Nước ta lại có nhiều vùng khí hậu không giống nhau và vì vậy có thể trồng nấm quanh năm với hàng chục loại nấm ăn và nấm dược liệu khác nhau Xuất phát từ những vấn đề thực tế như trên, t
Trang 1TRƯỜNG CAO ĐẲNG ĐỨC TRÍ KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC – MÔI TRƯỜNG
TRƯỜNG CAO ĐẲNG ĐỨC TRÍ KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC – MÔI TRƯỜNG
KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP
ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU QUÁ TRÌNH PHÂN LẬP VÀ
Giảng viên hướng dẫn: Hà Cẩm Thu Sinh viên thực hiện: Nguyễn Văn Phưởng Ngành: Công nghệ sinh học & thực phẩm Khoá: 2005 - 2008
Trang 2MỞ ĐẦU
Sống khoẻ - không bệnh tật đó là niềm ao ước của con người ở bất cứ thời đại nào Tuy nhiên, như chúng ta đã biết, sức khoẻ của con người tuỳ thuộc vào các yếu tố như di truyền, môi trường sống, dinh dưỡng và phòng trị bệnh, trong đó có việc dinh dưỡng để phòng ngừa các bệnh tật đóng vai trò quan trọng trong việc bảo vệ sức khoẻ Hiện nay có rất nhiều nguyên nhân làm cho thực phẩm chúng ta nghèo nàn về chất như đất đai bạc màu hoặc do thực phẩm phải qua nhiều khâu chế biến công nghiệp làm mất đi nhiều chất Mặt khác, do vật nuôi, cây trồng đang được chạy theo năng suất nên phát triển mất tự nhiên, mất cân đối Trong thực phẩm chứa nhiều độc
Trang 3tố, đó là những chất độc trong rau, quả do bón phân hoá học, thuốc trừ sâu, thuốc kích thích tăng trưởng, những chất đi vào vật nuôi như thuốc tăng trọng, thuốc tiêm phòng bệnh dịch, rồi những chất hoá học được sử dụng trong công nghệ thực phẩm Bên cạnh những yếu tố về ăn uống thì môi trường xung quanh cũng ảnh hưởng đến sức khoẻ.
Ngoài những nguyên nhân này, sức khoẻ của chúng ta cũng ảnh hưởng bởi stress
Vậy làm cách nào để tăng cường sức đề kháng, giúp cơ thể phòng bệnh một cách hiệu quả và tốt
nhất?
Trang 4Nấm ăn là một loại thực phẩm có giá trị dinh dưỡng cao Hàm lượng protein chỉ sau thịt, cá, rất giàu chất khoáng và các acid amin không thay thế, các vitamin A, B, C, D, E…không có các độc tố Có thể coi nấm ăn như một loại “rau sạch” và “thịt sạch” Ngoài giá trị dinh dưỡng, nấm ăn còn chứa nhiều đặc tính biệt dược, có khả năng phòng và chữa bệnh như: làm hạ huyết áp, chống bệnh béo phì, chữa bệnh đường ruột, tẩy máu xấu, có khả năng phòng chống bệnh ung thư Mặt khác, nước ta
là một nước công nghiệp với nguồn phụ phế phẩm giàu chất xơ và chất gỗ hết sức phong phú
Trang 5Tỷ lệ nông dân chiếm phần lớn dân số, lại có nhiều thời gian nông nhàn và rất muốn có thêm nghề phụ
để nâng cao thu nhập Nước ta lại có nhiều vùng khí hậu không giống nhau và vì vậy có thể trồng nấm quanh năm với hàng chục loại nấm ăn và nấm dược liệu khác nhau
Xuất phát từ những vấn đề thực tế như trên, tôi chọn
đề tài: “Nghiên cứu quá trình phân lập và nhân
giống nấm Sò” để tạo ra nhiều giống có năng suất
và phẩm chất tốt đáp ứng nhu cầu tiêu dùng ngày càng cao của xã hội
Trang 6Phần 1 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG
PHÁP NGHIÊN CỨU
1.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU
- Nấm Sò Hoàng Bạch (Pleurotus cornucopiae) và Phượng Vĩ (Pleurotus sajor-caju)
- Giống cấp I của trung tâm công nghệ sinh học thực vật - Viện Di Truyền học Nông nghiệp Việt Nam
Trang 71.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
1.2.1 Phương pháp phân lập và tuyển chọn giống Một số công thức chế tạo một số loại môi trường dùng để phân lập và giữ giống nấm Sò
- Môi trường thạch - đường – khoai tây (PDA)
- Môi trường thạch – khoai tây - muối khoáng
- Môi trường thạch – glucose – pepton (DPA)
- Môi trường giá đậu xanh
Trang 81.2.2 Khảo nghiệm sự ảnh hưởng của nguồn
dinh dưỡng đến quá trình nhân giống cấp II, III
Trang 91.2.5 Trồng thử nghiệm giống nấm cấp III từ
giống nấm cấp II và theo dõi quá trình sinh
trưởng và phát triển của nấm.
