Bài viết Ảnh hưởng của phương thức sấy đến hàm lượng hoạt chất và hoạt tính sinh học của lá và vỏ cây chân danh hoa thưa (Eunonymus laxiflorus Champ.) thu hái tại Vườn quốc gia Yokdon, tỉnh Đắk Lắk trình bày việc khảo sát ảnh hưởng của phương pháp làm khô gồm sấy bằng tủ sấy ở các nhiệt độ khác nhau (50ºC, 60ºC, 70ºC, 80ºC) và phơi truyền thống đến tổng hàm lượng polyphenol, flavonoid và hoạt tính sinh học của vỏ thân và lá cây chân danh gồm khả năng kháng oxy hoá, ức chế α-amylase và α-glucosidase. K
ISSN 1859-1531 - TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ - ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG, VOL 19, NO 4.2, 2021 ẢNH HƯỞNG CỦA PHƯƠNG THỨC SẤY ĐẾN HÀM LƯỢNG HOẠT CHẤT VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA LÁ VÀ VỎ CÂY CHÂN DANH HOA THƯA (EUNONYMUS LAXIFLORUS CHAMP.) THU HÁI TẠI VƯỜN QUỐC GIA YOKDON, TỈNH ĐẮK LẮK EFFECT OF DRYING METHODS ON THE CONTENTS OFBIOACTIVE COMPONENTS AND BIOLOGICAL ACTIVITIES OF LEAVES AND TRUNK-BARK OF EUNONYMUS LAXIFLORUS CHAMP COLLECTED IN YOK DON NATIONAL PARK, DAK LAK PROVINCE Hoàng Lê Hằng1, Hoàng Văn Chuyển1, Nguyễn Anh Dũng1, Nguyễn Quang Vinh1* Trường Đại học Tây Nguyên * Tác giả liên hệ: nqvinh@ttn.edu.vn (Nhận bài: 15/9/2020; Chấp nhận đăng: 10/11/2020) Tóm tắt - Chân danh hoa thưa (Euonymus laxiflorus Champ Ex Beth) thuốc thu thập Việt Nam, nhiều công bố cho thấy vỏ thân chân danh chứa thành phần có khả kháng oxy hoá, ức chế enzyme gây hạ đường huyết mơ hình gây đái tháo đường Nghiên cứu khảo sát ảnh hưởng phương pháp làm khô gồm sấy tủ sấy nhiệt độ khác (50ºC, 60ºC, 70ºC, 80ºC) phơi truyền thống đến tổng hàm lượng polyphenol, flavonoid hoạt tính sinh học vỏ thân chân danh gồm khả kháng oxy hoá, ức chế α-amylase α-glucosidase Kết cho thấy, nhiệt độ sấy phơi có ảnh hưởng đến hàm lượng chất hoạt tính sinh học vỏ thân chân danh Trong đó, phương pháp phơi truyền thống có khả giữ thành phần có hoạt tính kháng oxy hố ức chế enzyme khảo sát cao chiết vỏ thân chân danh cao so với sấy nhiệt độ 700C 800C thấp so với sấy 600C Đồng thời, nhiệt độ sấy 600C thể hiệu cao nghiên cứu Abstract - The Euonymus laxiflorus Champ Ex Beth is a traditional medicinal plant collected in Vietnam that has been reported to present several bioactivities such as aintoxidants, enzyme inhibitory, hypoglycemic and antidiabetic activities This study was to investigate the effects of a drying methods including oven drying at different temperatures (50ºC, 60ºC, 70ºC, 80ºC) and traditional sun drying to the total contents of polyphenol, flavonoid and biological activities of the bark and leaves of the plant include anti-oxidant, α-amylase and α-glucosidase inhibitory activities The results showed that drying temperature and traditional drying methods affect the contents of bioactive components and biological activities of the bark and leaves of Euonymus laxiflorus Champ Amongst them, the traditional sun drying method is capable of retaining the ingredients possessed antioxidants and enzyme inhibitory activities in the bark and leaves extracts of Euonymus laxiflorus Champ higher than drying at 70ºC and 80ºC but lower than drying at 60ºC The results also indicated that drying temperatureat 60ºC was the most effective in this research Từ khóa - Chân danh hoa thưa; nhiệt độ sấy; kháng oxy hoá; ức