Nghiên cứu quy trình xử lý mẫu từ thịt heo để xác định hàm lượng phụ gia natri benzoate bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA HĨA NGƠ THỊ THANH HIỀN NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH XỬ LÝ MẪU TỪ THỊT HEO ĐỂ XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG PHỤ GIA NATRI BENZOATE BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC Đà Nẵng, 04/2017 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA HÓA NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH XỬ LÝ MẪU TỪ THỊT HEO ĐỂ XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG PHỤ GIA NATRI BENZOATE BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC Sinh viên thực : Ngô Thị Thanh Hiền Lớp : 13CHP Giáo viên hƣớng dẫn : ThS Phạm Thị Hà Đà Nẵng, 04/2017 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐHSP KHOA HĨA CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Ngô Thị Thanh Hiền Lớp: 13CHP Tên đề tài: Nghiên cứu quy trình xử lý mẫu từ thịt heo để xác định hàm lượng phụ gia natri benzoate phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị 2.1 Thiết bị HPLC Aligent 1200 với đầu dò UV- VIS; Cân phân tích; Bể siêu âm; Máy li tâm; Bếp cách thủy 2.2 Dụng cụ Pipet thẳng 20 mL; pipet bầu mL, 10mL; Bình định mức 50 mL; Bộ lọc hút chân không; Một số dụng cụ khác 2.3 Hóa chất Chỉ sử dụng hóa chất loại tinh khiết phân tích nước cất dùng cho HPLC; Axit benzoic, axit axetic; Metanol, amoni axetat; Kali hexaxyanoferat, kẽm sunfat Nội dung nghiên cứu Tìm điều kiện tối ưu cho trình xử lý mẫu Xây dựng quy trình xác định hàm lượng phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao Đánh giá sai số thống kê phương pháp Phân tích hàm lượng phụ gia natri benzoate có mẫu thực Giáo viên hƣớng dẫn: Thạc sĩ Phạm Thị Hà Ngày giao đề tài: ngày 06 tháng 04 năm 2016 Ngày hoàn thành: ngày 31 tháng 12 năm 2016 Chủ nhiệm Khoa (Ký ghi rõ họ, tên) Giáo viên hướng dẫn (Ký ghi rõ họ, tên) Sinh viên hoàn thành nộp báo cáo cho Khoa ngày 28 tháng 04 năm 2017 Kết điểm đánh giá: Ngày … tháng … năm … CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (Ký ghi rõ họ, tên) LỜI CẢM ƠN Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến cô Phạm Thị Hà- người cô đầy tâm huyết trực tiếp truyền thụ cho em kiến thức quý báu từ ngày đầu làm quen với ngành học hôm nay, em học tập, nghiên cứu hoàn thành luận văn Em xin chân thành cảm ơn cô Em xin chân thành cảm ơn cô Lê Thị Tuyết Anh thầy cô giảng dạy môn thầy cơng tác phịng thí nghiệm khoa Hóa- trường Đại học Sư Phạm- Đại học Đà Nẵng dạy dỗ, tạo điều kiện cho em làm việc tốt phịng thí nghiệm Em xin chân thành cảm ơn thầy giáo chủ nhiệm Đinh Văn Tạc tập thể sinh viên lớp 13CHP tận tình giúp đỡ, động