Trang 10Phần 2 KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN
2.1 PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN
Giống nấm Sò đều sinh trưởng và phát triển tốt,
có khả năng phân giải cao ở nhiệt độ 22-24oC Sau 3 – 5 ngày hệ sợi bung mọc rất mạnh tạo thành khuẩn lạc hình tròn với hệ sợi tia đều và dày đặc, hơi kết lại và tạo ra các điểm nút trắng nhỏ Quanh điểm cấy giống hệ sợi khí sinh phát triển mạnh và sau đó
rủ xuống phủ dày đặc Do điều kiện về vật chất, kỹ thuật và thời gian còn hạn hẹp nên quá trình phân và tuyển chọn giống chưa thành công vì tỷ lệ nhiễm vi sinh cao
Trang 112.2 ẢNH HƯỞNG CỦA MÔI TRƯỜNG CƠ CHẤT ĐẾN QUÁ TRÌNH NHÂN GIỐNG NẤM SÒ
2.2.1 Môi trường cơ chất là thóc
Giống nấm Sò cấp II được ươm nuôi trong phòng ươm giống cấp II có hệ thống điều hoà nhiệt độ chỉ dao động từ 22-26oC, độ ẩm dao động từ 80-89%
Hệ sợi nấm phát triển đều, lan sâu vào cơ chất và mọc kín đầy túi vào ngày 17 kể từ ngày cấy giống, bảo đảm độ tuổi của nấm Sò theo tiêu chuẩn của Trung tâm công nghệ sinh học thực vật - Viện Di Truyền Nông nghiệp Việt Nam Kết quả được trình bày ở bảng 3.1 và hình 3.1a, 3.1b
Trang 12Bảng 3.1 Sự phát triển của hệ sợi nấm
Thời gian Nhiệt độ ( 0 C) Độ ẩm (%) Ánh sáng Độ dài của hệ sợi nấm (cm)
1 ngày 23 84
Không cần thiết
Giống mới cấy
2 ngày 23 83 Giống mới cấy
Trang 13Hình 3.1a Giống cấp II mới cấy
Trang 14Hình 3.1b Giống nấm cấp II sau 18 ngày
Trang 15 Giống nấm Sò cấp III được ươm nuôi trong phòng ươm giống cấp III (giống cho sản xuất nuôi trồng), nhiệt độ phòng ươm dao động từ 22-26oC, độ ẩm dao động từ 80-90% Khi nhiệt độ cao >31oC dùng
hệ thống làm mát phòng ươm để hạ nhiệt độ xuống
ở mức thích hợp Hệ sợi nấm phát triển đều mọc kín đầy túi vào ngày 21 kể từ ngày cấy giống, Như vậy giống nấm Sò đã đảm bảo độ tuổi theo quy định (17-25 ngày tuổi) của Trung tâm công nghệ sinh học thực vật - Viện Di Truyền Nông nghiệp Việt Nam Kết quả được trình bày ở bảng 3.2 và hình 3.2a, 3.2b
Trang 16Bảng 3.2 Quá trình phát triển của hệ sợi nấm
Thời gian Nhiệt độ ( 0 C) Độ ẩm (%) Ánh sáng Độ dài của hệ sợi nấm (cm)
1 ngày 22 84
Ánh sáng không
cần thiết
Giống mới cấy
2 ngày 23 83 Hệ sợi nấm bắt đầu ra
