BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y TRẦN THỊ NGỌC MAI NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CỦA VIÊN NANG NANO NO+ TRÊN CHUỘT CỐNG TRẮNG GÂY TĂNG HUYẾT ÁP BỞI N(G) NITRO L ARGININE METHYL ESTER KHOÁ LU.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y TRẦN THỊ NGỌC MAI NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CỦA VIÊN NANG NANO NO+ TRÊN CHUỘT CỐNG TRẮNG GÂY TĂNG HUYẾT ÁP BỞI N(G)-NITRO-L-ARGININE-METHYL ESTER KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC Hà Nội – 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y TRẦN THỊ NGỌC MAI : NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CỦA VIÊN NANG NANO NO+ TRÊN CHUỘT CỐNG TRẮNG GÂY TĂNG HUYẾT ÁP BỞI N(G)-NITRO-L-ARGININE-METHYL ESTER KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC Cán hướng dẫn: ThS ĐỖ THỊ HƯƠNG LAN Hà Nội – 2022 LỜI CẢM ƠN Trải qua năm phấn đấu học tập Học viện Quân y, giúp đỡ Nhà trường Phịng, Ban, Bộ mơn Học viện Viện Đào tạo Dược, đến tơi hồn thành chương trình học tập Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Đảng ủy - Ban Giám đốc Học viện Viện Đào tạo Dược, Phòng Đào tạo, Bộ môn Dược lý - Viện Đào tạo Dược tạo điều kiện thuận lợi cho thực hồn thành khóa luận Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn đặc biệt đến Th.S Đỗ Thị Hương Lan - người trực tiếp hướng dẫn, PGS.TS Nguyễn Hoàng Ngân, Th.S Nguyễn Thái Biềng giúp đỡ kiến thức, tài liệu phương pháp để tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Thầy, Cơ tồn thể Cán bộ, Nhân viên Viện Đào tạo Dược, đặc biệt Bộ môn Dược lý ln ln nhiệt tình giúp đỡ, hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập, nghiên cứu để tơi hồn thành khóa luận Tôi xin trân trọng cảm ơn thầy cô, Nhà khoa học Hội đồng chấm khóa luận dành nhiều thời gian ý kiến q báu q trình hồn thiện bảo vệ khóa luận Cuối lời cảm ơn gửi đến gia đình, bạn bè, người thân ln bên động viên, giúp đỡ suốt thời gian qua Hà Nội, ngày tháng năm 2022 Học viên Trần Thị Ngọc Mai MỤC LỤC Nội dung Trang TRANG PHỤ BÌA DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT ĐẶT VẤN VỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ VIÊN NANG NANO NO+ 1.1.1 L-arginine L-citrulline 1.1.2 Glutathione 1.1.3 Coenzyme Q10 1.1.4 Curcumin 1.1.5 Resveratrol 1.1.6 Quercetin 1.1.7 Berberine 1.2 TỔNG QUAN VỀ BỆNH TĂNG HUYẾT ÁP 1.2.1 Khái niệm huyết áp 1.2.2 Khái niệm tăng huyết áp 1.2.3 Phân loại tăng huyết áp 1.2.4 Nguyên nhân tăng huyết áp 1.2.5 Một số biến chứng tổn thương quan đích THA 1.3 TỔNG QUAN VỀ NO VÀ VAI TRÒ CỦA NO ĐỐI VỚI SỨC KHOẺ TIM MẠCH 1.3.1 Tổng quan phân tử NO 1.3.2 Cơ chế sinh tổng hợp NO phân tử 10 1.3.3 Cơ chế làm giãn mạch phân tử NO vai trò phân tử NO sức khoẻ tim mạch huyết áp 11 1.4 TỔNG QUAN VỀ STRESS OXY HOÁ 15 1.4.1 Khái niệm stress oxy hố 15 1.4.2 Vai trị stress oxy hoá huyết áp 15 1.4.3 Một số số đánh giá mức độ chống oxy hoá bệnh tăng huyết áp 18 1.5 MỘT SỐ MƠ HÌNH GÂY TĂNG HUYẾT ÁP 20 CHƯƠNG NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 ĐỐI TƯỢNG VÀ VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 23 2.1.1 Chế phẩm nghiên cứu 23 2.1.2 Động vật nghiên cứu 25 2.1.3 Hoá chất nghiên cứu 25 2.1.4 Dụng cụ, máy móc, thiết bị 25 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.2.1 Phương pháp nghiên cứu đánh giá tác dụng chống tăng huyết áp viên nang nano NO+ động vật thực nghiệm 27 2.2.2 Xử lí số liệu 29 2.3 ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU 30 2.4 ĐẠO ĐỨC NGHIÊN CỨU 30 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 31 3.1 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 31 3.1.1 Ảnh hưởng nano NO+ lên huyết áp nhịp tim chuột 31 3.1.2 Ảnh hưởng nano NO+ lên nồng độ NO số đánh giá khả chống oxy hoá (SOD, GSH, MDA) huyết tương chuột 35 3.2 BÀN LUẬN 36 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 45 KẾT LUẬN 45 KIẾN NGHỊ 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Tên