chế α-amylase α-glucosidase Key words - Euonymus laxiflorus Champ, drying temperature, antioxidant, α-amylase and α-glucosidase inhibitors Giới thiệu Chân danh gỗ nhỏ thuộc họ Celastraceae phân bố chủ yếu số nước châu Á Campuchia, Ấn Độ, Myanmar, Trung Quốc, Việt Nam [15] Tại Việt Nam, mọc hoang dã khu rừng thuộc tỉnh Nghệ An, Quảng Trị, Đăk Lăk, Lâm Đồng Trong y học cổ truyền, chân danh sử dụng có tác dụng bổ gan thận, an thần, giảm đau mỏi, mạnh gân xương, ngồi cịn dùng đắp ngồi để trị ngoại thương xuất huyết [4] Trong năm gần đây, số công bố cho thấy cao chiết methanol vỏ chân danh có khả kháng oxy hố, ức chế enzyme hạ đường huyết mơ hình động vật thí nghiệm [12, 15] Trong cao chiết methanol vỏ thân Chân danh chứa hợp chất phenolic axit gallic, gallocatechin, polycondensed tannin, catechin, methyl galloate, catechin số hợp chất phát có hoạt tính kháng oxy hố cao walterolactone A/B-D-pyranoglucoside, schweinfurthinol 9-O Dpyranoglucoside,1-O-(3-methyl)-butenoyl-myo-inositol leonuriside [13, 15] Phương pháp điều kiện làm khô thảo dược ảnh hưởng lớn đến thành phần chất có hoạt tính sinh học nguyên liệu Một số công bố cho thấy, trình sấy làm giảm hàm lượng hợp chất polyphenol q trình oxy hố hợp chất, nhiệt enzyme [19] Một số nghiên cứu lại cho thấy, sấy làm tăng hàm lượng polyphenol, flavonoid tổng số tăng khả kháng oxy hoá vật liệu [21] Kết nghiên cứu Quang Vinh Nguyen Hoang Van Chuyen [22] cho thấy, nhiệt độ sấy ảnh hưởng đến hàm lượng chất có hoạt tính kháng oxy hố đài hoa bụp dấm (Hibiscus sabdariffa L.) Trong đó, nhiệt độ sấy giữ tổng hàm lượng polyphenol tổng số khả kháng oxy hoá cao đài hoa bụp dấm 800C Trong đó, Erick C.López-Vida cs [5] nghiên cứu sấy mortino (Vaccinium meridionale Swartz) nhiệt độ 40, 50 600C cho thấy, nhiệt độ sấy 600C thích hợp để giữ hợp chất polyphenol anthocyanins cao nhiệt độ nghiên cứu Từ nghiên cứu cho thấy, nhiệt độ sấy phù hợp cho loại nguyên liệu để giữ chất có hoạt tính sinh Tay Nguyen University (Hoang Le Hang, Hoang Van Chuyen, Nguyen Anh Dung, Nguyen Quang Vinh) Hoàng Lê Hằng, Hoàng Văn Chuyển, Nguyễn Anh Dũng, Nguyễn Quang Vinh học khác Trong đó, nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ sấy đến tổng hàm lượng polyphenol flavonoid, hoạt tính kháng oxy hố ức chế enzyme có liên quan đến bệnh đái tháo đường chân danh hoa thưa chưa cơng bố Vì vậy, nghiên cứu nhằm mục đích xác định phương thức sấy thích hợp để giữ chất có hoạt tính sinh học cao vỏ thân chân danh thu hái vườn quốc gia Yok Đôn, tỉnh Đắk Lắk Vật liệu phương pháp nghiên cứu 2.1 Vật liệu nghiên cứu - Hóa chất: Sodium carbonate, Methanol, NaOH, pNPG.2,2-Diphenyl-2-picrylhydrazyl hydrat, axit gallic, quercetin, kali ferricyanide, natri nitrat, nhôm clorua, streptozotocin, a-amylase tuyến tụy, a-glucosidase từ nấm men, p-nitrophenyla-D-glucopyranoside, axit dinitrosalicylic (DNS) mua từ hãng SigmaAldrich (St Louis, MO, Hoa Kỳ), Folin - Ciocalteu reagent mua từ hãng Merck (Đức) Cồn thực phẩm mua từ công ty Đại Việt (Lô CN5, khu công nghiệp Tâm Thắng, xã Tâm Thắng, Huyện Cư Jút, Tỉnh Đăk Nông) 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp thu hái sơ chế Vỏ thân chân danh thu hái vào tháng 5/2019 vườn quốc gia Yok Đôn, tỉnh Đắk Lắk Sau đó, rửa nước máy làm khơ tủ sấy đối lưu khơng khí nóng, nhiệt độ trung bình từ 500C, 600C, 700C, 