT STT Chữ viết tắt ký hiệu Giải thích ACN Acetonitril HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao LOD Giới hạn phát LOQ Giới hạn định lượng MeOH Methanol ED50 Liều lượng hiệu trung bình LD50 Liều gây chết trung bình PT Thời gian prothrombin ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh tim mạch bệnh lý phổ biến, chiếm 1/3 nguyên nhân tử vong giới để lại nhiều gánh nặng cho xã hội Mỗi năm có tới 17,5 triệu người tử vong bệnh lý tim mạch biến chứng [1] Trong đó, đau thắt ngực hay bệnh lý tăng huyết áp gây nhiều biến chứng di chứng nguy hiểm Nếu khơng chẩn đốn điều trị kịp thời dẫn đến nguy đột quỵ, tai biến mạch máu não, suy thận, ảnh hưởng nghiêm trọng đến sức khỏe người bệnh trở thành gánh nặng cho gia đình xã hội Do vậy, thuốc điều trị bệnh lý tim mạch ngày trọng phát triển nhiệm vụ chăm sóc sức khỏe cộng đồng Trong năm gần đây, với phát triển khoa học, dẫn chất coumarin hợp chất lai chúng ngày cho thấy tiềm lớn điều trị nhiều loại bệnh lý khác Các nghiên cứu cho thấy dẫn chất coumarin mang lại hiệu cao điều trị huyết khối tĩnh mạch, phòng ngừa thuyên tắc hệ thống rung nhĩ van tim nhân tạo, phòng ngừa nguy đột quỵ nhồi máu tim [2-4] Diumancal loại dược chất quan trọng từ dẫn xuất coumarin có phổ hoạt tính sinh học rộng rãi Diumancal biết đến chất chống loạn nhịp tim [5-7], an thần [8] chống đông máu [8] Diumancal Cục quản lý dược - Liên Bang Nga cấp phép năm 1996 sử dụng nhiều tên thương mại khác Ancardin, Diumancal-forte, Ancardin-forte… với định điều trị bệnh thiếu máu tim người lớn [7,9] Phát triển nghiên cứu diumancal hướng Việt Nam, tạo điều kiện cho bệnh nhân có thêm lựa chọn thuốc điều trị Vì vậy, việc kiểm tra chất lượng thuốc nhằm đảm bảo hiệu điều trị an toàn cho người sử dụng tiêu chí quan trọng Từ lý trên, tiến hành thực đề tài: “ Nghiên cứu định lượng diumancal viên nén phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao” với hai mục tiêu: Khảo sát điều kiện phân tích định lượng diumancal viên nén HPLC Thẩm định phương pháp xây dựng theo quy định ICH -1- CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ HỢP CHẤT LAI NHĨM COUMARIN 1.1.1 Hợp chất lai nhóm courmarin Coumarin có cơng thức C9H6O2 hay 2H-1-benzopyran-2-on dẫn xuất nhóm hợp chất lớn hợp chất tự nhiên phân bố rộng rãi giới thực vật Hình 1.1 Cấu trúc hóa học hợp chất coumarin Coumarin có nhiều tác dụng sinh học, nhóm đầy tiềm việc điều trị bệnh Vì vậy, nhóm hợp chất coumarin nhiều nhà khoa học quan tâm nghiên cứu Hiện nay, hợp chất lai coumarin đóng vai trị ngày quan trọng việc nghiên cứu dược chất để điều trị bệnh đa nhân tố Các hợp chất lai coumarin phân loại dựa tác dụng điều trị bệnh nhóm hợp chất Sau đó, đưa đặc điểm cấu trúc liên quan đến tác dụng sinh học để tìm mối quan hệ cấu trúc tác dụng Chính nhờ điều này, nhà khoa học dễ dàng tổng hợp chất lai có hiệu điều trị vượt trội [10] 1.1.2 Tác dụng sinh học hợp chất lai nhóm coumarin Hợp chất lai nhóm coumarin nhà nghiên cứu đặc biệt quan tâm có nhiều tác dụng sinh học chúng Gần đây, kết hợp coumarin với hợp chất khác tạo đa dạng cải thiện tác dụng tác dụng dược lý tác dụng sinh học Sử dụng cách tiếp cận này, số nhóm nghiên cứu tổng hợp dẫn xuất lai nhóm coumarin cách kết hợp coumarin với dẫn chất có hoạt tính sinh học khác chalcon, idol, benzimidazol nhiều chất khác Những nghiên cứu tạo bước ngoặt với hợp chất lai có -2- 108,2 