0

Sàng lọc khả năng ức chế enzyme xanthine oxidase của một số thực vật và tối ưu quy trình chiết đối với thực vật có hoạt tính tốt nhất

148 1 0
  • Sàng lọc khả năng ức chế enzyme xanthine oxidase của một số thực vật và tối ưu quy trình chiết đối với thực vật có hoạt tính tốt nhất

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Tài liệu liên quan

Thông tin tài liệu

Ngày đăng: 12/05/2022, 10:54

IăH CăQU CăGIAăTP.ăHCM TR NGă IăH CăBỄCHăKHOA NGUY NăPH Mă CăCHệNH SÀNGăL CăKH ăN NGă CăCH ăENZYMEăXANTHINEă OXIDASE C AăM TăS ăTH CăV TăVÀăT Iă UăQUYă TRỊNHăCHI Tă IăV IăTH CăV TăCịăHO TăTệNHă T TăNH T ChuyênăngƠnh:ăK ăthu tăHóaăh că Mưăs :8520301 LU NăV NăTH CăS TP.ăH ăCHệăMINH,ăthángă01ăn mă2022 TR IăH CăQU CăGIAăTP.HCM NGă IăH CăBỄCHăKHOA C NGăHọAăXẩăH IăCH ăNGH AăVI TăNAM căl pă- T ădoă- H nhăphúc NHI MăV ăLU NăV NăTH CăS H ătênăh căviên:ăNGUY NăPH Mă CăCHệNHăăă MSHV: 1970448 NgƠy,ătháng,ăn măsinh:ă12/12/1997ăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăN iăsinh:ăKhánhăHịa ChunăngƠnh:ăK ăThu tăHóaăH c Mưăs : 8520301 I TểNă ăTÀIă: SĨNGăL CăKH ăN NGă CăCH ăENZYMEăXANTHINE OXIDASEăC AăM TăS ăTH CăV TăVĨăT Iă UăQUYăTRỊNHăCHI TăC Aă TH CăV TăCịăHO TăTệNHăT TăNH T Tênăti ngăanh : Xanthine oxidase inhibitory activity of some Vietnamese plants and optimization of extraction conditions of total flavonoid contents and anti-gout activity NHI MăV ăVÀăN IăDUNGă:ă - S ăb ăhóaăc uătrúcăhóaăh căc aă11ălo iăth căv tăbaoăg m:ăláăsen,ăđ iăbi,ăactiso,ădi pă h ăchơu,ălá i,ămưngăc uăta,ăng iăc u,ăng ătr o,ăláăl t,ălá d aăvƠăc iăb ăxanh - Xácăđ nhăhƠmăl ngăpolyphenolăvƠăflavonoidăc aă11ălo iăth căv t - Xácăđ nhăth căv tăcóăkh ăn ngă căch ăenzymeăxanthineăoxidaseăt tănh t - T iă uăhóaăđi uăki năchi tăc aăth căv tăcóăkh ăn ngă căch ăenzymeăxanthineăoxidaseă t tănh t - Xácăđ nhăcácăho tătínhăkhángăoxyăhóa,ăkhángăviêmăvƠăphơnătíchăph ăFT-IRăc aăcácă m uăcaoăsauăkhiăt iă u II NGÀYăGIAOăNHI MăV :ă06/09/2021 III NGÀYăHOÀNăTHÀNHăNHI MăV :ă12/12/2021 IV CỄNăB ăH NGăD N:ăTS.ăHƠăC măAnh Tp HCM, ngày 25 tháng 12 n m 2021 CỄNăB ăH NGăD N CH ăNHI MăB ăMỌNă ÀOăT O TS.ăHƠăC măAnhăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăăă TR PGS.ăTS.ăLêăTh ăH ngăNhan NGăKHOAăK ăTHU TăHịAăH Căă GS.ăTS.ăPhanăThanhăS năNam i L IăC Mă N ăcóăth ăhoƠnăthƠnhălu năv năt tănghi p,ătôiăxinăg iăl iăc mă năsơuăs căđ nătoƠnă th ăcácăth yăcơătrongătr ngă iăh căBáchăKhoa- HQGăTP.HCMăđưăt nătìnhăd yăd ă tơiătrongăsu tăth iăgianătheoăh căt iătr ng.