bảng Trang Bảng 1.1 Các thành phần viên nang nano NO+ Bảng 1.2 Phân độ huyết áp theo quy định Bộ Y tế năm 2018 Bảng 2.1 Thành phần công thức nano NO+ 23 Bảng 2.2 Số lượng động vật thực nghiệm 24 Bảng 3.1 Kết huyết áp tâm thu chuột nghiên cứu nano NO+ 31 Bảng 3.2 Kết huyết áp tâm trương chuột nghiên cứu nano NO+ 32 Bảng 3.3 Kết huyết áp trung bình chuột nghiên cứu nano NO+ 33 Bảng 3.4 Kết đánh giá nhịp tim chuột nghiên cứu nano NO+ 34 Bảng 3.5 Kết đánh giá nồng độ NO, SOD, GSH, MDA huyết tương chuột gây nghiên cứu nano NO+ 35 DANH MỤC HÌNH Tên hình Trang Hình 1.1 Thực phẩm bảo vệ sức khoẻ nano NO+ Hình 1.2 Phản ứng sinh tổng hợp NO thể 10 Hình 1.3 Sơ đồ trình sản xuất NO tế bào nội mô chế làm giãn mạch NO 12 Hình 2.1 Viên nang cứng nano NO+ (a), bột nang nano NO+ (b) 23 Hình 2.2 Chuột cống trắng chủng Wistar đạt tiêu chuẩn 25 Hình 2.3 Các dụng cụ thiết bị sử dụng nghiên cứu 26 Hình 2.4 Thao tác bắt chuột đánh dấu chia lô (a), thao tác cho chuột uống (b), thao tác lấy máu buồng tim chuột (c) 28 Hình 2.5 Sơ đồ quy trình đánh giá tác dụng chống tăng huyết áp viên nang nano NO+ chuột cống trắng 29 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT STT Phần viết tắt Phần viết đầy đủ ACE Angiotensin - converting enzyme AT1R Angiotensin II Type Receptor BH4 Tetrahydrobiopterin BYT Bộ Y tế cGMP Cyclic guanosine monophosphate (GMP vòng) CoQ10 Coenzyme Q10 CTTA Chẹn thụ thể Angiotensin II DOCA Deoxycorticosteron acetat eNOS Endothelial nitric oxide synthases 10 GSH Glutathione 11 HA Huyết áp 12 HATB Huyết áp trung bình 13 HATT Huyết áp tâm thu 14 HATTr Huyết áp tâm trương 15 iNOS 16 ISH International Society of Hypertension (Hội Tăng huyết áp quốc tế) 17 LDL Low density lipoprotein (Lipoprotein tỉ trọng thấp) 18 L-NAME 19 MDA Inclucible Nitric Oxide Synthase N(G)-nitro-L-arginine-methyl ester Malon dialdehyde 20 n-NOS Non-nitric oxide synthases 21 NOS Nitric oxide synthases 22 NTS Nucleus tarantulas solitarius 23 Ox-LDL 24 RAA Renin - angiotensin - aldosterol 25 RNS Reactive nitrogen species (Các loại nitơ phản ứng) 26 ROS Reactive oxygen species (Gốc tự oxy hoá) 27 sGC S-guanylate cyclase 28 sNO S-nitrosothiol 29 SOD Super oxide dismutase 30 TBMMN Tai biến mạch máu não 31 TCCS Tiêu chuẩn sở 32 THA Tăng huyết áp 33 TM Tĩnh mạch 34 UCMC Ức chế men chuyển 35 WHO World Health Organization (Tổ chức Y tế giới) Oxy low density lipoprotein (Lipoprotein tỉ trọng thấp oxy hóa) tăng rõ rệt sau 3, tuần cho chuột uống L-NAME (bảng 3.1, 3.2, 3.3) Kết chứng tỏ mơ hình gây tăng huyết áp chuột cống nghiên cứu thành công tương đồng với kết báo cáo gây mơ hình tăng huyết áp chuột cống tác giả khác Nano NO+ liều dùng 420 mg/kg 840 mg/kg thể tác dụng hạ huyết áp (cả huyết áp tâm thu, huyết áp tâm trương huyết áp trung bình) mơ hình gây tăng huyết áp chuột cho uống LNAME, tác dụng hạ huyết áp nano NO+ liều thử tương đương so với losartan 25 mg/kg (bảng 3.1, 3.2, 3.3) Bên cạnh tác dụng chống tăng huyết áp tốt, chế phẩm không gây ảnh hưởng đến nhịp tim (bảng 3.4), cho thấy sản phẩm tiềm bệnh lý tăng huyết áp Tác dụng chống tăng huyết áp chế phẩm nghiên cứu kết tác dụng làm tăng NO tác dụng chống oxy hóa (bảng 3.5) Đây tác dụng quan trọng bệnh tim mạch nói chung bệnh tăng huyết áp nói riêng, đặc biệt trường hợp tăng huyết áp bệnh lý mạch máu gây giảm sản sinh NO tổn thương stress oxy hóa mạch Tác dụng sản phẩm nghiên cứu hoàn toàn phù hợp với tác dụng làm tăng giải phóng NO, chống oxy hóa hợp chất thành phần nhiều tác giả chứng minh Mơ hình nghiên cứu cho kết tương đồng với mơ hình thử nghiệm trước [34,37], gây tăng huyết áp chuột đạt hiệu quả: HATT ≥ 140 mmHg và/hoặc HATTr ≥ 100 mmHg Kết nghiên cứu cho thấy, huyết áp tương đồng với huyết áp người, THA người đánh giá HATT ≥ 140 mmHg và/hoặc HATTr ≥ 90 mmHg Tác dụng chống tăng huyết áp HATT HATTr, HATB sau sử dụng nano NO+ đạt hiệu quả, trị số huyết áp trở trị số huyết áp sinh lý bình