Trang 17Hình 3.2a Giống cấp III mới cấy
Trang 18Hình 3.2b Giống cấp III sau 20 ngày
Trang 192.2.2 Môi trường cơ chất là mùn cưa cao su
Giống nấm Sò cấp II, cấp III được ươm nuôi trong phòng ươm với nhiệt độ phòng ươm dao động
từ 22-26oC, độ ẩm dao động từ 80-90% Hệ sợi nấm sinh trưởng và phát triển tốt, lan tỏa rộng và ăn trắng bịch vào ngày 20 kể từ ngày cấy giống Hệ sợi nấm phát triển đồng nhất có màu trắng sữa đặc trưng cho nấm Sò và tỷ lệ nhiễm mốc thấp Kết quả được trình bày ở bảng 3.3 và hình 3.3a, 3.3b
Trang 20Bảng 3.3 Sự phát triển của hệ sợi nấm trong cơ chất mùn cưa
Thời gian Nhiệt độ ( 0 C) Độ ẩm (%) Ánh sáng Độ dài của hệ sợi nấm (cm)
1 ngày 23 84 Không cần thiết Giống mới cấy
2 ngày 23 84 Giống bắt đầu ra
Trang 21Hình 3.3a Giống cấp III sau 4 ngày
Trang 22Hình 3.3b Giống cấp III sau 15 ngày
Trang 23Vậy qua sự khảo nghiệm trên tôi nhận thấy rằng giống nấm cấp III trong môi trường cơ chất là thóc thì tốc độ sinh trưởng và phát triển của hệ sợi nấm nhanh đến ngày 20 kể từ ngày cấy giống hệ sợi nấm
ăn kín bịch Còn giống nấm cấp III trong môi trường
cơ chất là mùn cưa cao su thì tốc độ sinh trưởng và phát triển cũng tương đối nhanh và thời gian hệ sợi nấm ăn kín bịch kéo dài đến ngày thứ 21 kể từ ngày cấy giống Mức độ sinh trưởng và phát triển của hệ sợi nấm trong 2 loại cơ chất thóc và mùn cưa cao su được thể hiện ở đồ thị sau:
Trang 24Hình 3.4 Ảnh hưởng của nguồn cơ chất đến sự sinh trưởng và phát
triển của hệ sợi nấm Sò
0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 12.0 14.0
Trang 252.3 SỰ SINH TRƯỞNG VÀ PHÁT TRIỂN CỦA HỆ SỢI NẤM TRONG QUÁ TRÌNH TRỒNG THỬ NGHIỆM
2.3.1 Trong giai đoạn ươm sợi
Trong 21 ngày của giai đoạn ươm sợi nhiệt độ phòng ươm dao động 21-28,5oC, độ ẩm dao động từ 85-94% Hệ sợi nấm phát triển tốt và ăn trắng kín bịch vào ngày thứ 22 Kết quả được trình bày ở bảng 3.4
Trang 26Bảng 3.4 Sự phát triển của hệ sợi nấm trong giai đoạn ươm sợi
cơ chất.
Từ ngày 15 đến ngày
19 hệ sợi nấm bắt đầu lan tỏa khắp cơ chất
Sau thời gian
20 ngày hệ sợi nấm mọc trắng
cả bịch, đến ngày thứ 22 hệ sợi nấm đã ăn kín phần đáy bịch Bịch phôi chắc và căng,
bịch phôi ra nhà nuôi trồng.