ă căbi t,ătôiăxinăg iăl iăc mă năchơnăthƠnhă đ n: TS.ăHƠăC măAnhăậ ng iăđưăh ngăd nătôiăr tăt nătìnhăv ăn iădungănghiênăc u,ăh ă tr ăthaoătácăthíănghi măvƠăđ ngăviênătinhăth nătơiăr tănhi uătrongăsu tăqătrìnhăth că hi nălu năv nănƠy TS.ăLêăXuơnăTi năđưăchoătơiănhi uăỦăki năhayătrong q trình lƠmăvi căt iăphịngă thíănghi m B năLêăMinhăT năđưăh ătr ăvƠăgópăỦătrongăsu tăqătrìnhăth căhi nălu năv n, EmăHu nhăMaiăNh ăvƠăNguy năD ngăH uăChíăđưăđ ngăhƠnhăcùngătơiătrongăqă trìnhăth căhi nălu năv nănƠy Cácăth yăcơăkhoaăK ăthu tăHóaăh cănóiăchungăvƠăb ămơnăK ăthu tăH uăc ănóiă riêngăđưătruy năđ tăki năth căchuyênăngƠnh.ă ơyălƠăn năt ngăv ngăch căđ ătôiăhoƠnă thƠnhălu năv năc ngălƠăhƠnhătrangăki năth căchoăngh ănghi păc aătơiăsauănƠy Cácăb năcùngălƠmăthíănghi mălu năv năv iătơiăt iăphịngă401B2ăđưăchiaăs ănh ngă kinhănghi măvƠăh ătr ătơiăr tănhi uătrongăsu tăqătrìnhăth căhi nălu năv n Chaăm ăvƠăm iăng cóăthêmăngh ăl căv iătrongăgiaăđìnhălnălƠăch ăd aătinhăth năv ngăch c,ăgiúpătơiă tăquaăkhóăkh nătrongăsu tăquưngăth iăgianăh căt păxaănhƠ M cădùătôiăđưăc ăg ngăr tănhi uăđ ăhoƠnăthi nălu năv nănh ngăkhôngăth ătránhăkh iă nh ngăthi uăsót.ăR tămongănh năđ cănh ngăỦăki năđóngăgópăquỦăgiáăc aăth yăcơăvƠă cácăb n.ăTơiăxinăchơnăthƠnhăc mă n.ă Xinăkínhăchúcăt tăc ăcácăth yăcơăvƠăcácăb nănh ngăl iăchúcăt tăđ pănh t! Ng iăth căhi nălu năv n Nguy năPh mă căChính ii TịMăT TăLU NăV N Trongănghiênăc uănƠyăđưăti năhƠnhăsƠngăl căho tătínhă căch ăxanthineăoxidaseă c aă11 đ iăt ngăth căv tăbaoăg măsen,ăđ iăbi,ăactiso,ădi păh ăchơu,ă i,ămưngăc uăta,ă ng iăc u,ăng ătr o,ăláăl t,ăd aăvƠăc iăb ăxanh.ăăK tălu năđ cóăho tătínhăt tănh tătrongăs ăcácăđ iăt căr ngăláă iălƠăđ iăt ngă ngănghiênăc uăv iăgiáătr ăTPC,ăTFCăcaoănh tă IC50 c aăho tătínhă căch ăxanthineăoxidaseăl năl ngăláă iăđ căch nălƠăm cătiêuă nghiênăc uăti păđ ăt iă uăđi uăki năchi tăv i m cătiêuălƠ hàm l ngăpolyphenolăt ngă 190.61 mgQUE/g cao khơ 76.90ăµg/mL.ă iăt t 150.32 mgGAE/g cao khơ, c ngănh ho tătínhă căch ăenzymeăxanthineăoxidase.ăTh căhiênăt iă uăhóaăđi uăki nă chi tăb ngăph ngăphápăđápă ngăb ăm tăRSMăv iăs ăh ătr ăc aăph năm măDesignă Expertăchoăk tăqu ăd ăđoánăc aăđi uăki năt iă uăTFCăt iăn ngăđ EtOHă48%,ănhi tă đ ăchi tă40oC,ăt ăl ăr năậ l ngă1:7.2ăg/mL,ăth iăgianăchi tă65 phútăvƠăđi uăki năt iă uă ho tătínhă căch ăenzymeăXOăt iăn ngăđ ăEtOHălƠă46%,ănhi tăđ ăchi tă43ă oC,ăt ăl r n/l ngă1:08ă(g/mL)ăvƠăth iăgianăchi tă64ăphút.