thường NO phân tử đơn giản đa năng, tổng hợp chủ yếu nội mô mạch máu NO tạo từ L-arginine enzym tổng hợp NO nội mô (eNOS), chuyển hóa L-arginine thành NO NO kích thích guanylyl cyclase tạo thành guanosine monophosphate 3'-5'-cyclic, dẫn đến giãn mạch tế bào trơn mạch máu, ngăn ngừa kết dính kết tập tiểu cầu, đồng thời có tác dụng chống viêm, chống tăng sinh kháng hô hấp bạch cầu, tế bào nội mô , tế bào trơn mạch máu, cung cấp bảo vệ khỏi chứng xơ vữa động mạch Giảm sinh khả dụng NO, đặc điểm rối loạn chức nội mơ, có tăng huyết áp động mạch Đối tượng tăng huyết áp có gia tăng tạo loại oxy phản ứng (ROS), loại bỏ NO, làm giảm sinh khả dụng NO Nồng độ NO thể cải thiện phương pháp dùng thuốc không dùng thuốc Tập thể dục thường xuyên giúp cải thiện chức nội mô đối tượng tăng huyết áp, tác dụng có lợi NOS phục hồi cách sử dụng đồng yếu tố NOS tetrahydrobiopterin (BH4) l -arginine chứng minh Suy giảm giãn mạch phụ thuộc NO chứng minh có trước tăng huyết áp bệnh nhân da đen mắc bệnh cao huyết áp Các chất làm giãn mạch bao gồm NO, prostacyclin (PGI2) yếu tố tăng cường phân cực có nguồn gốc từ nội mơ EDHF (endothelium derived hyperpolarizing factors); chất làm co mạch bao gồm thromboxane (TXA2) endothelin-1 (ET-1) Trong đó, NO chất làm giãn mạch quan trọng nhất, có vai trò đặc biệt quan trọng sức khỏe tim mạch huyết áp [38] Năm 1998, giải Nobel Sinh lý học Y học (Nobel Prize in Physiology or Medicine) trao cho nhà khoa học My gồm Robert F Furchgott, Louis J Ignarro Ferid Murad cho khám phá họ vai trò NO phân tử tín hiệu hệ thống tim mạch Để tăng lượng NO sinh tế bào nội mô cần điều chỉnh chế độ dinh dưỡng giàu protein nhằm cung cấp tiền chất sinh NO gồm L-arginine L-citrulline bổ sung axit amin cách trực tiếp Ngoài ra, số loại thuốc giải phóng NO nitrat hữu hợp chất nitro nitroso sử dụng để điều trị đau thắt ngực, tổn thương suy tim sung huyết thiếu máu cục - tái tưới máu tăng áp phổi [39] Stress oxy hóa có liên quan đóng vai trị quan trọng sinh lý bệnh tăng huyết áp nguyên phát Về mặt này, ROS hoạt động chất trung gian chất co mạch sinh lý chính, làm tăng nồng độ canxi nội bào Các yếu tố gây nhiễu xảy bệnh nhân bao gồm bệnh lý phương pháp điều trị đồng thời tồn thiếu lựa chọn phương pháp điều trị theo mức độ ROS, số bệnh khác ROS vừa hậu vừa nguyên nhân gây tăng huyết áp, loại oxy phản ứng trực tiếp làm thay đổi chức mạch máu, gây thay đổi trương lực mạch máu số chế bao gồm thay đổi sinh khả dụng truyền tín hiệu NO Các enzym sản xuất ROS liên quan đến tăng stress oxy hóa mơ mạch bao gồm NADPH oxidase (Nox), xanthine oxidase chuỗi hơ hấp ty thể Các anion superoxide phản ứng trực tiếp với NO, kích thích sản xuất sản phẩm phản ứng NO/superoxide anion peroxynitrite (ONOO-), chứng minh loại bỏ liên kết tổng hợp nitric oxide nội mơ (eNOS), gây NO chống tăng huyết áp, chống xơ vữa động mạch Sản xuất enzyme để trở thành enzyme sản xuất ROS, đẩy nhanh q trình xơ vữa động mạch Tuy nhiên, gia tăng stress oxy hóa hệ mạch không giới hạn lớp nội mạc chứng minh xảy lớp tế bào trơn lớp mô đệm Tăng sản xuất ROS có hậu quan trọng liên quan đến việc truyền tín hiệu guanylate cyclase hịa tan kinase I phụ thuộc vào guanosine monophosphate, mà hoạt động biểu chúng chứng minh điều chỉnh theo cách nhạy cảm với oxy hóa khử Như vậy, vai trị nguồn enzym khác gây stress oxy hóa có liên quan đến tăng huyết áp Nếu stress oxy hoá nguyên nhân gây tăng huyết áp, chất chống oxy hố phải có tác dụng hữu ích việc kiểm soát tăng huyết áp giảm tổn thương oxy hoá se dẫn đến hạ huyết áp Do đó, việc bổ sung chất chống oxy hóa polyphenol chế độ ăn uống có tác dụng ngăn ngừa giảm bệnh tăng huyết áp Mặc dù sở phân tử có chứng in vitro ủng hộ việc sử dụng chất chống oxy hóa ngày đa dạng Cần phải thực thử nghiệm bản/lâm sàng để chứng minh cho phát hiện tại, điều cuối giúp làm sáng tỏ vai trị chất chống oxy hóa liệu pháp cho bệnh tăng huyết áp Kết nghiên cứu thu phù hợp