10,29 1592021 100,07 106,3 10,10 1591207 101,81 106,8 10,15 1598012 101,74 106,8 ± 1,1 10,22 ± 0,09 1599801 ± 7184 101,17± 0,77 𝑋̅ ± SD RSD (%) 0,77 Nhận xét: Kết phép thử độ lặp lại phương pháp cho thấy, điều kiện sắc ký chọn, độ lệch chuẩn tương đối kết 0,77% (< 2%) Điều chứng tỏ phương pháp chọn đảm bảo độ lặp thử nghiệm thực song song Tiến hành khảo sát mẫu thử khác để tìm độ xác trung gian Kêt độ xác trung gian thể bảng 3.8 Bảng 3.8 Kết độ xác trung gian Khối lượng bột (mg) Hàm lượng diumancal tính theo nhãn (mg) Diện tích pic (µV*s) Hàm lượng so với nhãn (%) 105,6 10,04 1601024 103,08 106,9 10,16 1594486 100,43 106,1 10,09 1599763 101,43 108,9 10,36 1612494 102,52 107,2 10,19 1600732 100,63 107,5 10,22 1610743 101,84 𝑋̅ ± 107,1 ± 1,2 10,18 ± 0,11 1603207 ± 6955 101,82 ± 0,87 STT SD RSD (%) 0,85 - 33 - Kết hàm lượng diumancal ngày khác thể bảng 3.9 Bảng 3.9 Kết hàm lượng diumancal ngày STT Ngày Ngày 101,69 103,08 101,42 100,43 100,32 101,43 100,07 102,52 101,81 100,63 101,74 101,84 𝑋̅ 101,17 101,82 RSD (%) 0,77 0,85 Hàm lượng trung bình viên nén ngày 101,82% RSD trung bình ngày 0,81% Nhận xét: Kết độ lặp lại phép định lượng có giá trị RSD ngày 0,77%, ngày 0,85% trung bình đạt 0,81% Như vậy, giá trị RSD nhỏ 2% Điều chứng minh phương pháp định lượng đảm bảo độ xác trung gian 3.2.5 Độ Khối lượng cân chất chuẩn: m= 506,1 mg Khối lượng cân chất thử: m1= 105,7 mg; m2=103,7 mg; m3= 106,4 mg m4=105,3mg; m5= 107,1mg; m8=105,7mg; m9= 102,3mg m6= 106,2mg; m7= 104,9mg; Tiến hành sắc ký theo điều kiện khảo sát, thu kết sau: - 34 - Bảng 3.10 Kết khảo sát độ Mức nồng độ 80% 100% 120% Lượng chuẩn thêm vào (mg) Diện tích mẫu thử thêm chuẩn (µV*s) Lượng tìm thấy (mg) Tỷ lệ phần trăm thu hồi (%) 8,1 1390059 8,12 100,25 8,0 1380627 7,98 99,75 8,1 1392901 8,13 100,37 10,1 1555480 10,11 100,10 10,1 1549291 10,03 99,31 10,1 1551746 10,09 99,60 12,1 1710516 11,97 99,17 12,1 1717695 12,09 99,92 12,0 1701856 11,89 99,08 ̅ (%) 𝐗 100,12 ± 0,33 99,67 ± 0,40 99,39 ± 0,46 RSD (%) 0,33 0,40 0,46 Nhận xét: Tỷ lệ thu hồi nồng độ khác đạt từ 99,39 – 100,12% nằm khoảng 98 -102% so với lượng chuẩn thêm vào RSD thu từ 0,33 0,46% < 2% Điều chứng tỏ phương pháp xây dựng có độ cao 3.2.6 Giới hạn phát giới hạn định lượng Theo kết khảo sát mẫu chuẩn diumancal thời gian lưu mẫu chuẩn tR = 9,5 phút Trên sắc kí đồ mẫu trắng ta đo tín hiệu khoảng thời gian từ 9,310 phút đến 9,823 phút thu So = 1022 µV.s Kết sau thực LOD LOQ thể bảng 3.11 - 35 - Bảng 3.11 Kết xác định LOD LOQ Chỉ tiêu Diện tích nhiễu đường (µV*s) Nồng độ chất chuẩn (µg/ml) Diện tích pic thực tế đo (µV*s) LOD 3066 0,03 2837 (3*So) 0,04 3156 0,05 3589 10220 0,20 8907 (10*So) 0,25 10365 0,30 14732 LOQ Nhận xét: Theo kết từ bảng cho thấy, phương pháp định lượng xây dựng có LOD = 0,04 µg/ml LOD = 0,25 µg/ml 3.3 KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG DIUMANCAL TRONG VIÊN NÉN Kết định lượng tính tốn dựa đường chuẩn, từ tính hàm lượng diumancal chế phẩm so với hàm lượng ghi nhãn Kết định lượng diumancal viên nén thể bảng 3.12 Bảng 3.12 Kết định lượng diumancal viên nén STT Diện tích pic (µV*s) Hàm lượng mẫu thử diumancal (mg) Hàm lượng (%) 1605125 10,20 100,69 1608420 10,24 101,42 1604023 10,33 100,32 TB 100,14 - 36 - Nhận xét: Hàm lượng diumancal viên nén nghiên cứu trung bình 100,14% so với hàm lượng ghi nhãn Như vậy, mẫu thử đạt yêu cầu hàm lượng