ăHaiăm uăcaoăt iă uăTFCăvƠăXOI có hƠmăl ngăl năl tălƠă336.7ămgQUE/găcaoăkhơ, 332.86ămgQUE/găcaoăkhơăvƠăgiáătr ă IC50 c aăho tătínhă căch ăXOăl năl tălƠă12.48 µg/mL, 11.27ăµg/mLăt ngă ngăv iă giáătr ăIC50 c a allopurinol 1.57 µg/mL NgoƠiăra,ăcácăm uăcaoăt iă uăcịnăđ căth că hi năphơnătíchăph ăFT-IRăth ăhi năs ăhi nădiênăc a nhóm flavonoid trongăcácăm uă caoăchi t Kh ăn ngăkhángăoxyăhóaătheoăph TFC XOI cóăgiáătr ăIC50 l năl tălƠă12.48ă±ă0.14ă g/mLăvƠă11.27 ± 0.85ă g/mL.ă ngăth iăkh ăn ngăkhángăviêmătheoăph m uăcaoăt iă uăTFCăvƠăXOIăc ngăđ ngăphápăDPPHăc aăcácăm uăcaoăt iă uă ngăphápă căch ăenzymeăhyaluronidaseăc aă c ghiănh năv iăcácăgiáătr ăl năl tălƠă5.34 ± 0.3 g/mLăvƠă6.31ă±ă0.44ă g/mL.ă iii ABSTRACT This study was aimed to screening xanthine oxidase inhibitory activity of eleven plants including Nelumbo nucifera Gaertn., Blumea balsamifera (L.) DC., Cynara cardunculus L., Phyllanthus urinaria L., Psidium guajava L., Annona squamosa L., Artemisia vulgaris L., Vitex negundo L., Piper lolot C.DC., Pandanus amaryllifolius Roxb and Brassica juncea L The leaf extract of Psidium guajava L., which has the highest TPC and TFC; and show the best xanthine oxidase inhibitory activity The TFC, TPC, and IC50 values were 150.32 mgGAE/g, 190.61 mgQUE/g and 76.90 µg/mL, respectively The leaf extract of Psidium guajava L was optimized ethanol extraction of flavonoid compounds (TFCO) as well as xanthine oxidase inhibitory activity (XOIO) by response surface methodology (RSM) Four parameters, including ethanol concentration, the solid-to-liquid ratio, extraction temperature, and extraction time were discussed The best extraction conditions observed for total flavonoidăcontentăwereăată48%ăEtOHăandătemperatureăofă40°Căforă65 minăwithăsolidto-liquidă ratioă ofă 1: 7.2 g/mLă thată foră xanthineă oxidaseă inhibitoryă activity at 46% EtOHăwithăaătemperatureăofă43°Căforă63 minăwithăsolid-to-liquidăratioăofă1: 08 g/mL.ă The research showed that the TFC values of TFCO and XOIO were 336.7 mgQUE/g d.w and 332.86 mgQUE/g d.w Also, the TFCO showed strong inhibitory activity on xanthine oxidase with IC50 value of 12.48 µg/mL, which was similar to XOIO sample with IC50 value of 11.27 µg/mL The FT-IR research showed that both optimal extraction condition observer the flavonoid appearance Additionally, both of these optimal extracts showed almost equivalent antioxidant when the IC50 were 12.48ă g/mL,ăandă11.27ă g/mL,ărespectively; and both of them were also better than the anti-inflammatory activity of positive control with IC50 value of 5.34ă g/mLăandă 6.31 µg/mL, respectively iv L IăCAMă OAN TơiăxinăcamăđoanăđơyălƠăcơngătrìnhănghiênăc uăkhoaăh căc aăriêngătôiăvƠăch aăt ngă đ căs ăd ngăđ ăb oăv ăm tăh căv ănƠo.