với tác dụng thành phần có viên nang nano NO+ bao gồm tác dụng tăng tổng hợp bảo vệ NO, giảm stress oxy hoá cách sử dụng chất chống oxy hoá Về thành phần viên nang, L-arginine L-citrulline hai tiền chất quan trọng để tổng hợp NO tế bào nội mô L-arginine khơng chất enzyme eNOS mà cịn có tác dụng làm tăng tổng hợp cofactor BH4 tế bào nội mơ làm tăng hoạt tính eNOS Glutathione chất có tác dụng chống oxi hóa mạnh, loại bỏ gốc tự gây, bảo vệ chức enzyme eNOS tế bào nội mô Glutathione làm tăng tổng hợp NO cGMP, bảo vệ NO khỏi công gốc tự làm tăng tính sinh khả dụng NO Glutathione cịn tham gia vào đường truyền tín hiệu SNO điều kiện thiếu O2 Các hợp chất CoQ10, curcumin, resveratrol, quercetin, berberine hợp chất có tác dụng chống oxi hóa, kháng viêm, giúp tăng tổng hợp NO, giảm LDL glucose máu, ngăn ngừa xơ vữa động mạch hạ huyết áp Rối loạn chức nội mơ giảm hoạt tính sinh học nitric oxide (NO) đại diện cho bất thường sinh lý bệnh bật liên quan đến bệnh tim mạch tăng huyết áp Những người bị tăng huyết áp có biểu giãn nở mạch máu tâm mạc kháng lực chất chủ vận nitric oxide (NO) có nguồn gốc từ nội mơ tuần hồn ngoại vi động mạch vành có khả góp phần vào chế thay đổi trương lực mạch máu tăng huyết áp Axit amin Larginine đóng vai trị chất để sản xuất NO mạch máu Nhiều nghiên cứu chứng minh tác dụng có lợi việc bổ sung L-arginine cấp tính mãn tính sản xuất EDNO chức nội mô, L-arginine chứng minh làm giảm huyết áp toàn thân số dạng tăng huyết áp thực nghiệm Như chế tác dụng L-arginine bao gồm điều chỉnh sản xuất NO, thay đổi dimethylarginine không đối xứng (ADMA): Cân L-arginine cải thiện độ nhạy insulin Sinh NO từ L-arginine eNOS hình thành cGMP) thơng qua hoạt hóa guanylyl cyclase NO Chất ức chế eNOS, ADMA yếu tố nguy tim mạch biết Tuy nhiên, số trường hợp thể bị rối loạn chuyển hóa, rối loạn chức ruột non thận lượng L-arginine tổng hợp nội sinh khơng đáp ứng nhu cầu thể Bổ sung L-citrulline cho thấy cải thiện chức nội mô bị thay đổi ADMA động mạch vành Xuan cộng chứng minh Lcitrulline đảo ngược điều hịa giảm biểu eNOS q trình phosphoryl hóa ADMA gây Mức protein eNOS p-eNOS-Ser1177 mức mRNA eNOS khơi phục giá trị kiểm sốt Ananthakrishnan cộng công bố nghiên cứu khác việc bổ sung L-citrulline cải thiện phát triển tăng áp phổi tăng sản xuất NO điều kiện bị thiếu oxy mãn tính L-citrulline làm tăng sinh tổng hợp NO cách gián tiếp cách tăng sản xuất L-arginine, dẫn đến cải thiện chức giãn mạch nội mô Các đề tài nghiên cứu động vật chức nội mơ cải thiện nhờ khả bổ sung L-citrulline để tăng Larginine Một số thử nghiệm lâm sàng chứng minh rằng, bổ sung L-arginine theo đường uống có tác dụng tăng tổng hợp NO tế bào nội mô, giúp cải thiện số triệu chứng lâm sàng người mắc bệnh tim mạch Các nghiên cứu dược động học L-arginine cho thấy, L-arginine an tồn dùng đường uống, tác dụng khơng mong muốn L-arginine hầu hết nhẹ phụ thuộc vào liều lượng [5] L-citrulline axit amin không thiết yếu thường không tìm thấy loại thực phẩm khác ngồi dưa hấu Ngược lại với L-arginine, Lcitrulline có hiệu bỏ qua q trình chuyển hóa ruột gan, giúp đến thận, nơi chuyển hóa thành L-arginine [36] Những đặc tính mong muốn để tăng nồng độ L-arginine toàn thân Schwedhelm cộng khảo sát liều lượng khác L-arginine L-citrulline đường uống ảnh hưởng đến nồng độ L-arginine huyết tương thông số dược lực học ty lệ [Arg] / [ADMA] huyết tương, nitrat nước tiểu tiết cGMP (dấu hiệu thay sản xuất NO) qua trung gian dòng chảy giãn mạch (FMD) sau tuần Như vậy, sử dụng L-citrulline coi cách tiếp cận khơng dùng thuốc hấp dẫn để nâng cao sinh khả dụng NO, có khả chống lại nhiều bệnh liên quan đến tuổi tác và/hoặc lối sống L-citrulline coi tương đối an tồn có có nguy tác dụng phụ dùng liều cao Glutathione (GSH) tripeptide (�-glutamylcysteinylglycine), chất chống oxy hóa quan trọng thể, có tác dụng loại bỏ lipid peroxides gốc tự GSH chất đệm oxy hố khử thiol-disulfide nội bào Stress oxy