800C phơi nắng trực tiếp (nhiệt độ từ 25-30ºC) đến đạt độ ẩm 8% (đo máy cân độ ẩm hồng ngoại) Mẫu sau sấy dùng đóng bao PE bảo quản mơi trường khơ thống trước phân tích Các mẫu khô (vỏ thân lá) nghiền máy nghiền (LM-M010W, LiHOM Inc., Seoul, Korea) Sau đó, lấy gram bột nghiền trích ly với 50mL cồn thực phẩm 96%, siêu âm phút lắc máy lắc với tốc độ 150 rpm/1 phút 24h Sau đó, mẫu giấy lọc giấy lọc (No 1, Whatman International LTD, Maidstone, England) Bã trích ly lọc lặp lại lần Dịch lọc cô quay đuổi bớt dung môi định mức thành 100 mL bình định mức Dịch trích ly dùng bảo quản tủ lạnh -300C bình thuỷ tinh màu 2.2.2 Phương pháp xác định tổng hàm lượng polyphenol dịch chiết Hàm lượng polyphenol tổng số xác định theo Quang Vinh Nguyen Jongbang Eun [6] Bước 1: Xây dựng đường chuẩn gallic Lấy 1mL dung dịch axit gallic chuẩn bị methanol với nồng độ: 0,02, 0,04, 0,06, 0,08 0,1mg/mL trộn với 5mL Folin - Ciocalteu reagent (được pha loãng 10 lần) 4mL sodium carbonate (75 g/L), lắc Độ hấp thu dung dịch xác định sau 30 phút bước sóng 765 nm máy UV-VIS (Janway 6305, Anh), xây dựng đường chuẩn phương trình tương quan nồng độ gallic độ hấp thu Bước 2: Xác định độ hấp thụ mẫu trích Lấy mL dung dịch chiết trộn với dung dịch thứ tự với axit gallic Sau đo bước sóng 765 nm Tổng hàm lượng polyphenol cao trích xác định qua giá trị tương đương với gallic axit (gallic axit equvalents GAE) dựa vào đường chuẩn axit gallic.Tổng hàm lượng polyphenol tính theo cơng thức: C = c* V/m Trong đó, C hàm lượng polyphenol tổng (mgGAE/g), c giá trị độ hấp thu tương ứng với đường chuẩn axit gallic (mg/mL), V thể tích mẫu (mL), m khối lượng dịch mẫu (g) 2.2.3 Phương pháp xác định hàm lượng flavonoid dịch chiết Tổng hàm lượng flavonoid xác định theo Vinh Nguyen Jongbang Eun [6] Bước 1: Xây dựng đường chuẩn quercetin 0,5 mL dung dịch quercetin cồn thực phẩm 96º nồng độ: 0,025, 0,05, 0,075, 0,1, 0,15 trộn với 2,5 mL nước cất 0,15 mL natri nitrat 5% lắc Sau phút, bổ sung 0,3 ml nhôm clorua 10% Sau phút bổ sung 1mL natri hydroxyd 1M 0,55 mL nước cất đo bước sóng 510 nm Xây dựng đường chuẩn phương trình tương quan nồng độ quercetin độ hấp thu Bước 2: Xác định độ hấp thu mẫu trích 0,5 mL dung dịch mẫu dịch chiết cho vào ống nghiệm chứa 2,5mL nước cất, bổ sung thành phần khác với thứ tự giống quercetin Đo độ hấp thụ bước sóng 510nm máy UV-VIS (Janway 6305, Anh) Tổng hàm lượng flavonoid cao trích xác định qua giá trị tương đương với quercetin dựa vào đường chuẩn quercetin thơng qua phương trình đường chuẩn quercetin xác định theo công thức: F = f* V/m Trong đó, F hàm lượng favonoid tổng (mg QE/g), f giá trị độ hấp thu tương ứng với đường chuẩn quercetin (mg/mL), V thể tích mẫu (mL), m khối lượng mẫu (g) 2.2.4 Phương pháp xác định khả kháng oxy hóa Xác định khả kháng oxi hóa thơng qua khả khử sắt khả dập tắt gốc tự DPPH theo phương pháp cải tiến Vinh Nguyen Jongbang Eun [6] Hút mL mẫu chiết vào ống nghiệm, sau bổ sung vào ống nghiệm 5mL dung dịch DPPH lắc Mẫu giữ bóng tối, nhiệt độ phòng 30 phút tiến hành đo độ hấp thu bước sóng 517 nm máy UV-VIS (Janway 6305, Anh) Tiến hành đồng thời mẫu control thay dịch chiết cồn thực phẩm 96º Hoạt tính kháng oxy hóa tính theo cơng thức: % Kháng oxy hóa = [(AB – AA)/AB] x 100 Trong đó, AB AA độ hấp phụ màu mẫu kiểm chứng (mẫu chứa dung môi) độ hấp phụ màu dung