diumancal - 37 - KẾT LUẬN Sau thời gian tiến hành làm thực nghiệm, đề tài hoàn thành hai mục tiêu đề thu số kết sau: Xây dựng phương pháp định lượng diumancal viên nén phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao Qua trình tiến hành nghiên cứu, xây dựng điều kiện sắc ký sau: - Pha động: A: ACN; B: HCOOH 0,1%/ H2O - Tốc độ dòng 0,8 ml/phút - Thể tích tiêm mẫu: 10 µl - Nhiệt độ cột: 25◦C - Tỷ lệ dung môi Acetonitril: dung dịch axit formic 0,1% 50/50 - Sử dụng cột Aligent - Detector: PDA - Bước sóng định lượng: 323 nm Thẩm định phương pháp định lượng xây dựng theo quy định ICH Phương pháp xây dựng có tương quan tuyến tính chặt chẽ diện tích píc nồng độ chất chuẩn diumancal khoảng nồng độ khảo sát Phương pháp xây dựng có tương quan tuyến tính chặt chẽ diện tích píc nồng độ chất chuẩn diumancal khoảng nồng độ khảo sát (10,0 - 40,0 µg/ml), phương pháp có độ lặp lại cao với RSD 0,77% có độ từ 99,39 – 100,12% với RSD từ 0,33 đến 0,46% thích hợp cho phương pháp định lượng với thời gian phân tích phù hợp (khoảng 9,52 phút) - 38 - KIẾN NGHỊ Trong phạm vi khóa luận tốt nghiệp, tiến hành nghiên cứu xây dựng thẩm định phương pháp định lượng diumancal viên nén HPLC thu kết khả quan Em xin đưa số kiến nghị sau: - Tiếp tục nghiên cứu hoàn thiện phương pháp để ứng dụng rộng rãi phương pháp định lượng diumancal viên nén - Áp dụng điều kiện sở kiểm tra chất lượng, phòng kiểm nghiệm khác - 39 - TÀI LIỆU THAM KHẢO Khuyến cáo Hội tim mạch học Việt Nam (2010) dự phòng bệnh lý mạch vành phụ nữ Hirsh, J., Dalen, J E., Deykin, D., Poller, L., & Bussey, H (1995) Oral anticoagulants: mechanism of action, clinical effectiveness, and optimal therapeutic range Chest, 108(4): 231S-246S Salem, D N., Stein, P D., Al-Ahmad, A., Bussey, H I., Horstkotte, D., Miller, N., & Pauker, S G (2004) Antithrombotic therapy in valvular heart disease-native and prosthetic: the Seventh ACCP Conference on Antithrombotic and Thrombolytic Therapy Chest, 126(3):457S-482S Nutescu, E A., Burnett, A., Fanikos, J., Spinler, S., & Wittkowsky, A (2016) Erratum to: pharmacology of anticoagulants used in the treatment of venous thromboembolism Journal of thrombosis and thrombolysis, 42(2):296-311 Abyshev, A Z O., & Agaev, E M O (2003) Ancardin-retardmedium of prolonged anti Calcium action Abyshev, A Z O., Agaev, E M O., & Marishchenko, O V (2002) Method for obtaining Diumancal – forte tablets 0,01g Abyshev, A Z O., & Diachuk, G I (2000) Mean for treatment of coronary heart disease Abyshev, A Z., Agaev, E M., & Abyshev, R A (2014) Natural and synthetic coumarins and flavonoids St Petersburg-Baku: Prima Abyshev, A Z., Zhurkovich, I K., Agaev, E M., Abdullazade, A A., & Huseynov, A B (2007) Methods for standardizing the quality of the substance of diumancal and its dosage forms Chemical Pharmaceutical Journal, 41(1): 50-53 10 Sandhu, Sonali, et al (2014) Coumarin hybrids as novel therapeutic agents Bioorganic & medicinal chemistry, 22.15: 3806-3814 11 Pineo, G., & Hull, R D (2003) Coumarin therapy in thrombosis Hematology/Oncology Clinics, 17(1):201-216 12 Wu, Y., Xu, J., Liu, Y., Zeng, Y., & Wu, G (2020) A review on anti-tumor mechanisms of coumarins Frontiers in Oncology, 10: 2720 13 Qin, H L., Zhang, Z W., Ravindar, L., & Rakesh, K P (2020) Antibacterial activities with the structure-activity relationship of coumarin derivatives European