ăM iăs ăgiúpăđ ăchoăvi căth căhi nănghiênă c uănƠyăđưăđ căc mă năvƠăcácăs ăli uăs ăd ngăphơnătíchătrongălu năánăcóăngu năg c vƠătríchăđ nărõărƠngătheoăđúngăquyăđ nh TP.ăH ăChíăMinh,ăngƠyă12ăthángă12ăn mă2021 Tácăgi Nguy năPh mă căChính v M CăL C NHI MăV ăLU NăV NăTH CăS i L IăC Mă N ii TịMăT TăLU NăV N iii ABSTRACT iv L IăCAMă OAN .v M CăL C vi DANHăM CăHỊNH ix DANHăM CăB NG xi DANHăM CăPH ăL C xii DANHăM CăT ăVI TăT T xiii L IăM ă U .1 T NGăQUAN .3 1.1 D ch t h c b nh gout 1.2 T ng quan v b nh gout 1.2.1 L ch s s ăl căvƠăđ nhăngh a 1.2.2.ăGiaiăđo n lâm sàng c a b nh gout 1.2.3 Bi n ch ng c a b nh gout 1.2.4 M i liên h gi a b nh gout d ng oxy ho tăđ ng 1.2.5.ăNguyênănhơnăvƠăc ăch gây b nh gout .9 1.2.6.ăCácăph ngăphápăđi u tr gout 13 1.3 Các h p ch t t nhiên có kh n ngă c ch enzyme xanthine oxidase 15 1.4 Cácăđ iăt ng th c v t nghiên c u 18 1.4.1 Láă i (Psidium guajava L.) .19 1.4.2 Sen (Nelumbo nucifera Gaertn.) .20 1.4.3.ă i bi (Blumea balsamifera (L.) DC.) 20 1.4.4 Actiso (Cynara cardunculus L.) .21 vi 1.4.5 D a (Pandanus amaryllifolius Roxb.) 22 1.4.6.ăC iăb ăxanhă(Brassica juncea L.) 22 1.4.7.ăNg ătr o (Vitex negundo L.) 23 1.4.8 Mãng c u ta (Annona squamosa L.) .24 1.4.9 Di p h châu (Phyllanthus urinaria L.) 24 1.4.10 Ng i c u (Artemisia vulgaris L.) 25 1.4.11 Lá l t (Piper lolot C DC.) 26 NH NGăNGHIểNăC UăTH CăNGHI MăHO CăLụăTHUY T 27 2.1 M c tiêu nghiên c u: .27 2.2 N i dung nghiên c u: .27 2.3 Hóa ch t thi t b : .28 2.4.ăPh ngăphápănghiênăc u 28 2.4.1.ăXácăđ nhăđ tro toàn ph n .28 2.4.2.ăXácăđ nhăđ m .29 2.4.3.ăPh ngăphápăchi t 29 2.4.4.ăPh ngăphápăkh oăsátăs ăb thành ph n hóa h c th c v t .30 2.4.5.ă nhăl ng polyphenol t ng 31 2.4.6.ă nhăl ng flavonoids b ng ph n ng t o ph c v i AlCl3 33 2.4.7 Kh o sát ho t tính c ch enzyme xanthine oxidase 35 2.4.8.ă ánhăgiáăkh n ngăkhángăoxyăhóaăb ng DPPH 37 2.4.9 Kh o sát ho tătínhăkhángăviêmătheoăc ăch Hyaluronic acid (HA) 38 2.4.10 Ph ngăphápăt iă uăhóaăb ng b m tăđápă ng (RSM) 42 K TăQU ăVĨăBĨNăLU N .45 3.1 Chu n b vƠăđánhăgiáănguyênăli u 45 3.2 Hi u su t thu cao t ng 46 3.3 S ăb hóa th c v t 48 vii 3.4 nhăl ng polyphenol flavonoid .50 3.5 ánhăgiáăho t tính c ch enzyme XO c aăcácăđ iăt 3.6 Xácăđ nhăđi u ki n t iă uăb ngăph ng .52 ngăphápăluơnăphiênăt