viên em suốt thời gian tiến hành khóa luận tốt nghiệp Cuối cùng, em xin cảm ơn gia đình ủng hộ lớn mặt tinh thần cho em thời gian học tập giảng đường đại học thời gian em làm khóa luận tốt nghiệp Đà Nẵng, ngày 25 tháng năm 2017 Sinh viên Ngô Thị Thanh Hiền MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Nội dung nghiên cứu Ý nghĩa đề tài CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu phụ gia thực phẩm 1.1.1 Phân loại phụ gia thực phẩm 1.1.2 Quy định sử dụng phụ gia thực phẩm 1.2 Tổng quan phụ gia thực phẩm Natri benzoate 1.2.1 Cấu trúc hóa học tính chất 1.2.2 Ứng dụng natri benzoate 1.2.3 Điều chế công nghiệp 1.2.4 Ảnh hưởng natri benzoat sức khỏe người 1.3 Các phương pháp xác định natri benzoate 12 1.3.1 Phân tích định tính 12 1.3.2 Phân tích định lượng 12 1.4 Các kỹ thuật xử lý mẫu phân tích 13 1.4.1 Kỹ thuật vơ hóa ướt 13 1.4.2 Kỹ thuật vô hóa khơ 14 1.4.3 Kỹ thuật vơ hóa khơ ướt kết hợp 15 1.4.4 Các phương pháp chiết phân tích 16 1.5 Sai số phân tích 20 1.5.1 Khái niệm 20 1.5.2 Một số đại lượng đặc trưng 21 1.5.3 Cách xác định sai số phân tích 22 CHƢƠNG NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 Dụng cụ, thiết bị, hóa chất 23 2.1.1 Dụng cụ, thiết bị 23 2.1.2 Hóa chất 23 2.2 Chuẩn bị loại dung dịch 23 2.2.1 Dung dịch chuẩn axit benzoic 1000 ppm 23 2.2.2 Dung dịch Carrez I 24 2.2.3 Dung dịch Carrez II 24 2.2.4 Dung dịch đệm 24 2.3 Các quy trình nghiên cứu thực nghiệm xử lý mẫu 24 2.3.1 Quy trình tạo mẫu trắng 24 2.3.2 Quy trình tạo mẫu sản phẩm chả có sử dụng chất phụ gia axit benzoic, natri benzoate 25 2.3.3 Quy trình khảo sát pH 25 2.3.4 Quy trình khảo sát thời gian siêu âm 26 2.3.5 Quy trình khảo sát dung mơi trích ly 26 2.3.6 Quy trình xử lý mẫu phân tích hàm lượng natri benzoate số sản phẩm từ thịt 27 2.3.7 Quy trình xác định độ hao hụt natri benzoate trình xử lý mẫu 27 2.3.8 Quy trình xác định hiệu suất thu hồi q trình phân tích 27 2.3.9 Lập đường chuẩn xác định axit benzoic 28 2.3.10 Quy trình đánh giá sai số thống kê phương pháp 28 2.3.11 Quy trình phân tích hàm lượng natri benzoate số mẫu sản phẩm từ thịt thị trường 28 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 30 3.1 Kết tạo mẫu trắng mẫu sản phẩm chả có sử dụng chất phụ gia axit benzoic, natri benzoate 30 3.2 Kết khảo sát điều kiện tối ưu cho quy trình xử lý mẫu 30 3.2.1 Kết khảo sát pH 30 3.2.2 Kết khảo sát thời gian siêu âm 31 3.2.3 Kết khảo sát loại dung mơi trích ly 32 3.2.4 Quy trình xử lý mẫu xác định hàm lượng natri benzoate số mẫu sản phẩm từ thịt heo 33 3.2.5 Kết xác định độ hao hụt natri benzoate trình xử lý mẫu 34 3.2.7 Kết lập đường chuẩn axit benzoic 36 3.2.8 Kết đánh giá sai số hệ thống phương pháp 36 3.2.9 Kết phân tích