hố có liên quan đến q trình oxy hoá suy giảm GSH, GSH glutathione peroxidase (Gpx-1) để giảm H2O2 hydroperoxit hữu Phản ứng tổng thể làm giảm phân tử peroxide thành hai vùng nước kết hợp oxy hoá hai phân tử glutathione giải phóng glutathione bị oxy hố - glutathione disulfide (GSSD) Glutathione transferase (GST) phần trình giải độc giai đoạn xúc tác khử hoạt tính nhiều chất có hại u cầu cho phản ứng giảm glutathione (GSH) đồng yếu tố Vì nhiều đường trao đổi chất dẫn đến giảm GSH tăng nồng độ GSSG, việc phục hồi lượng glutathione bị giảm quan trọng q trình chuyển hóa oxy hóa khử glutathione Glutathione reductase (GR), xúc tác phản ứng: NADPH + GSSG + H+ → NADP+ + GSH, đóng vai trị quan trọng việc trì trạng thái oxy hóa tế bào Sự chuyển hóa glutathione hồng cầu khơng cần thiết cho cân oxy hóa khử mà cịn cần thiết q trình sinh học nitric oxide hồng cầu Do đó, GSH giảm góp phần vào tăng ty lệ mắc bệnh tăng huyết áp Theo tác giả McKinley - Barnard cộng sự, bổ sung GSH kết hợp với L-citrulline khơng có tác dụng làm tăng tổng hợp NO tế bào nội mơ mà cịn có tác dụng làm tăng tổng hợp nitrit phân tử quan trọng cGMP có tác dụng làm giãn mạch theo đường truyền tín hiệu NO-sGC/cGMP [9,10] Giảm hoạt động enzyme chống oxy hoá tăng huyết áp giải thích suy giảm phản ứng biểu enzyme bất hoạt enzyme điều kiện stress oxy hố Do đó, điều trị hạ huyết áp làm giảm stress oxy hoá dẫn đến việc tăng mức GSH GSSH tăng cường đáng kể enzyme tham gia vào q trình chuyển hố GSH Căn nguyên số rối loạn tim mạch cho liên quan đến chức ty thể bị suy giảm stress oxy hóa Coenzyme Q10 (CoQ10) hoạt động chất chống oxy hóa chất nhận điện tử cấp độ ty thể Hơn nữa, bệnh nhân mắc bệnh tim mạch, CoQ10 huyết tương phát yếu tố tiên lượng độc lập ty lệ tử vong Dựa vai trò CoQ10 q trình sinh khí ty thể đặc tính chống oxy hóa thừa nhận nó, số thử nghiệm lâm sàng đánh giá CoQ10 thực rối loạn tim mạch lão hóa bao gồm suy tim mãn tính, tăng huyết áp rối loạn chức nội mô CoQ10 liệu pháp dường an toàn dung nạp tốt [40] Trong số hợp chất tự nhiên, curcumin (CUR) hợp chất polyphenol tự nhiên có hoạt tính chống oxy hóa mạnh me có nhiều tác dụng có lợi cho tim mạch huyết áp Tetrahydrocurcumin (THU), chất chuyển hóa CUR, có số tác dụng dược lý tương tự CUR CUR THU ngăn chặn đáng kể gia tăng huyết áp, giảm sức cản mạch máu phục hồi khả đáp ứng mạch máu Việc cải thiện rối loạn chức mạch máu có liên quan đến việc phục hồi ức chế rõ rệt biểu protein eNOS mô động mạch chủ nitrat/nitrit huyết tương Hơn nữa, CUR THU làm giảm sản xuất superoxide mạch máu, giảm stress oxy hóa, tăng glutathione máu (GSH) bị stress oxy hóa trước ty lệ oxy hóa khử GSH Động vật bị tăng huyết áp có độ dày thành diện tích mặt cắt ngang động mạch chủ tăng lên, kèm theo gia tăng tương đối myofibrils dương tính giảm hàm lượng elastin, collagen actin Những phát cho thấy curcumin, đặc tính chống oxy hóa chelat hóa nó, chất bảo vệ chống lại bệnh tăng huyết áp rối loạn chức mạch máu [40] Resveratrol hợp chất polyphenolic khơng phải flavonoid có tác dụng oxy hố mạnh có tác dụng sinh học có lợi sức khoẻ tim mạch Các nghiên cứu tiền lâm sàng cung cấp chứng thuyết phục resveratrol có tác dụng có lợi mơ hình động vật tăng huyết áp, xơ vữa động mạch , đột quỵ,bệnh tim thiếu máu cục , rối loạn nhịp tim Resveratrol tác động đến bệnh lý tim mạch thơng qua trung gian kích hoạt điều chỉnh thơng tin (SIRT1), protein kinase hoạt hóa AMP (AMPK), enzym chống oxy hóa nội sinh Sự biểu mức SIRT1 kết hợp với điều trị với resveratrol làm giảm biểu thụ thể Ang II AT1 tế bào trơn mạch máu Sự biểu thụ thể AT động mạch chủ chuột bị ức chế resveratrol tăng huyết áp Ang-II bị giảm động lực Ngoài ra, Resveratrol làm giảm nguy tim mạch cách ức chế stress oxy hóa cách phong tỏa q trình tạo ROS điều hịa sản xuất thuốc giãn mạch co mạch Sau uống resveratrol qua đường uống, trình tái hấp thu diễn nhanh động vật người, nhiên, nồng độ huyết tương