trình ươm sợi, bịch nào bị
mốc thì được chuyển ra khỏi nhà ươm và đem đi tiêu huỷ để trành hiện tượng lây nhiễm
Trang 272.3.2 Trong giai đoạn chăm sóc thu hái
Số lượng bịch phôi nấm Sò đem nuôi trồng
200 bịch, được nuôi trồng ở nhiệt độ 28,5-29,2oC,
độ ẩm trung bình từ 83-84% Quả thể nấm mọc thành chùm ra 4 đợt, mỗi đợt cách nhau 5-7 ngày,
1 đợt thu hái kéo dài 3-5 ngày Sản lượng thu hái đạt được 211,5kg Sản lượng trung bình thu hái trên 1 bịch là 1,0575kg Kết quả được trình bày ở bảng 3.5
Trang 28Bảng 3.5 Sự phát triển của sợi nấm trong giai đoạn chăm sóc thu hái
Thời gian Nhiệt độ
( 0 C) Độ ẩm tb (%) Sự phát triển của quả thể nấm Sản lượng thu hái (kg) Ghi chú
13/04 đến19/04 28,5 83 Quả thể nấm ra ở
các vết rạch thành chùm, lúc còn non
có dạng dùi trống, lúc sắp trưởng thành
có dạng vỏ sò
Trọng lượng trung bình của một chùm nấm từ 50-350g
Hệ sợi nấm tăng trưởng Khi nấm Sò bắt đầu ra ở
các vết rạch ta tiến hành tưới nước đón quả thể Trong giai đoạn
hệ sợi tăng trưởng ta tiến hành tưới nước lên vách nền tạo
ẩm
19/04 đến 22/04 28,7 83 Nấm ra đợt I:
83,9kg 22/04 đến 28/04 29 84 Hệ sợi nấm tăng
trưởng
28/04 đến 02/05 29 83 Nấm ra đợt II:
65,3kg 02/05 đến 08/05 28,5 84 Hệ sợi nấm tăng
trưởng
08/05 đến 11/05 28,3 84 Nấm ra đợt III:
39,2kg 11/05 đến 16/05 29,2 83 Hệ sợi nấm tăng
trưởng
16/05 đến 19/05 29 83 Nấm ra đợt IV:
23,1kg
Trang 29Phần 3 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
3.1 KẾT LUẬN
3.1.1 Phân lập và tuyển chọn giống nấm
Trong điều kiện nhiệt độ 22-24oC, hệ sợi nấm bung ra và phát triển tốt, sau 3 – 5 ngày hệ sợi bung mọc rất mạnh tạo thành khuẩn lạc hình tròn với hệ sợi tia đều và dày đặc Do điều kiện và thời gian hạn hẹp nên qúa trình tuyển chọn ra giống nấm Sò cấp I chưa thành công
Trang 303.1.2 Về nghiên cứu nhân giống nấm cấp II, cấp III từ giống nấm cấp I
- Giống nấm đảm bảo độ tuổi của giống Giống nấm
Sò đạt 19 – 20 ngày tuổi, tiêu chuẩn của Trung tâm công nghệ sinh học thực vật - Viện Di Truyền Nông Nghiệp Việt Nam là 17 – 25 ngày
- Hệ sợi nấm phát triển tốt, độ thuần chuẩn cao, có
màu trắng đồng nhất, hệ sợi phát triển đặc trưng của chủng giống, ít có hiện tượng nhiễm tạp khuẩn và mốc
- Giống nấm có chỉ tiêu về năng xuất khá cao khi đưa vào nuôi trồng Tỷ lệ nấm Sò khi đưa vào sản xuất đạt 40 – 60%
Trang 313.1.3 Về nghiên cứu sản xuất thử nghiệm nấm Sò thương phẩm
- Chủng nấm Sò được đem nuôi trồng trong điều kiện môi trường và nhiệt độ dao động từ 20,2-30,5oC và độ ẩm dao động từ 82 – 94% Sợi nấm phát triển và sinh trưởng tốt, ít bị nhiễm mốc và Sau thời gian 20 ngày hệ sợi nấm mọc trắng cả bịch, đến ngày thứ 22 hệ sợi nấm đã ăn kín phần đáy bịch Bịch phôi chắc và căng, chuyển các bịch phôi ra nhà nuôi trồng Quả thể phát triển mạnh, lúc còn non có dạng dùi trống, lúc trưởng thành có dạng vỏ sò, trọng lượng mỗi chùm đạt 50 – 350 g/chùm
Trang 32có phẩm chất tốt phục vụ cho sản xuất.
- Đào tạo thêm cán bộ kỹ thuật giống, nuôi trồng các loại nấm để ổn định về giống
Trang 33- Cần tiếp tục nghiên cứu kỹ thuật trồng các loại nấm Sò trên một số nguyên liệu khác nhau như bã mía, vỏ cà phê, bã thải điều, bụi xơ dừa, hạt bobo, bột thân sắn, bột lỏi ngô, vỏ đậu xạnh, thân que gỗ… để tạo sự đa dạng về chủng loại nấm trồng phù hợp với nguồn bã thải nông nghiệp của từng địa phương.
- Tổ chức chế biến một số loại nấm vừa giải quyết việc tiêu thụ nấm tươi của các hộ sản xuất, vừa tạo thêm mặt hàng sản phẩm nấm đáp ứng nhu cầu ngày càng cao của thị trường
Trang 34EM XIN CHÂN THÀNH CẢM ƠN!