số sản phẩm từ thịt thị trường 37 3.2.10 So sánh, đánh giá hàm lượng chất phụ gia natri benzoate mẫu thực phẩm từ thịt thị trường với TCVN 38 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 40 Kết luận 40 Kiến nghị 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO 41 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Nhóm phụ gia thực phẩm theo chức Bảng 1.2 Tính chất muối natri benzoate Bảng 3.1 Các thông số mẫu sản phẩm thực phẩm từ thịt tự chế biến 30 Bảng 3.2 Ảnh hưởng pH đến hàm lượng trích ly natri benzoate mẫu 31 Bảng 3.3 Ảnh hưởng thời gian siêu âm đến hàm lượng natri benzoate mẫu 31 Bảng 3.4 Ảnh hưởng loại dung môi đến hàm lượng natri benzoate trích ly q trình xử lý mẫu 32 Bảng 3.5 Kết xác định độ hao hụt hàm lượng natri benzoate QT xử lý mẫu 35 Bảng 3.6 Kết xác định hiệu suất thu hồi q trình phân tích 35 Bảng 3.7 Bảng kết độ lặp lại phương pháp phân tích 36 Bảng 3.8 Bảng kết độ xác phương pháp phân tích 37 Bảng 3.9 Kết phân tích mẫu sản phẩm thực phẩm từ thịt thị trường… 38 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc muối natri benzoate Hình 2.1 Sơ đồ quy trình sản xuất chả 25 Hình 2.2 Quy trình xử lý mẫu thịt đề xuất để chiết chất phụ gia natri benzoate 27 Hình 2.3 Sơ đồ quy trình phân tích mẫu thị trường 29 Hình 3.1 Quy trình xử lý mẫu tối ưu 34 Hình 3.2 Đồ thị đường chuẩn axit benzoic 36 CÁC KÝ HIỆU VIẾT TẮT AOAC Hiệp hội nhà hóa phân tích thức CTPT Công thức phân tử E210 Axit benzoic E211 Natri benzoate HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao KLPT Khối lượng phân tử PGTP Phụ gia thực phẩm TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam VSATTP Vệ sinh an toàn thực phẩm Cpt, Clt : Nồng độ chất phân tích đo được; Clt: Nồng độ chất phân tích thêm vào ban đầu Tính hiệu suất thu hồi trung bình qua lần đo lặp lại 2.3.9 Lập đƣờng chuẩn xác định axit benzoic - Chuẩn bị dung dịch axit benzoic chuẩn có nồng độ 10 ppm; 20 ppm; 50 ppm; 80 ppm; 100 ppm - Chạy sắc kí điểm chuẩn theo phương pháp sắc kí tối ưu - Tỉ lệ pha động MeOH: đệm axetat = 50:50; tốc độ dòng pha động 0.8 mL/phút; λ= 235 nm) - Lập đường chuẩn nồng độ diện tích peak 2.3.10 Quy trình đánh giá sai số thống kê phƣơng pháp 2.3.10.1 Quy trình xác định độ lặp lại Kết phân tích phụ thuộc vào quy trình xử lý mẫu, phương pháp phân tích mẫu Vậy để đánh giá quy trình phân tích chung cho đối tượng sản phẩm thực phẩm từ thịt tiến hành xác định độ lặp lại phương pháp mẫu sản phẩm chả heo hấp M4 Xác định độ lặp lại cách phân tích mẫu lặp lại lần loại sản phẩm qua giai đoạn: cân, xử lý mẫu, đo HPLC Tiếp theo xác định độ lệch chuẩn tương đối RSD% so sánh với tiêu chuẩn AOAC nồng độ tương ứng 2.3.10.2 Quy trình xác định độ xác Thực quy