dịch phản ứng chứa dịch chiết sau 30 phút phản ứng Kết thể hoạt tính kháng oxy hóa chất phương pháp DPPH xác định thông qua IC50 (half maximal Inhibitory Concentration) IC50 nồng độ dịch chiết có khả dập tắt 50% gốc tự DPPH 2.2.5 Phương pháp xác định khả ức chế α – amylae [16] Hút 200μL dung dịch chuẩn bị từ dịch chiết ISSN 1859-1531 - TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG, VOL 19, NO 4.2, 2021 với nồng độ khác 500μL đệm phosphate (pH 6,9 với 0,006M sodium chloride),10μL dung dịch α – amylase solution (2U/mL) ủ nhiệt độ 370C 20 phút Bổ sung 200μL dung dịch tinh bột 1% đệm phosphate Tiếp tục ủ 370C 30 phút Phản ứng kết thúc cách bổ sung 1mL dinitrosalicylic axit Sau đó, dung dịch phản ứng ủ thêm phút nước sôi làm nguội đến nhiệt độ phòng Dung dịch phản ứng sau pha lỗng 10mL nước đo độ hấp thụ bước sóng 540nm máy UV-VIS (Janway 6305, Anh) 2.2.6 Phương pháp xác định khả ức chế α – glucosidase [16] Hút 50μL dung dịch chuẩn bị từ dịch chiết hòa tan đệm phosphate 0,1M (pH 6,8) với nồng độ khác có chứa 30μL dung dịch α – glucosidase 2U/mL ủ nhiệt độ 370C 10 phút Bổ sung 50μL dung dịch P – nitrophenyl-α-D-Glucopyranoside 2,5mM đệm phosphate 0,1M (pH 6,8) Tiếp tục ủ 370C 30 phút Sau ủ tiến hành đo độ hấp thụ bước sóng 405nm máy ELISA (BIO-RAD iMARK microplate reader) Kết so sánh với mẫu kiểm chứng chứa 50μL dung mơi để hịa tan cao chiết Khả ức chế hoạt tính α – glucosidase tính sau: % Ức chế = [(A0 – A1)/A0] x 100 Trong đó, A0 độ hấp thụ mẫu kiểm chứng (mẫu chứa dung môi pha cao chiết) thời điểm ban đầu, A1 độ hấp thụ mẫu thí nghiệm 2.3 Xử lý phân tích số liệu Các thí nghiệm lặp lại lần Các kết thể dạng kết trung bình lần lặp lại ± độ lệch tiêu chuẩn Sai khác có nghĩa mặt thống kê kết so sánh mức ý nghĩa p < 0,05 Kết thảo luận 3.1 Ảnh hưởng nhiệt độ sấy đến hàm lượng polyphenol flavonoid tổng số Nhóm chất polyphenol nhóm hợp chất có nhiều hoạt tính tốt sức khỏe người [2] Nhóm polyphenol biết đến nhiều flavonoid Các flavonoid có đặc tính chống viêm [14] chống oxy hóa [17] Hàm lượng polyphenol flavonoid tổng số vỏ chân danh qua các nhiệt độ sấy khác thể qua Bảng Bảng Ảnh hưởng nhiệt độ sấy đến hàm lượng polyphenol flavonoid tổng số dịch chiết từ vỏ chân danh Nhiệt độ sấy phơi Hàm lượng flavonoid tổng số (mg QE/g nguyên liệu khô) Hàm lượng polyphenol tổng số (mg GAE/g nguyên liệu khô) Vỏ Vỏ Lá Lá 50±2 ºC 332,07±0,50b 137,50±2,23c 114,22±0,46b 106,09 ±0,99c a a a 60±2ºC 381,89±6,17 153,80±1,40 141,38±6,70 117,50±0,88a c d c 70±2 ºC 294,56±1,60 114,01±2,24 101,40±0,27 88,11±1,53d 80±2ºC 214,07±0,57e 100,04±1,75e 91,75±0,52d 77,90±1,44e d b c Phơi 266,36±0,27 144,39±1,16 105,82±0,22 109,24±1,84b Ghi chú: a – e biểu thị khác giá trị trung bình thể khác có ý mẫu nhiệt độ sấy khác với độ tin cậy 95% (p ≤ 0,05) Hoang Van Chuyen [22] sấy đài hoa bụp dấm 3.2 Ảnh hưởng nhiệt độ sấy đến hoạt tính sinh học vỏ thân chân danh 3.2.1 Ảnh hưởng nhiệt độ sấy đến khả dập tắt gốc tự DPPH Hoạt tính kháng oxi hóa mẫu trích ly vỏ thân chân danh sấy nhiệt độ khác thể qua khả dập tắt gốc tự DPPH trình bày Hình Giá trị IC50 khả kháng OXH (mg/mL) Từ kết Bảng cho thấy, hàm lượng polyphenol vỏ thân vỏ chân danh cao so với mẫu Điều cho thấy, phận khác hàm lượng chất tích luỹ khác Kết tương tự công bố Gould & Lister [18] Đồng thời, Bảng cho thấy, hàm lượng TPC TFC vỏ chân