thường thấp resveratrol chuyển đổi nhanh chóng thành chất chuyển hóa mà sau tiết nhanh chóng Resveratrol thường sử dụng nhằm kiểm soát huyết áp thêm vào liệu pháp hạ huyết áp tiêu chuẩn cách tăng sản xuất nitric oxide (NO), chất giãn mạch nội sinh mạnh NO tạo lớp nội mạc lót mạch máu, nơi tạo điều kiện cho giãn mạch thơng qua việc kích hoạt enzym guanylate cyclase (GC) GC sau bắt đầu dịng thác tín hiệu, dẫn đến giãn lớp trơn giãn mạch Giãn mạch làm giảm sức cản ngoại vi, ảnh hưởng trực tiếp đến áp lực động mạch hạ HA [38] Quercetin flavonoid polyphenolic Thường thấy phổ biến táo, hành tây, mọng rượu vang đỏ Các chế tác dụng hạ huyết áp quercetin bao gồm giảm stress oxy hóa, ức chế hoạt động enzym chuyển đổi angiotensin, cải thiện chức nội mô, tác động trực tiếp lên trơn mạch máu và/hoặc điều chỉnh tín hiệu tế bào biểu gen Điều trị quercetin làm giảm huyết áp, giảm phì đại tim protein niệu Sự giảm thư giãn phụ thuộc vào nội mạc acetylcholin vòng động mạch chủ cải thiện cách điều trị quercetin mãn tính, tăng phản ứng co mạch phụ thuộc nội mô với acetylcholine sản xuất mức TXB2 mạch động mạch chủ [39] Tăng NO huyết tương TBARS, giảm mức độ tổng số glutathione (GSH) gan hoạt động glutathione peroxidase (GPX) Bình thường hóa nồng độ NO TBARS huyết tương cải thiện hệ thống phịng thủ chống oxy hóa gan với tác dụng hạ huyết áp quercetin Như vậy, điều trị đường uống mãn tính với quercetin cho thấy tác dụng hạ huyết áp chống oxy hóa Theo nghiên cứu Gormaz cộng sự, bệnh nhân mắc bệnh tăng huyết áp điều trị với quercetin với liều lượng g/ngày vòng 28 ngày, huyết áp hạ ổn định so với nhóm đối chứng dùng giả dược [41] Berberine alkaloid isoquinoline, loại alkaloid thực vật sử dụng y học phương đông nhiều thiên niên ky để điều trị số bệnh, bao gồm bệnh tim mạch yếu tố nguy Berberine chứng minh làm giảm căng thẳng oxy hóa thơng qua cải thiện mật độ ty thể tăng hoạt động Ang I Ang II Berberine trì hỗn khởi phát làm giảm mức độ nghiêm trọng tăng huyết áp, cải thiện tình trạng tổn thương thận tăng huyết áp gây Hơn nữa, berberin ức chế hoạt động RAS cytokine tiền viêm IL-6, IL-17 IL-23, có liên quan đến sinh lý bệnh tăng huyết áp Ngồi ra, berberine cịn phát có tác dụng bảo vệ tim mạch bệnh tiểu đường để làm giảm tổn thương nội mô cách giảm hoạt động NADPH oxidase giảm hình thành sản phẩm cuối glycation nâng cao (AGEs) Hơn nữa, berberine cải thiện giãn mạch phụ thuộc vào nội mơ cách kích thích đường kích hoạt adenosine monophosphate protein kinase (AMPK) tăng phosphoryl hóa tổng hợp nitric oxide nội mơ (eNOS) Berberine làm giảm co thắt trơn cách giảm Ca2+ nội bào Berberine gây thư giãn trơn cách kích hoạt kênh BK Ca chuột mắc bệnh tiểu đường Kết thử nghiệm lâm sàng berberine 77 bệnh nhân bị suy tim mãn tính cho thấy, với liều lượng berberine 1,2 - g/ngày vòng 24 tháng, bệnh nhân cải thiện sức khỏe so với nhóm đối chứng dùng giả dược Với berberine liều lượng thấp 0.4 g/ngày kết hợp với thuốc chống suy tim, chất lượng sống bệnh nhân cải thiện so với trước dùng berberine Ngồi ra, berberine có tác dụng chống oxy hố, giảm cholesterol, ức chế tăng sinh già hoá tế bào trơn mạch máu gây căng thẳng học [14] KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Trên chuột cống trắng gây tăng huyết áp cho uống L-NAME, nano NO+ liều dùng 420 mg/kg 840 mg/kg thể tác dụng: 1.1 Đã đánh giá tác dụng chống tăng huyết áp viên nang nano NO+ chuột cống trắng gây tăng huyết áp N(G)-nitro-L-arginine-methyl ester: - Chống tăng huyết áp: huyết áp tâm thu, huyết áp tâm trương huyết áp trung bình chuột nghiên cứu - Không ảnh hưởng đến nhịp tim chuột 1.2 Đã đánh giá tác dụng hồi phục NO, chống oxy hóa viên nang nano NO+ mơ hình thực nghiệm: - Làm tăng NO huyết tương chuột, tăng tác dụng chống oxy hóa chuột cho uống L-NAME thể qua số làm tăng SOD, GSH giảm MDA huyết tương chuột Các tác dụng nano NO+ liều thử nghiệm tương đương so với losartan 25mg/kg Kết cho thấy sản