trình phân tích với mẫu chả hấp M3, M4, M5, M6, M7 biết trước nồng độ So sánh kết đo với hàm lượng thực tế thêm vào mẫu để xác định độ xác 2.3.11 Quy trình phân tích hàm lƣợng natri benzoate số mẫu sản phẩm từ thịt thị trƣờng Áp dụng điều kiện xử lý mẫu theo quy trình tối ưu tiến hành phân tích hàm lượng natri benzoate theo quy trình xây dựng mục 2.3.6 28 Quy trình phân tích hàm lượng natri benzoate số sản phẩm từ thịt theo quy trình hình 2.3 So sánh kết phân tích hàm lượng natri benzoate số mẫu thực phẩm từ thịt thị trường với TCVN Mẫu rắn, giã nhỏ + 25 mL dung dịch NaOH + Chưng cách thủy 700C, 30 phút + Trung hòa H2SO4 10% đến pH tối ưu + Thêm dung môi trích ly tối ưu + Siêu âm với thời gian tối ưu + Thêm dd loại tạp + Định mức + Ly tâm, lọc + Chạy HPLC Hình 2.3 Sơ đồ quy trình phân tích mẫu thị trường 29 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết tạo mẫu trắng mẫu sản phẩm chả có sử dụng chất phụ gia axit benzoic, natri benzoate Thực theo quy trình 2.3.1 2.3.2 ta thu kết thể bảng 3.1 Bảng 3.1 Các thông số mẫu sản phẩm thực phẩm từ thịt tự chế biến mg nguyên liệu mg phụ gia E210 mg phụ gia E211 Chả chiên M1 196.350 0.20009 - mg sản phẩm sau QT chế biến 119.913 0.102 %phụ gia/sản phẩm, % 0.167 Chả hấp M2 210.008 0.19115 - 132.754 0.091 0.144 Chả hấp M3 185.413 0.51048 - 135.351 0.275 0.377 Chả hấp M4 200.326 0.70302 - 148.886 0.349 0.472 Chả hấp M5 200.023 0.90250 - 148.800 0.449 0.607 Chả hấp M6 225.780 0.85258 - 169.280 0.376 0.503 Chả hấp M7 210.497 - 0.11295 153.682 0.054 0.073 Chả hấp M8 206.868 - 0.20744 148.950 0.100 0.139 Chả hấp M9 205.890 - 0.40252 151.035 0.195 0.267 Thịt xay M10 186.800 0.30858 - 187.109 0.165 0.165 Thịt xay M11 100.849 0.14016 - 100.989 0.138 0.138 Mẫu %phụ gia/nguyên liệu, % Xác định độ hao hụt nguyên liệu tách nước trình chế biến: Dựa vào số liệu bảng 3.1 tính mối tương quan khối lượng sản phẩm khối lượng nguyên liệu ban đầu sau: + Đối với chả chiên: + Đối với chả hấp: 3.2 Kết khảo sát điều kiện tối ƣu cho quy trình xử lý mẫu 3.2.1 Kết khảo sát pH Để khảo sát pH mẫu, chúng tơi tiến hành thực theo quy trình 2.3.3, kết thu thể bảng 3.2 30 Bảng 3.2 Ảnh hưởng pH đến hàm lượng trích ly natri benzoate mẫu STT pH Hàm lƣợng trích ly (%) 6.5 42.40 7.0 44.35 7.5 60.34 8.0 60.65 8.5 66.01 9.0 45.86 Nhận xét: Dựa vào kết bảng 3.2 chúng tơi chọn pH tối ưu cho q trình xử lý mẫu 8.5 3.2.2 Kết khảo sát thời gian siêu âm Siêu âm làm tăng hiệu q trình trích ly natri benzoate khỏi mẫu Để khảo sát thời gian siêu âm mẫu, thực theo quy trình 2.3.4, kết thu thể bảng 3.3 Với kí hiệu M1 mẫu chả chiên, M2 mẫu chả hấp Bảng 3.3 Ảnh hưởng thời gian siêu âm đến hàm lượng natri benzoate mẫu Mẫu Thời gian siêu âm, phút M1 