danh phụ thuộc vào nhiệt độ sấy Trong đó, hàm lượng TPC dịch chiết chân danh cao nhiệt độ 60˚C (381,89 mg GAE/g vỏ 153,8 mg GAE/g lá) thấp nhiệt độ 80ºC (214,07 mg GAE/g vỏ 100,04 mg GAE/g lá) sấy 700C Kết tương tự hàm lượng flavonoid tổng số, cao nhiệt độ 60˚C (141,38±6,7 mg GAE/g vỏ 117,5±0,88 mg GAE/g lá) thấp nhiệt độ 80ºC Trong đó, phương pháp phơi ánh nắng mặt trời, hàm lượng polyphenol vỏ cao sấy 800C Theo Devic cs [3], nhiệt độ sấy tăng mức vừa phải, hàm lượng TPCvà TFC tổn thất giảm, nhiệt độ sấy cao hàm lượng TPC TFC giảm hợp chất polyphenol nguyên liệu bị phân hủy tác dụng phản ứng phân hủy nhiệt Kết tương tự nghiên cứu công bố trước Carme Garau cs cam (Citrus aurantiumv Canoneta) [7]; Quang Vinh Nguyen 1.4 1.2 0.8 0.6 0.4 0.2 e d b 50 ͦC c a 60 ͦC 70 ͦC 80 C ͦ Phơi Nhiệt độ sấy ( C ͦ ) Hình Giá trị IC50 khả kháng oxy hóa vỏ thân chân danh theo nhiệt độ sấy khác Ghi chú: a – e cột biểu thị khác có ý nghĩa thống kê mẫu vỏ chân danh với độ tin cậy 95% (p ≤ 0,05) theo phân hạng Ducan Hoàng Lê Hằng, Hoàng Văn Chuyển, Nguyễn Anh Dũng, Nguyễn Quang Vinh Giá trị IC50 khả kháng OXH (mg/mL) 3.5 2.5 1.5 0.5 a b 50 ͦC 60 ͦC e d c 70 ͦC 80 ͦC Phơi Nhiệt độ sấy ( ͦC ) Hình Giá trị IC50 khả kháng oxy hóa chân danh theo nhiệt độ sấy khác Ghi chú: a – e cột biểu thị khác có ý nghĩa thống kê mẫu chân danh với độ tin cậy 95% (p ≤ 0,05) theo phân hạng ducan.3.2.2 Ảnh hưởng nhiệt độ sấy đến khả ức chế α-amylase α-glucosidase Từ kết Hình cho thấy, khả dập tắt gốc tự DPPH dịch chiết vỏ chân danh không giống chịu ảnh hưởng nhiệt độ sấy Khi tăng nồng độ dịch chiết khả dập tắt gốc tự DPPH cao chiết vỏ thân tăng điều cho thấy dịch chiết vỏ chân danh có chứa chất có hoạt tính ức chế gốc tự DPPH Sự thay đổi khả dập tắt gốc tự Bảng Hình 1, cho thấy, nhiệt độ sấy tăng từ 50-600C khả dập tắt DPPH tăng, nhiên tiếp tục tăng từ từ 60 -800C khả dập tắt DPPH giảm Ngun nhân nhiệt độ sấy thấp trình sấy diễn lâu hơn, hợp chất chân danh bị oxy hóa nhiều hơn; mặt khác sấy nhiệt độ cao phân hủy hợp chất có khả dập tắt gốc tự mẫu chân danh nên giảm khả oxy hóa chúng Kết tương tự công bố Quang Vinh Nguyen and Hoang Van Chuyen (2020) [22] Trong số điều kiện làm khô mẫu chân danh nghiên cứu, mẫu vỏ thân sấy nhiệt độ 60ºC có hoạt tính cao với giá trị IC50 0,59±0,018 (mg/mL) vỏ 2,37±0,003 (mg/mL) Kết Bảng Hình 2, cho thấy, mẫu có hàm lượng TPC TFC cao thể giá trị IC50 khả kháng oxy hoá thấp Điều cho thấy có tương quan thuận hàm lượng TPC, TFC khả kháng oxy hoá Như vậy, hợp chất polyphenol nhóm chất có khả chống oxy hóa vỏ chân danh Điều phù hợp với phát Liu Shih-Chuan [10] báo cáo tương quan thuận tổng hàm lượng polyphenol hoạt động chống oxy hóa Bảng Ảnh hưởng nhiệt độ sấy đến khả ức chế α-amylase dịch chiết vỏ chân danh Nguyên liệu Vỏ Phần trăm ức chế α-amylase (%) Nồng độ (μg/mL) 50±2ºC 20,14±1,40a 12 35,90±1,80b 25 70±2ºC 80±2ºC Phơi 26,30±0,40a 10,30±0,40a 26,40±1,70a 60,60±0,60a 40,70±1,20b 16,30±1,20b 42,00±1,30b 46,40±1,00c 79,70±0,80b 56,90±1,00c 24,10±0,70c 58,30±0,60c 49 57,90±0,90d 95,20±0,60c 73,80±0,60d 39,50±0,80d 67,70±0,90d 78 17,90±1,20a 43,02±0,20a 11,80±0,60a 3,50±0,50a 23,30±1,20a 156 29,20±0,80b 60,80±0,20a 23,30±0,60b 10,30±0,03b 40,50±1,20b 313 45,70±1,40c 71,60±0,60b 40,80±0,80c 17,30±1,20c 57,00±1,00c 625 56,10±1,20d 83,70±0,60c 61,80±0,60d 23,70±0,60d 