journal of medicinal chemistry, 207:112832 14 Lee, S Y., Chiu, Y J., Yang, S M., Chen, C M., Huang, C C., Lee‐Chen, G J., & Chang, K H (2018) Novel synthetic chalcone‐ coumarin hybrid for Aβ aggregation reduction, antioxidation, and neuroprotection CNS Neuroscience & Therapeutics, 24(12): 1286-1298 15 Rakici, Ö., Aslamaci, S., & Akar, F (2014) Short-Term Resveratrol Pretreatment Suppresses Noradrenaline-Induced Contractions in Human Saphenous Vein and Internal Mammary Artery Rings FABAD Journal of Pharmaceutical Sciences, 39(1): 16 Abyshev, A Z., Jurkovich, I K., Ivkin, D Yu., & Nguyen, K B (2017) Synthesis, Physico-chemical analysis and pharmacological activity of some Wafarin derivatives Drug Development and Registration, (2): 192-198 17 Abyshev, A Z., Zhurkovich, I K., Agaev, E M., Abdullazade, A A., & Huseynov, A B (2007) Methods for standardizing the quality of the substance of diumancal and its dosage forms Chemical Pharmaceutical Journal, 41(1), 50-53 18 Abyshev, A Z., Agaev, E M., & Abyshev, R A (2014) Natural and synthetic coumarins and flavonoids St Petersburg-Baku: Prima 19 Sổ tay bào chế thuốc Liên bang Nga https://medum.ru/, truy cập ngày 22/12/2021 20 Bộ Y Tế (2007) Hóa Phân Tích II NXB Y học, 168-186 21 Bộ Y Tế (2007) Kiểm nghiệm dược phẩm NXB Y học, 84-111 22 Patil, M P N (2017) HPLC Method Development–A Review Journal of Pharmaceutical Research and Education, 1(2): 243-260 23 Bộ Y Tế, Thái Phan Như Quỳnh (2007) Kiểm nghiệm thuốc sắc ký lỏng hiệu cao NXB Y học, 230-250 24 ICH Harmonised Guideline (2022) Validation of analytical procedures: Q2 (R2) Text and Methodology 25 Bộ Y tế (2012), Kiểm nghiệm thuốc (dùng cho đào tạo dược sĩ đại học), Nhà xuất giáo dục Việt Nam, 135-184 26 Viện kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm (2010), Thẩm định phương pháp phân tích hố học vi sinh vật, 10-59 27 European Medicines Agency (2011), Guideline on bioanalytical method validation, 9-10 28 The International Council for Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use (2005), Validation of analytical procedures: text and methodology Q2(R1), 6-13 29 Chenghan Mei, Bin Li, et al (2015), "Liquid chromatographytandem mass spectrometry for the quantification of flurbiprofen in human plasma and its application in a study of bioequivalence", Journal of Chromatography B, 993-994, 69-74 30 The Europaean Pharmacopieal Pharmacopoeia Europaea 7(2), 2056-2057 Commission (2010), DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC Ký hiệu Tên phụ lục PL1 Độ tương thích hệ thống PL2 Mẫu thử PL3 Đường chuẩn PL4 Độ PL1 CÁC SẮC KÝ ĐỒ BIỂU THỊ ĐỘ TƯƠNG THÍCH HỆ THỐNG PL2 CÁC SẮC KÝ ĐỒ BIỂU THỊ MẪU THỬ PL3 CÁC SẮC KÝ ĐỒ BIỂU THỊ ĐƯỜNG CHUẨN PL4 CÁC SẮC KÝ ĐỒ BIỂU THỊ ĐỘ ĐÚNG ... tiêu đề thu số kết sau: Xây dựng phương pháp định lượng diumancal viên nén phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao Qua trình tiến hành nghiên cứu, xây dựng điều kiện sắc ký sau: - Pha động: A: ACN; B:... 21, 23] 1.3.3 Các phương pháp định lượng HPLC Có phương pháp định lượng HPLC thường dùng: Phương pháp chuẩn ngoại: Là phương pháp định lượng hai mẫu chuẩn thử tiến hành sắc ký điều kiện Sau so... loại sắc ký khác nhau: Sắc ký phân bố, sắc ký hấp phụ, sắc ký trao đổi ion, sắc ký loại cỡ, sắc ký lực, sắc ký đồng phân quang học Trong đó, phương pháp sắc ký lỏng phân bố sử dụng phổ biến [20,21]