M2 M1 15 M2 15 M1 30 M2 30 31 Hàm lƣợng trích ly trung bình, % 42.84 59.03 66.31 M1 45 M2 45 M1 60 M2 60 68.40 69.09 Nhận xét: Theo kết khảo sát bảng 3.3, thời gian siêu âm mẫu tăng lên tăng độ trích ly chất chiết vào dung môi Tuy nhiên, thời gian siêu âm lâu (60 phút) không làm tăng hàm lượng trích ly natri benzoate lên đáng kể Vậy chúng tơi chọn thời gian siêu âm thích hợp 45 phút 3.2.3 Kết khảo sát loại dung mơi trích ly Kết thực theo thao tác mục 2.3.5 thời gian siêu âm 45 phút tối ưu trên, số liệu thể bảng 3.4 Với kí hiệu M1 mẫu chả chiên, M2 mẫu chả hấp Bảng 3.4 Ảnh hưởng loại dung mơi đến hàm lượng natri benzoate trích ly trình xử lý mẫu CH3OH Hàm lƣợng trích ly (%) Hàm lƣợng trích ly trung bình (%) C2H5OH CCl4 M1 M2 M1 M2 M1 M2 67.20 67.99 68.79 69.18 40.56 42.54 67.59 68.98 41.55 Nhận xét: Theo kết khảo sát bảng 3.4 cho thấy loại dung mơi trích ly tối ưu cho q trình xử lý mẫu etanol Sau chúng tơi tiếp tục xử lý mẫu chọn dung mơi tối ưu để trích ly etanol, tiếp chúng tơi thay đổi dung mơi định mức đệm axetat thay etanol kết hàm lượng trích ly (%) lên đến 73.36 % Vậy điều kiện tối ưu cho trình xử lý mẫu thời gian siêu âm 45 phút Loại dung mơi trích ly dùng etanol, sau định mức đệm axetat 32 3.2.4 Quy trình xử lý mẫu xác định hàm lƣợng natri benzoate số mẫu sản phẩm từ thịt heo Cân xác khoảng 4÷5 g mẫu đồng cho vào cốc 100 mL Thêm 25 mL NaOH 0.1N, khuấy mẫu máy khuấy từ thời gian phút, thủy phân bếp cách thủy nhiệt độ 700C 30 phút Làm nguội nhiệt độ phòng, trung hòa mẫu dung dịch H2SO4 10% để dung dịch có pH = 8.5, chuyển mẫu từ cốc vào bình định mức 50 mL, sử dụng 10 mL C2H5OH để tráng rửa cốc chuyển tồn vào bình định mức, tiến hành siêu âm trích ly chất phân tích thời gian 45 phút Sau thời gian siêu âm, thêm mL dung dịch kali hexaxyanoferat (K4[Fe(CN)6]) 15% mL kẽm sunfat (ZnSO4) 30%, lắc để loại tạp Tiến hành định mức đến thể tích 50 mL đệm axetat Tiếp đó, mang mẫu ly tâm, lọc qua giấy lọc Tiếp theo lọc mẫu qua phin lọc 0.2 µm tiêm mẫu máy HPLC Quy trình xử lý mẫu tối ưu để phân tích hàm lượng natri benzoate số sản phẩm từ thịt heo thể hình 3.1 33 + 5g mẫu rắn 25 mL NaOH 0,1N Khuấy từ phút Đun cách thủy t0 = 700C, 30 phút + H2SO4 10% → pH = 8.5 Cho vào BĐM 50mL + 10mL C2H5OH Siêu âm 45 phút + 2mL K4[Fe(CN)6] 15% + 2mL ZnSO4 30% Lắc để loại tạp - Định mức vừa đủ 50mL đệm axetat - Ly tâm Lọc qua giấy lọc - Lọc dịch qua phin lọc 0,45µm HPLC C Hình 3.1 Quy trình xử lý mẫu tối ưu Lƣu ý: Nếu mẫu phân tích có hàm lượng chất phụ gia nằm ngồi đường chuẩn nên pha lỗng mẫu Chẳng hạn, lấy xác mL dịch lọc pha lỗng vào bình định mức 25 mL dung dịch đệm axetat Tiếp theo lọc mẫu qua phin lọc 0.2 µm tiêm mẫu máy HPLC 3.2.5 Kết xác định độ hao