Di truyền học và ứng dụng — Chuyên san Công nghệ sinh học Số 8— 2012 PHẦN LOẠI VI TẢO BIỂN CH4ETOCEROS VĐ01 PHÂN LẬP TAI VUNG
BIẾN VÂN ĐÒN, QUẢNG NINH
Nguyễn Thị Hoai Ha’, Pham Thi Bich Dao’, Tran Dang Khoa”, Trần Thị Điệp”
1 Vién Vi sinh vat va Cong nghé Sinh hoc, DHOGHN
2 Truong Dai hoc Cong nghé, DHOGHN
3 Trường Đại học Y té Công Cộng Ngày nhận bài 5-6-2012/ Ngày sửa bài 14-6-2012/ Ngày đồng ý đăng bài 25-6-2012
MỞ ĐẦU
Trong các loại vi tảo biển, Cjaefoceros
thuộc ngành tảo silic với những đặc điểm nổi bật về giá trị dinh dưỡng, là một loài được ứng
dụng rộng rãi làm thức ăn cho ấu trùng nhuyễn
thể hai mảnh, một đối tượng “/c ăn tươi
sống bắt buộc” không thê thiếu trong thủy sản Chaefoceros thuộc ngành tảo lông roi lệch, thuộc dạng đơn bào dạng hạt, sống đơn độc hay thanh tap doan dang palmella, d6i khi có dang soi, dang chuoi, dang ziczac, dang dai, | dang sao, dang ống, dạng cây Kích thước thay
déi vai um đến 1mm Tế bào có nhân lưỡng bội, có cấu trúc màng độc đáo gọi là vỏ giáp Vỏ gồm hai lớp, lớp trong là pectin và lớp
ngoài dioxyt silic (SiO;7H;O) Chaetoceros có mặt vỏ hình elip, lõm ở giữa, ít khi phồng
hoặc lồi Mỗi mặt vỏ có hai lông gai ở hai cực, cho nên mỗi tế bào có 4 lông gai Hai lông gai
của tế bào này ngoắc với hai lông gai của tế
bào kế cận làm thành tập đoàn hình chuỗi
- Khoảng không giữa các tế bào được gọi là
“cửa số” Các lông gai chỉ nối với nhau ở phần gốc Hai lông gai tự do của tế bào đầu chuỗi
thường khác với các lông gai trong chuỗi Chỉ
này có nhiều loài phân bố rộng khắp, thường phát triển mạnh vào mùa thu
PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Mẫu vật: Mẫu nước được thu thập từ
vùng biển Vân Đồn, Quảng Ninh tọa độ N 21°04°12)°, E 107°25°12?? vào tháng 10 năm 2011 Sử dụng vợt phù du (cỡ 20 um)
Phân lập vi tảo: Mẫu được nuôi cấy và
làm giàu trong 20ml môi trường dich thé £/2
có bô sung silica 5% trong bình tam giác 50 ml, điều kiện nhiệt độ phòng, chiếu sáng bằng
đèn neon với chu kỳ chiếu sáng 12/12 giờ
(sáng/tõi) Sau 7-10 ngày được quan sát phân
lập bằng micropipette và đĩa thạch đưới kính
hiển Zeiss Axio Vision ở độ phóng đại 400 lần Quan sát: Đặc điểm hình thái và kích thước của tế bào vi tảo biển được quan sát và miêu tả dưới kính hiển vi có lắp camera (Axio CarlZeiss Image A2)
KET QUA VA THAO LUAN
Thuần khiết và mô tả hình thái: Từ các mẫu nước thu thập được ở Vân Đồn, Quảng
Ninh đã phân lập và tuyển chọn thuần khiết _
chủng vi tảo biển có ký hiệu VĐ01 Đó là vi tảo biển đơn bào, sinh trưởng tốt trên môi trường
f/2 Vi tao màu vàng nâu, có gai, hình chữ nhật
kích thước chiều dài tế bào 10 — 16.9um, chiều
réng 5.2 — 6.7m (hinh 1) Quan sat dic diém
hình thái đưới kính hiển vi đồng dựa vào các
khóa phân loại Chủng vi tảo biển VĐ01 sơ bộ
phân loại thuộc chỉ C?aefoceros
Đây là chi vi tảo không độc, có giá trị
dinh dưỡng thường dùng làm thức ăn tươi
sống trong nuôi trồng thủy sản [8]
Phân tích giải trình tự 18S rADN vi tảo bién Chaetoceros VĐU01
Để có được nhiều hơn nữa thông tin xác
định về vị trí phân loại và phát sinh chủng loại của vi tảo biển C?jaefoceros VĐ01, ADN
genome được dùng làm khuôn để khuyếch đại
bằng phản ứng PCR, sử dụng cặp mỗi Diatoms
F (S’-3’) GCTTCGGCGGTGTAATGGTGA
Diatoms R (5°-3’)
GGCAGAAACTTGAATGGTCCA [4,6] Xác định trình tự rADN 18S của nó và so sánh với
trình tự có sẵn trong Ribosomal Data Project
Tìm kiếm trình tự tương đồng trực tuyến chỉ ra
rằng, trong số các loài đã công bố, trình tự
rADN 18S (đoạn 1187bp) cia Chaetoceros VD01 giống trình tự của Chaetoceros calcitrans có ký hiệu AY485449 (99%)
l he Genet ies and Applications — Special Issue: Biotechnology 56
Institute of Microbiology and Biotechnology, Vietnam National University, Hanoi