72,20±1,50d Lá 60±2ºC 45,00±0,60a Ghi chú: a – d giá trị trung bình biểu thị khác có ý nghĩa thống kê nồng độ dịch chiết theo hàng từ mẫu chân danh nghiên cứu với độ tin cậy 95% (p ≤ 0,05) theo phân hạng Ducan 800C với giá trị IC50 459±16,7µg/mL Giá trị IC50 khác ức chế α - amylase (µg/mL) Đối với bệnh nhân mắc bệnh đái tháo đường việc kìm hãm hoạt động α – amylase α-glucosidase pháp hữu hiệu để ngăn ngừa tăng đường huyết Khả ức chế α – amylasevà α-glucosidase mẫu dịch chiết vỏ chân danh nhiệt độ khác thể qua Bảng 2, Bảng 3, Hình 3, Hình Số liệu Bảng cho thấy, phần trăm ức chế α-amylase tăng lên tăng nồng độ dịch chiết Điều cho thấy, vỏ thân chân danh có chứa hợp chất ức chế α-amylase Khả ức chế αamylase không giống nhiệt độ sấy mẫu khác Khả ức chế α-amylase cao mẫu sấy 600C với giá trị IC50 vỏ thân 3,8±0,1µg/mL, tiếp đến sấy 700C phơi Tương tự mẫu với giá trị IC50 600C 43,6±2,4µg/mL, sấy 700C khả ức chế α-amylase thấp mẫu sấy d 80 60 40 c 20 b b a 50ºC 60ºC 70ºC 80ºC Phơi Nhiệt độ sấy ( ͦC ) Hình Giá trị IC50 khả ức chế α – amylase vỏ thân chân danh theo nhiệt độ sấy khác Ghi chú: a – d cột biểu thị khác có ý nghĩa thống kê mẫu vỏ chân danh với độ tin cậy 95% (p ≤ 0,05) theo phân hạng Ducan ISSN 1859-1531 - TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG, VOL 19, NO 4.2, 2021 Bảng Ảnh hưởng nhiệt độ sấy đến khả ức chế α-glucosidase dịch chiết vỏ chân danh Nguyên liệu Vỏ Phần trăm ức chế α-glucosidase(%) Nồng độ (μg/mL) 50±2ºC 60±2ºC 70±2ºC 80±2ºC Phơi 1,50 38,60±0,10a 52,30±1,10a 20,40±0,70a 6,80±1,70a 7,00±1,20a 3,00 53,20±0,10b 61,70±0,10b 62,40±0,80b 11,50±0,30b 27,00±2,10b 6,00 66,20±0,20c 66,90±0,10c 87,00±4,20c 47,20±0,20c 58,00±1,90c 12,00 80,20±4,40d 76,80±0,50d 97,70±0,10d 88,10±2,70d 96,00±0,10d 1,50 17,10±2,60a 42,80±1,80a 5,70±1,10a 10,00±0,40a 12,80±0,90a 3,00 44,80±0,40b 72,60±11,10b 10,70±0,30b 17,10±0,40b 21,50±0,40b 6,00 72,60±1,60c 93,20±2,30c 17,70±1,10c 27,50±0,10c 26,90±0,80c 12,00 96,30±0,80d 98,60±0,30c 25,20±2,20d 42,60±0,10d 49,50±0,40d Lá Giá trị IC50 khác ức chế α - amylase (µg/mL) Qua Bảng cho thấy, khả ức chế enzyme α-gucosidase tuỳ phụ thuộc vào nồng độ xử lý mẫu nhiệt độ làm khô mẫu Điều cho thấy, nhiệt độ sấy ảnh hưởng thay đổi hợp chất có khả ức chế α-glucosidase có mặt vỏ thân chân danh 600 d c 500 400 b c 300 200 100 60ºC 70ºC 80ºC Phơi Nhiệt độ sấy ( ͦC ) Giá trị IC50 khác ức chế α - glucosidase (µg/mL) Hình Giá trị IC50 khả ức chế α – amylase chân danh theo nhiệt độ sấy khác Ghi chú: a – d cột biểu thị khác có ý nghĩa thống kê mẫu chân danh với độ tin cậy 95% (p ≤ 0,05) theo phân hạng Ducan b d c b a 50ºC 60ºC 18 16 14 12 10 d e c b a 50ºC 60ºC 70ºC 80ºC Phơi Nhiệt độ sấy ( ͦC ) a 50ºC Giá trị IC50 khác ức chế α - glucosidase (µg/mL) Ghi chú: a – d giá trị trung bình biểu thị khác có ý nghĩa thống kê nồng độ dịch chiết theo hàng từ mẫu vỏ chân danh với độ tin cậy 95% (p ≤ 0,05) theo phân hạng Ducan 70ºC 80ºC Phơi Nhiệt độ sấy ( ͦC ) Hình Giá trị IC50 khả ức chế α – glucosidase vỏ chân danh theo nhiệt độ sấy khác Ghi chú: a – d cột biểu thị khác có ý nghĩa thống kê mẫu vỏ chân danh với độ tin cậy 95% (p ≤ 0,05) theo phân hạng Ducan Hình Giá trị IC50 khả ức chế α – glucosidase chân danh theo nhiệt độ sấy khác Ghi chú: a – e cột biểu thị khác có ý nghĩa thống kê mẫu vỏ chân danh với độ tin cậy 95% (p ≤ 