hụt natri benzoate trình xử lý mẫu Thực theo quy trình mục 2.5.1, kết xác định độ hao hụt natri benzoate trình xử lý mẫu thể bảng 3.5 34 Bảng 3.5 Kết xác định độ hao hụt hàm lượng natri benzoate QT xử lý mẫu QT xử lý mẫu không sử dụng QT xử lý mẫu sử dụng sinh Độ hao hụt sinh hàn hàn không sử Mẫu Hàm lượng đo Mẫu Hàm lượng đo dụng sinh hàn sử dụng sinh hàn (%) 1274 1337 4.71 1271 1339 5.08 Nhận xét: Trong quy trình xử lý mẫu, cơng đoạn chuyển chất phụ gia từ dạng axit sang dạng muối có gia nhiệt 70oC thời gian 30 phút làm hao hụt trung bình khoảng 4.88% so với quy trình có sử dụng ống sinh hàn 3.2.6 Kết xác định hiệu suất thu hồi q trình phân tích Thực theo quy trình mục 2.3.8 ta thu kết bảng 3.6 Bảng 3.6 Kết xác định hiệu suất thu hồi q trình phân tích C% theo Mẫu LT Hiệu suất C% theo QTPT Hiệu suất thu thu hồi % hồi trung bình % Chả chiên M1 0.167 0.120 71.85 Chả hấp M3 0.377 0.287 76.13 Chả hấp M6 0.503 0.355 70.58 72.85 Nhận xét: Dựa vào kết bảng 3.6 biết độ hao hụt trung bình q trình phân tích khoảng 27.15% Trong xác định độ hao hụt trình xử lý mẫu 4.88% 35 3.2.7 Kết lập đƣờng chuẩn axit benzoic Tiến hành theo quy trình 2.3.9, phương trình đường chuẩn xây dựng thể hình 3.2 6000 y = 41.625x + 46.096 R² = 0.9999 5000 4000 3000 2000 1000 0 20 40 60 80 100 120 Hình 3.2 Đồ thị đường chuẩn axit benzoic Nhận xét: Phương trình đường chuẩn đạt yêu cầu phân tích định lượng có hệ số hồi quy tuyến tính R2 tiến tới gần sát 3.2.8 Kết đánh giá sai số hệ thống phƣơng pháp 3.2.8.1 Độ lặp lại phƣơng pháp phân tích Thực theo quy trình 2.3.10.1, kết xác định thể bảng 3.7 Bảng 3.7 Bảng kết độ lặp lại phương pháp phân tích Lần đo C% theo QTPT 0.372 0.359 0.360 0.358 0.362 C% trung bình SD RSD% 0.362 0.0037 1.03 36 Nhận xét: Các kết thực nghiệm so sánh với số liệu bảng phụ lục cho thấy RSD% < 2%, nằm khoảng cho phép AOAC Vậy phương pháp có độ lặp lại tốt 3.2.8.2 Xác định độ xác phƣơng pháp Thực theo quy trình mục 2.3.10.2 ta thu kết bảng 3.8 Bảng 3.8 Kết độ xác phương pháp phân tích C% chất phụ gia thực C% chất phụ C% chất phụ tế theo tính tốn Mẫu gia E210 theo gia tính tốn QTPT lại %E211 % E210 M3 - 0.377 0.287 0.393 M4 - 0.472 0.343 0.471 M5 - 0.607 0.465 0.638 M6 - 0.503 0.355 0.487 M7 0.073 0.054 0.074 - Nhận xét: Dựa vào kết bảng 3.8 thấy hàm lượng chất phụ gia thu có độ xác cao phù hợp với yêu cầu quy định độ thu hồi AOAC từ 90- 105% 3.2.9 Kết phân tích số sản phẩm từ thịt thị trƣờng Tiến hành phân tích mẫu sản phẩm thực phẩm từ thịt địa bàn thành phố Đà Nẵng, cụ thể khu vực Hòa Khánh, Chợ Cồn, Cẩm Lệ, Thanh Khê Kết phân tích thể bảng 3.9 37 Bảng 3.9 Kết phân tích mẫu sản phẩm thực phẩm từ thịt thị trường Khu vực Hàm lƣợng chất phụ gia natri benzoate