phẩm nano NO+ sản phẩm có hiệu chống tăng huyết áp tốt an toàn Với việc tập trung vào chế làm tăng NO chống oxy hóa, sản phẩm phối kết hợp tốt điều trị tăng huyết áp, đặc biệt trường hợp tăng huyết áp kháng với thuốc hạ huyết áp theo chế khác, nội mạch mạch máu tổn thương làm giảm sản xuất NO tăng stress oxy hoá KIẾN NGHỊ Với chế làm tăng NO chống oxy hóa, sản phẩm có hiệu tốt bệnh lý tim mạch khác vữa xơ mạch, thiếu máu tim Từ cần phát triển nghiên cứu thêm Thực phẩm bảo vệ sức khoẻ Viên nang nano NO+ như: Đánh giá thêm tác dụng sản phẩm nano NO+ bệnh lý tim mạch khác Tiến hành nghiên cứu đánh giá tính an tồn hiệu lâm sàng sản phẩm viên nang nano NO+ TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Y tế (2010) Hướng dẫn chẩn đoán điều trị tăng huyết áp Quyết định số 3192/QĐ - BYT, ngày 31/08/2010 Baradaran, A., Nasri, H., Rafieian-Kopaei, M (2014) Oxidative stress and hypertension: Possibility of hypertension therapy with antioxidants The official journal of Isfahan University of Medical Sciences 19(4), 358 Rodrigo, R., Brito, R., et al (2016) Oxidative Stress and Essential Hypertension In (Ed.) Intech Open: - 12 Khalaf, D., et al (2019) The Effects of Oral L-Arginine and LCitrulline Supplementation on Blood Pressure Nutrients 11(7): 56 - 75 Figueroa, A., et al (2017) Influence of L-citrulline and watermelon supplementation on vascular function and exercise performance Curr Opin Clin Nutr Metab Care 20(1): 92 - 98 McKinley - Barnard, S., et al (2015) Combined L-citrulline and glutathione supplementation increases the concentration of markers indicative of nitric oxide synthesis J Int Soc Sports Nutr 12: 24 - 27 McKinley-Barnard S, Andre T, et al (2015) Combined L-citrulline and glutathione supplementation increase the concentration of markers indicative of nitric oxide synthesis J Int Soc Sports Nutr: 12 - 27 Tsai KL, Huang YH, et al (2012) A novel mechanism of coenzyme Q10 protects against human endothelial cells from oxidative stress-induced injury by modulating NO-related pathways J Nutr Biochem 23 458 - 68 Santos-Parker JR, Strahler TR, et al, (2017) Curcumin supplementation improves vascular endothelial function in healthy middle-aged and older adults by increasing nitric oxide bioavailability and reducing oxidative stress Aging (Albany NY) 9(1): 187 - 208 10 Xia N, Daiber A, Habermeier A, et al (2010) Resveratrol reverses endothelial nitric-oxide synthase uncoupling in apolipoprotein E knockout mice J Pharmacol Exp Ther 335(1): 149 - 54 11 Xue F, Nie X, Shi J, et al (2017) Quercetin Inhibits LPS-Induced Inflammation and ox-LDL-Induced Lipid Deposition Front Pharmacol: - 40 12 Suri S, Liu XH, et al (2010) Quercetin and its major metabolites selectively modulate cyclic GMP-dependent relaxations and associated tolerance in pig isolated coronary arteries Br J Pharmacol 159(3): 566 - 75 13 Zhang M, Feng L, et al (2016) Therapeutic Potential and Mechanisms of Berberine in Cardiovascular Disease Curr Pharmacol Rep 2: 281 - 292 14 Lan J, Zhao Y, et al (2015) Meta-analysis of the effect and safety of berberine in the treatment of type diabetes mellitus, hyperlipemia, and hypertension J Ethnopharmacol 23(161): 69 - 81 15 Nguyễn Huy Dung (2005), 22 giảng chọn lọc Nội khoa Tim mạch Nhà xuất Y học: - 22 16 Phạm Tử Dương (2005), Bệnh tăng huyết áp (xuất lần thứ 2) Nhà xuất Y học: 110 - 116 17 Vũ Đình Hải (2002), Tăng huyết áp, lời khuyên người bệnh NXB Y học: 34 - 55 18 WHO - ISH Hypertension Guidelines Committee (1999) Guideline for Management of Hypertension J Hypertens 17(2): 151 - 185 19 The Nobel Prize in Physiology or Medicine (1998) was awarded jointly to Robert F Furchgott, Louis J Ignarro, and Ferid Murad "for their discoveries concerning nitric oxide as a signaling molecule in the cardiovascular system." 