0,05) theo phân hạng Ducan Kết Hình cho thấy, khả ức chế mẫu thay đổi theo thay đổi nhiệt độ sấy Khi nhiệt độ sấy tăng từ 50 đến 600C khả ức chế tăng, nhiên tiếp tục tăng nhiệt độ sấy từ 60 – 800C khả ức chế giảm Trong đó, khả ức chế α-glucosidase cao tìm thấy mẫu sấy nhiệt độ 600C với giá trị IC50 mẫu 1,46±0,06 µg/mL, 500C cao nhiệt độ 80ºC (7,28±0,1µg/mL) Đối với dịch chiết chân danh, IC50 thấp nhiệt độ 60ºC (2,08±0,3µg/mL), cao nhiệt độ 80ºC (15,83±0,5µg/mL) Từ kết Bảng Hình 3, 4, 5, cho thấy, hợp chất thuộc nhóm polyphenol vỏ thân chân danh thể hoạt tính ức chế α – glucosidase α-amylase hàm lượng hợp chất vỏ thân chịu ảnh hưởng nhiệt độ sấy ảnh hưởng đến hoạt tính ức chế enzyme dịch trích ly từ vỏ chân danh Kết luận kiến nghị Từ nghiên cứu cho thấy, phương thức sấy nhiệt độ sấy có ảnh hưởng đến hàm lượng polyphenol hàm lượng flavonoid tổng số từ ảnh hưởng đến hoạt tính sinh học khả kháng oxy hóa, khả ức Hồng Lê Hằng, Hồng Văn Chuyển, Nguyễn Anh Dũng, Nguyễn Quang Vinh chế α – amylase α – glucosidase dịch chiết vỏ thân chân danh Nghiên cứu xác định hàm lượng hoạt chất hoạt tính sinh học vỏ chân danh cao sấy nhiệt độ 60ºC, thấp sấy nhiệt độ 70ºC 80ºC Nghiên cứu nên tiếp tục tiến hành phương pháp sấy khác sấy lạnh, sấy bơm nhiệt, sấy chân không để giảm nhiệt độ thời gian sấy nhằm bảo vệ chất có hoạt tính có phận chân danh TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Vega-Gálvez, A., Di Scala, K., Rodríguez, K., Lemus-Mondaca, R., Miranda, M., López, J., & Perez-Won, M “Effect of air-drying temperature on physico-chemical properties, antioxidant capacity, colour and total phenolic content of red pepper (Capsicum annuum, L var Hungarian)” Food Chemistry, 117(4), 2009, 647–653 [2] Medina-Remón, A., Estruch R., Tresserra-Rimbau, A., VallverdúQueralt, A., RM, Lamuela-Raventos., “The Effect of Polyphenol Consumption on Blood Pressure” Mini-Reviews in Medicinal Chemistry 13(8), 2012, 1137-49 [3] Devic, E., Guyot, S., Daudin, J.-D., & Bonazzi, C “Effect of Temperature and Cultivar on Polyphenol Retention and Mass Transfer during Osmotic Dehydration of Apples” Journal of Agricultural and Food Chemistry, 58(1), 2010,606-614 [4] Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Trung cộng “Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam”, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Hà Nội, năm 2006 [5] López-Vida, E C., Pilatowsky Figueroa, I., Cortés, F B., Rojano, B A., & Navarro Ocaña, A., “Effect of temperature on antioxidant capacity during drying process of mortiño (Vaccinium meridionale Swartz)” International Journal of Food Properties, 20(2), 2016, 294–305 [6] Nguyen, Q.-V., Eun, JB “Antioxidant Activity of Solvent Extracts from Vietnamese Medicinal Plants” Journal of Medicinal Plans Research, 5(13),2011, 2798–2811 [7] Garau, M C., Simal, S., Roselló, C., & Femenia, A “Effect of airdrying temperature on physico-chemical properties of dietary fibre and antioxidant capacity of orange (Citrus aurantium v Canoneta) by-products” Food Chemistry, 104(3), 2007, 1014–1024 [8] Gordon, M H “The Mechanism of Antioxidant Action in Vitro” Food Antioxidants, 1990, 1–18 [9] Javed, A., Kamran, J.N., Showkat, R.M., Mohd, A., and Mohd, S “Review on role of natural alpha-glucosidase inhibitors for management of diabetes mellitus” International Journal of Biomedical Research, 2(6),2011,374‐380 [10] Liu, S., Lin, J., Wang, C., Chen, H., & Yang, D “Antioxidant properties of various solvent extracts from lychee (Litchi chinenesis Sonn.) flowers” Food Chemistry, 114(2), 2009, 577–581 [11] Nguyễn Ái Thạch Nguyễn Minh Thủy “Ảnh hưởng nhiệt độ thời gian sấy đến hợp chất có hoạt tính sinh học khả chống oxy hóa sản phẩm tỏi đen” – Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam, số 1, 2018, trang 59 [12] Nguyen, Q.