sản phẩm Chả heo Dăm Thịt nguội Nem Chả giò heo sống 0.329 KPH KPH 0.012 - 0.617 KPH KPH 0.011 - 0.658 KPH KPH 0.002 0.064 0.273 KPH KPH - 0.087 0.273 - - - - KPH KPH 0.006 0.203 - KPH 0.057 0.003 0.008 - KPH 0.003 0.049 - - 0.022 0.079 0.070 0.003 0.056 KPH KPH 0.004 0.150 Chợ Cồn - 0.091 KPH KPH - - Hải Châu 0.051 KPH KPH - - 0.056 - - - - 0.843 0.101 KPH KPH 0.135 0.391 KPH KPH - 0.141 0.504 KPH KPH - 0.089 Hòa Khánh Chợ Tân An, C Lệ Tiệm B.mì C.Lệ Q.Thanh Khê - 3.2.10 So sánh, đánh giá hàm lƣợng chất phụ gia natri benzoate mẫu thực phẩm từ thịt thị trƣờng với TCVN Theo TCVN, hàm lượng natri benzoate sản phẩm thực phẩm không 1000 ppm (hay 0.1%) Trong số 58 mẫu thực phẩm thị trường kiểm tra, hàm lượng natri benzoate 12 mẫu không đạt (chiếm 20.69%) Cụ thể: 38 - Mẫu chả heo: Tổng số mẫu phân tích 16 mẫu, có mẫu khơng đạt Hàm lượng mẫu không đạt cao gấp 2-8 lần so với TCVN - Mẫu dăm bông, thịt nguội: Tổng số mẫu phân tích 28 mẫu mẫu phân tích có hàm lượng axit benzoic thấp không phát Vậy mẫu dăm bơng, thịt nguội có hàm lượng chất phụ gia axit benzoic phù hợp với TCVN - Mẫu nem chua: Tổng số mẫu phân tích mẫu, có mẫu khơng đạt so với TCVN - Chả giò heo sống: Tổng số mẫu phân tích mẫu, có mẫu không đạt, so với TCVN Với số liệu phân tích mẫu thực phẩm từ thịt trị trường cho thấy, số sở sản xuất uy tín bước đầu có ý thức việc sử dụng phụ gia thực phẩm q trình sản xuất Tuy nhiên, bên cạnh cịn có số sở sử dụng phụ gia bảo quản mức Thông thường mẫu chả heo thường bán tiệm bánh mỳ Nhìn chung, việc đăng ký sản xuất theo tiêu chuẩn quản lý, kiểm soát sở sản xuất chưa sát thực, chưa đạt hiệu 39 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Đề tài đạt nội dung đề ban đầu Với kết thể sau: - Đã tạo mẫu chả hấp chả chiên từ thịt để phục vụ nghiên cứu - Đã xây dựng quy trình tối ưu để xử lý mẫu, với điều kiện cụ thể là:  pH= 8.5;  Dung mơi trích ly etanol định mức đệm axetat;  Thời gian siêu âm 45 phút; - Đã định lượng nồng độ natri benzoate mẫu phương pháp HPLC, xác định độ thu hồi q trình phân tích 72.85% - Áp dụng để phân tích, đánh giá 58 mẫu thực Trong có 12 mẫu khơng đạt gồm mẫu chả heo, mẫu nem, mẫu chả heo sống so với TCVN Kiến nghị Phân tích hàm lượng natri benzoate sản phẩm khác 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Bộ Y tế, Danh mục tiêu chuẩn vệ sinh lương thực thực phẩm, số 867/1998/QĐ-BYT [2] Kiểm nghiệm chất lượng tra vệ sinh an toàn thực phẩm, Nhà xuất Y học, 1991 [3] Nguyễn Minh Đức, Sắc ký lỏng hiệu cao số ứng dụng vào nghiên cứu, kiểm nghiệm dược phẩm, dược liệu hợp chất thiên nhiên Nhà xuất y học chi nhánh thành phố Hồ Chí Minh, 2006 [4] Nguyễn Thị Thanh Hương, Nguyễn Công Khẩn, Hà Thị Anh Đào Bài báo: “Đánh giá