20 Toda N, Okamura T (2013) The pharmacology of nitric oxide in the peripheral nervous system of blood vessels Pharmacol Rev 55(2): 271 – 324 21 Underlying Cause of Death (2018) CDC WONDER Online Database Atlanta Centers for Disease Control and Prevention 22 Li H, Cui H, Kundu TK, et al (2018) Nitric oxide production from nitrite occurs primarily in tissues not in the blood: critical role of xanthine oxidase and aldehyde oxidase J Biol Chem 283: 17855 - 63 23 Edwards AD (2015) The pharmacology of inhaled nitric oxide Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed 72(2): 127 - 130 24 Aird WC (2017) Phenotypic heterogeneity of the endothelium: II Representative vascular beds Circ Res 100: 174 - 90 25 Farah C, Michel LYM, Balligand JL (2018) Nitric oxide signaling in cardiovascular health and disease Nat Rev Cardiol 15(5): 292 - 316 26 Shah RC, Sanker S, Wood KC, et al (2018) Redox regulation of soluble guanylyl cyclase Nitric Oxide 76: 97 - 104 27 Zhang R, Hess DT, Qian Z, et al (2015) Hemoglobin βCys93 is essential for cardiovascular function and integrated response to hypoxia Proc Natl Acad Sci U S A 112(20): 6425 - 6430 28 Zhang R, Hess DT, Reynolds JD, et al (2016) Hemoglobin Snitrosylation plays an essential role in cardioprotection J Clin Invest 126(12): 4654 - 4658 29 Baradaran A, Nasri H, Rafieian-Kopaei M (2014) Oxidative stress and hypertension: Possibility of hypertension therapy with antioxidants J Res Med Sci 19(4): 358 - 67 30 Rodrigo, R., González, J & Paoletto (2011) The role of oxidative stress in the pathophysiology of hypertension Hypertens Res 34: 431 - 440 31 Baradaran, A., Nasri, H., & Rafieian-Kopaei, M (2014) Oxidative stress and hypertension: Possibility of hypertension therapy with antioxidants Journal of research in medical sciences: the official journal of Isfahan University of Medical Sciences 19(4): 358 – 367 32 Ganong W.F (2012) Review of medical physiology McGraw - Hill Educ 24: 521 - 533 33 Guyton A C., Hall J E (2015), Textbook of Medical Physiology, Saunders Company, Philadelphia 34 Bilanda, D C., et al (2017) Bidens pilosa Ethylene acetate extract can protect against L-NAME-induced hypertension in rats BMC Complement Altern Med 17(1): 47 - 35 Yao Y, Wang W (2016) Curcumin Exerts its Antihypertensive Effect by Down - regulating the AT1 Receptor in Vascular Smooth Muscle Cells Sci Rep 6(2): 255 - 79 36 Bryan NS, Grisham MB (2007) Methods to detect nitric oxide and its metabolites in biological samples Free Radic Biol Med 43(5): 645 - 57 37 Bùi Thanh Hà, Trần Quốc Bảo, Hoàng Trung Vinh cs (2015) Nghiên cứu tác dụng hạ huyết áp thuốc HA-02 động vật thực nghiệm Tạp chí Y- Dược học Quân (5): 28 38 Xia N, Daiber A, Habermeier A (2010) Resveratrol reverses endothelial nitric - oxide synthase uncoupling in apolipoprotein E knockout mice J Pharmacol Exp Ther 335(1): 149 - 54 39 Xue F, Nie X (2017) Quercetin Inhibits LPS - Induced Inflammation and Ox-LDL-Induced Lipid Deposition Front Pharmacol 3(8): 40 40 Santos - Parker JR, Strahler TR (2017) Curcumin supplementation improves vascular endothelial function in healthy middle-aged and older adults by increasing nitric oxide bioavailability and reducing oxidative stress Aging (Albany NY) 9(1): 187 - 208 41.Gormaz JG, Quintremil S, Rodrigo R (2015) Cardiovascular Disease: A Target for the Pharmacological Effects of Quercetin Curr Top Med Chem 15(17):1735 – 42 ... khoa học tác dụng chống tăng huyết áp viên nang NO+, tiến hành nghiên cứu đề tài: ? ?Nghiên cứu tác dụng viên nang nano NO+ chuột cống trắng gây tăng huyết áp N(G)-nitro-L-arginine-methyl ester? ??,... Đánh giá tác dụng chống tăng huyết áp viên nang nano NO+ chuột cống trắng gây tăng huyết áp N(G)-nitro-L-arginine-methyl ester Đánh giá tác dụng hồi phục NO, chống oxy hóa viên nang nano NO+ mơ... huyết áp chó, thỏ chuột Có thể sử dụng phương pháp sau để gây tăng huyết áp: tăng huyết áp mạch máu, tăng huyết áp nội tiết * Tăng huyết áp chế độ ăn Gây tăng huyết áp cách tăng lượng muối chế