Phân loại vi tảo biển Chaetoceros VĐ 01 phân lập tại vùng biển Vân Đồn, Quảng Ninh

Số 8— 2012 Di truyền học ứng dụng — Chuyên san Công nghệ sinh học PHẦN LOẠI VI TẢO BIỂN CH4ETOCEROS VĐ01 PHÂN LẬP TAI VUNG BIẾN VÂN ĐÒN, QUẢNG NINH Nguyễn Thị Hoai Ha’, Pham Thi Bich Dao’, Tran Dang Khoa”, Trần Thị Điệp” Vién Vi sinh vat va Cong nghé Sinh hoc, DHOGHN Truong Dai hoc Cong nghé, DHOGHN Trường Đại học Y té Công Cộng Ngày nhận 5-6-2012/ Ngày sửa 14-6-2012/ Ngày đồng ý đăng 25-6-2012 MỞ ĐẦU Trong lập micropipette đĩa thạch đưới kính loại vi tảo biển, Cjaefoceros thuộc ngành tảo silic với đặc điểm bật giá trị dinh dưỡng, loài ứng dụng rộng rãi làm thức ăn cho ấu trùng nhuyễn thể hai mảnh, đối tượng “/c ăn tươi sống bắt buộc” không thê thiếu thủy sản Chaefoceros thuộc ngành tảo lông roi lệch, thuộc dạng đơn bào dạng hạt, sống đơn độc hay tap doan dang palmella, d6i có dang soi, dang chuoi, dang ziczac, dang dai, | dang sao, dang ống, dạng Kích thước thay déi vai um đến 1mm Tế bào có nhân lưỡng bội, có cấu trúc màng độc đáo gọi vỏ giáp Vỏ gồm hai lớp, lớp pectin lớp dioxyt silic (SiO;7H;O) Chaetoceros có mặt vỏ hình elip, lõm giữa, phồng hiển Zeiss Axio Vision độ phóng đại 400 lần Quan sát: Đặc điểm hình thái kích thước tế bào vi tảo biển quan sát miêu tả kính hiển vi có lắp camera (Axio CarlZeiss Image A2) KET QUA VA THAO LUAN Thuần khiết mơ tả hình thái: Từ mẫu nước thu thập Vân Đồn, Quảng Ninh phân lập tuyển chọn khiết chủng vi tảo biển có ký hiệu VĐ01 Đó vi tảo biển đơn bào, sinh trưởng tốt môi trường f/2 Vi tao màu vàng nâu, có gai, hình chữ nhật kích thước chiều dài tế bào 10 — 16.9um, chiều réng 5.2 — 6.7m (hinh 1) Quan sat dic diém hình thái đưới kính hiển vi đồng dựa vào lồi Mỗi mặt vỏ có hai lơng gai hai cực, tế bào có lơng gai Hai lơng gai khóa phân loại Chủng vi tảo biển VĐ01 sơ bào kế cận làm thành tập đồn hình chuỗi dinh dưỡng thường dùng làm thức ăn tươi “cửa số” Các lông gai nối với phần gốc Hai lông gai tự tế bào đầu chuỗi Phân tích giải trình tự 18S rADN vi tảo bién Chaetoceros VĐU01 tế bào ngoắc với hai lông gai tế - Khoảng không tế bào gọi thường khác với lông gai chuỗi Chỉ có nhiều lồi phân bố rộng khắp, thường phát triển mạnh vào mùa thu PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Mẫu vùng biển Vân Đồn, Quảng Ninh tọa độ N 21°04°12)°, E 107°25°12?? vào tháng 10 năm 2011 Sử dụng vợt phù du (cỡ 20 um) Phân lập vi tảo: Mẫu nuôi cấy làm giàu 20ml mơi trường dich thé £/2 có bơ sung silica 5% bình tam giác 50 ml, điều kiện nhiệt độ phòng, chiếu sáng 12/12 (sáng/tõi) Sau 7-10 ngày quan sát phân l Đây chi vi tảo khơng độc, có giá trị sống ni trồng thủy sản [8] Để có nhiều thơng tin xác định vị trí phân loại phát sinh chủng loại vi tảo biển C?jaefoceros VĐ01, ADN genome dùng làm khuôn để khuyếch đại vật: Mẫu nước thu thập từ đèn neon với chu kỳ chiếu sáng phân loại thuộc C?aefoceros phản ứng PCR, sử dụng cặp Diatoms F (S’-3’) GCTTCGGCGGTGTAATGGTGA Diatoms R (5°-3’) GGCAGAAACTTGAATGGTCCA [4,6] Xác định trình tự rADN 18S so sánh với trình tự có sẵn Ribosomal Data Project Tìm kiếm trình tự tương đồng trực tuyến rằng, số lồi cơng bố, trình tự rADN VD01 18S (đoạn 1187bp) cia Chaetoceros giống trình tự Chaetoceros calcitrans có ký hiệu AY485449 (99%) he Genet ies and Applications — Special Issue: Biotechnology Institute of Microbiology and Biotechnology, Vietna m National University, Hanoi Sa areas ỐÔÔÔởÔỐ 56 _