hiệu can thiệp đến tình hình sử dụng phẩm màu, hàn the, axit benzoic axit sorbic chế biến thực phẩm Quảng Bình” Tạp chí Khoa học Phát triển, 2012, Tập 10, số 3: 479-486; www.hua.edu.vn [5] Nguyễn Huỳnh Hiệp Luận văn thạc sĩ: “ Phân tích benzene nước giải khát tìm hiểu chế hình thành benzene” Hướng dẫn khoa học: GS.TS Chu Phạm Ngọc Sơn Thành phố Hồ Chí Minh – 2010 [6] Nguyễn Tấn Sĩ, TS Đặng Văn Khánh, Ds Lê Thị Kim Chi “ Nghiên cứu xây dựng quy trình định lượng đồng thời chất phụ gia natribenzoat kalisorbat số sản phẩm thực phẩm phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao” Trung tâm Kiểm nghiệm thuốc mỹ phẩm thực phẩm Thừa Thiên Huế [7] Nguyễn Duy Thịnh (2008), Bài giảng Các chất phụ gia dùng sản xuất thực phẩm, Viện Công nghệ sinh học Thực phẩm – trường Đại Học Bách Khoa Hà Nội [8 Trần Cao Sơn (2010), Thẩm định phương pháp phân tích hoá học vi sinh vật, nhà xuất khoa học kỹ thuật [9] Bùi Xuân Vững (2009), Giáo trình “ Một số phương pháp phân tích cơng cụ hóa hữu cơ” 41 [10] Thơng tư 27/2012/TT-BYT, Hướng dẫn việc quản lý phụ gia thực phẩm [11] Viện Kiểm nghiệm An toàn Vệ sinh Thực phẩm Quốc gia, Phương pháp xác định hàm lượng acid benzoic acid sorbic thực phẩm [12] TCVN 8122:2009, Sản phẩm rau, - Xác định hàm lượng acid benzoic acid sorbic – Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao [13] TCVN 6428:2007, Rau, sản phẩm rau - Xác định hàm lượng acid benzoic – Phương pháp quang phổ [14 Phan Văn Vĩnh (2014) Báo cáo thực tập tốt nghiệp: “Xác định acid ascorbic, acid benzoic, natribenzoat, acid sorbic kali sorbat thực phẩm phương pháp HPLC” Trung tâm kỹ thuật tiêu chuẩn đo lường khu vực [15] FSA Survey of Benzene of Soft Drinks – No 06/06 FSA; March 2006 Available from URL:http://www.food.gov.uk/multimedia/pdfs/fsis0606.pdf [16] WHO Toxicological Evaluation of Certain Food Additives Prepared by the 46th Meeting of the Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives (JECFA) Available from http://www.inchem.org/documents/jecfa/jecmono/v37je05.htm 42 URL: ... Tên đề tài: Nghiên cứu quy trình xử lý mẫu từ thịt heo để xác định hàm lượng phụ gia natri benzoate phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị 2.1 Thiết bị HPLC Aligent... chưa nghiên cứu nhiều Với hy vọng đóng góp thêm thơng tin quy trình xử lý mẫu từ thịt chúng tơi thực đề tài: ? ?Nghiên cứu quy trình xử lý mẫu từ thịt heo để xác định hàm lượng phụ gia natri benzoate. .. ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA HÓA NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH XỬ LÝ MẪU TỪ THỊT HEO ĐỂ XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG PHỤ GIA NATRI BENZOATE BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