Di truyền học và ứng dụng — Chuyên san Công nghệ sinh học
PHAN LAP VA TUYEN CHON VI KHUAN SINH ENZYME THUY PHAN
PHUC HOP CELLULOSE DUNG TRONG CHE BIEN THUC AN THO XANH VA PHU PHAM NONG NGHIEP CHO GIA SUC NHAI LAI
Đào Thị Lương, Hà Thị Hang, Tran Thi Lệ Quyên, Dương Văn Hợi Viện Vi sinh vật và CNSH-Đại học Quốc Gia Hà Né Trần Quốc Việt, Bùi Thị Thu Huyài Viện Chăn nué
Ngày nhận bài 7-11-2011/ Ngày sửa bài 25-11-2011/ Ngày đồng ý đăng bài 10-12-2011
I DAT VAN DE
Việc sử dụng các enzyme phân giải xơ (pectinase, cellulase, xylanase) trong chế biến thức ăn thô cũng như bổ sung vào khẩu phan ăn cho gia súc nhai lại đang thu hút sự quan tâm của các nhà nghiên cứu ở nhiều nước trên thế giới trong những năm gần đây Nhiều nghiên cứu đã chứng tỏ rằng việc bổ sung enzyme ngoại sinh vào thức ăn cho vật nuôi, làm tăng tốc độ phân giải thức ăn in-vitro và in vivo Một số ý kiến cho rằng các enzyme làm tăng số lượng các vi khuẩn phân giải xơ và do đó có thể làm tăng tốc độ phân giải và hấp thụ thức ăn trong dạ cỏ của gia súc nhai lại
Enzyme có thể được sản xuất từ động vật, thực vật và vi sinh vật Enzyme tir vi sinh vật
càng ngày càng được quan tâm nhiều hơn, bởi khả năng tạo ra cho mình một tập hợp những
enzyme xúc tác các phản ứng sinh học xảy ra trong và ngoài tế bào Đây chính là tính ưu việt của vi sinh vật mà các cơ thể động vật hay thực vật khác không có được Trong số các vi sinh vật sinh enzyme, các loài thuộc chi
Bacillus cé kha năng tiết ra rất nhiều loại
enzyme vào môi trường nuôi cấy Mỗi loài
thuộc chỉ 8acius đều có khả năng sinh ra ít
nhất một loại enzyme ngoại bảo Trong các loai enzyme do Bacillus sinh ra, enzyme có
nhều ứng dụng 1a protease, amylase,
cellulase, xylanase, pectinase, oxidase
Enzyme được san xuat tir Bacillus subtilis
được sử dụng nhiều nhất trong nhiều ngành
công nghiệp: sản xuất enzyme, sản xuất thức
ăn chăn nuôi gia súc gia cầm, thủy sản Trong phần nội dung nghiên cứu của đề tài: "Nghiên cứu sử dụng vi sinh vật trong chế
biến, bảo quản để nâng cao tỷ lệ tiêu hóa, hiệu
quả sử dụng thức ăn thô xanh, phụ phế phần
công nông nghiệp cho gia súc nhai lại” chúng tôi thực hiện nhiệm vụ: "Phân lậy
tuyển chọn vi khudn sinh enzyme thủy phải
phic hop cellulose ding trong chế biế
thức ăn thô xanh và phụ phẩm nông nghiệi cho gia súc nhai lại"
II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1 Thu thập mẫu
Thu thập được 30 mẫu, gồm các mẫu đất tị
Vườn Quộc gia Cúc Phương (Ninh Bình) v: các mẫu cỏ voi ủ chua ở Mộc Châu (Sơn La)
Đông Anh (Hà Nội), Thanh Hóa, Nghệ An Ninh Bình
2.2 Phương pháp phân lập
Vi khuẩn được phân lập từ các mẫu thu thật
bằng phương pháp pha loãng giới hạn sử dụn;
môi trường Hutchinson-Clayton (g/1: K;HPO¿
1; NaNOs-2,5; CMC-5; peptone-2; CaC]l;-0,l
MgSO.7H;O-0,3; NaCl-0,1; FeCl;-0,01; thach
18; pH 7) Sau 2 ngay nudi 6 30°C, tach va tinl
sạch các khuẩn lạc có hình thái khác nhau
2.3 Tuyến chọn vi khuẩn sinh đa enzyme
- Tuyển chọn lan 1: St dung phương phát 'cấy trực tiếp Cấy chấm vi khuẩn trên mô trường canh thang (g/1: Cao thịt-3; peptone-10 NaCl-1; thach-18; pH 7) có bổ sung 0,1% cx
chất (CMC, xylan và pectin) Ủ ở nhiệt đ(
30°C trong 48 giờ Sau đó nhuộm màu ban;
thuốc thử đỏ Congo đối với cơ chất CMC vi
xylan; thuốc thử đỏ ruthenium cho pectin Những chủng có vòng phân giải cơ chat >1,( cm sẽ được tuyển chọn tiếp lần 2
J Genetics and Applications — Special Issue: Biotechnology