-V., Nguyen, N.-H., Wang, S.-L., Nguyen, V B., & Nguyen, A D “Free radical scavenging and antidiabetic activities of Euonymus laxiflorus Champ Extract” Research on Chemical Intermediates, 43(10), 2016, 5615–5624 [13] Nguyen, VB, Wang, S.-L., Nguyen, A., Lin, Z.-H., Doan, C., Tran, T., … Kuo, Y.-H “Bioactivity-Guided Purification of Novel Herbal Antioxidant and Anti-NO Compounds from Euonymus laxiflorus Champ” Molecules, 24(1), 2018, 120 [14] Yahfoufi, N., Alsadi, N., Jambi, M., & Matar, C “The Immunomodulatory and Anti-Inflammatory Role of Polyphenols” Nutrients, 10(11), 2018, 10(11), 1618 [15] Nguyen, V., Wang, S.-L., Nguyen, T., Nguyen, M., Doan, C., Tran, T., … Nguyen, A “Novel Potent Hypoglycemic Compounds from Euonymus laxiflorus Champ and Their Effect on Reducing Plasma Glucose in an ICR Mouse Model” Molecules, 23(8), 2018, 1928 [16] Sihvonen M, Jarvenpaa E, Hietaniemi V, Huopalahti R, “Advances in Supercritical carbon dioxide technology” Food science and Technology, 10(6,7), 1999, 217-222 [17] Sánchez-Moreno, C., A Larrauri, J., & Saura-Calixto, F “Free radical scavenging capacity and inhibition of lipid oxidation of wines, grape juices and related polyphenolic constituents” Food Research International, 32(6), 1999, 407–412 [18] Gould, K., & Lister, C “Flavonoid Functions in Plants” Flavonoids, 2005, 397–441 [19] Kamiloglu, S.; Capanoglu, E Polyphenol Content in Figs (Ficus Carica L.): “Effect of Sun-Drying” International Journal of Food Properties 3(18), 2015, 521–535 [20] Piga, A.; DelCaro, A.; Corda, G From Plums to Prunes: “Influence of Drying Parameters on Polyphenols and Antioxidant Activity” Journal of Agricultural and Food Chemistry, 51(12), 2003, 3675– 3681 [21] López-Vida, EC, Rojano, BA, Figueroa, IP, Zapata, K., & Cortés, FB, “Evaluation of the Sorption Equilibrium and Effect of Drying Temperature on the Antioxidant Capacity of the Jaboticaba (Myrciaria Cauliflora)” Chemical Engineering Communications, 2015,1563-5201 [22] Nguyen, QV & Chuyen, HV, “Processing of Herbal Tea from Roselle (Hibiscus sabdari a L.): Effects of Drying Temperature and Brewing Conditions on Total Soluble Solid, Phenolic Content, Antioxidant Capacity and Sensory Quality” Beverages, 6(1),2020, ... nhiệt độ sấy khác với độ tin cậy 95% (p ≤ 0,05) Hoang Van Chuyen [22] sấy đài hoa bụp dấm 3.2 Ảnh hưởng nhiệt độ sấy đến hoạt tính sinh học vỏ thân chân danh 3.2.1 Ảnh hưởng nhiệt độ sấy đến khả... định phương thức sấy thích hợp để giữ chất có hoạt tính sinh học cao vỏ thân chân danh thu hái vườn quốc gia Yok Đôn, tỉnh Đắk Lắk Vật liệu phương pháp nghiên cứu 2.1 Vật liệu nghiên cứu - Hóa chất: ... α-amylase hàm lượng hợp chất vỏ thân chịu ảnh hưởng nhiệt độ sấy ảnh hưởng đến hoạt tính ức chế enzyme dịch trích ly từ vỏ chân danh Kết luận kiến nghị Từ nghiên cứu cho thấy, phương thức sấy nhiệt