ng bi n 54 3.6.1 nhăh ng c a th i gian chi tăđ n kh n ngă c ch XO TFC 54 3.6.2 nhăh ng c a n ngăđ EtOHăđ n kh n ngă c ch XO TFC 55 3.6.3 nhăh ng c a nhi tăđ chi tăđ n kh n ngă c ch XO TFC 57 3.6.4 nhăh ng c a t l r n-l ngăđ n kh n ngă c ch XO TFC 58 3.7 T iă uăđi u ki n chi t b ngăph ngăphápăđápă ng b m t (RSM) 59 3.7.1 Mã hóa vùng kh o sát k ho ch thí nghi m .59 3.7.2 K t qu thí nghi m quy ho ch th c nghi m .59 3.7.3 Phân tích s t ngătácăgi a mơ hình th c nghi m .63 3.7.4 Xácăđ nh m căđ t iă uăthôngăquaăđápă ng b m t 66 3.7.5 Xácăđ nhăđi m t iă u .68 3.7.6 ánhăgiáăhƠmăl ng flavonoid t ng ho t tính c ch XO 69 3.7.7 Phân tích FT-IR m u cao t iă u 70 3.7.8 ánhăgiáăho t tính kháng oxy hóa c a m u cao t iă u .72 3.7.9 ánhăgiáăho t tính kháng viêm c a m u cao t iă u 73 K TăLU NăVĨăKI NăNGH 74 4.1 K t lu n 74 4.2 Ki n ngh 75 DANHăM CăCỄCăCỌNGăTRỊNHăKHOAăH C 76 TĨIăLI UăTHAMăKH O 77 PH ăL C 86 LụăL CHăTRệCHăNGANG .133 viii 0.488 70 0.25 16 0.457 50 0.427 50 0.246 17 0.384 30 0.481 100 0.275 18 0.434 70 0.462 100 0.275 19 0.423 70 0.485 70 0.245 20 0.402 50 21 50 30 0.281 0.419 0.392 0.591 58.80 0.592 58.40 0.597 56.40 0.580 50.60 0.584 49.00 0.581 50.22 0.538 54.79 0.532 57.23 0.533 56.82 0.532 39.71 0.529 40.94 0.529 40.94 0.596 58.18 0.597 57.82 0.598 57.45 0.571 50.00 0.572 49.64 0.577 47.82 0.590 53.27 0.592 52.55 0.588 54.00 0.576 44.36 0.575 44.73 0.577 44.00 0.588 57.81 0.589 57.40 0.591 56.59 0.525 49.66 0.529 48.03 0.528 48.44 0.552 52.73 0.553 52.37 0.551 53.08 0.539 47.75 57.87 1.29 49.94 0.84 56.28 1.31 40.53 0.71 57.82 0.37 49.15 1.17 53.27 0.73 44.36 0.37 57.27 0.62 48.71 0.85 52.73 0.36 48.34 0.54 119 0.437 50 0.28 22 0.381 30 0.391 70 0.444 23 0.354 50 0.468 70 0.25 24 0.446 50 0.472 40 0.222 25 0.428 30 0.472 40 0.223 26 0.428 30 27 40 0.222 0.473 0.537 48.46 0.536 48.82 0.568 53.21 0.567 53.57 0.569 52.86 0.534 45.18 0.536 44.46 0.546 40.89 0.593 54.54 0.592 54.76 0.594 54.31 0.591 46.55 0.589 47.00 0.587 47.45 0.580 55.20 0.579 55.60 0.573 58.00 0.574 48.80 0.576 48.00 0.577 47.60 0.569 56.31 0.569 56.31 0.577 52.84 0.542 48.65 0.543 48.20 0.541 49.10 0.569 56.31 0.569 56.31 0.577 52.84 0.542 48.65 0.543 48.20 0.541 49.10 0.566 57.66 0.567 57.21 53.21 0.36 43.51 2.30 54.54 0.23 47.00 0.45 56.27 1.51 48.13 0.61 55.15 2.00 48.65 0.45 55.15 2.00 48.65 0.45 57.36 0.26 120 0.422 30 0.477 40 0.221 28 0.428 30 0.476 40 0.224 29 0.43 30 0.477 40 0.225 30 0.425 30 0.473 40 0.222 31 0.428 30 0.472 40 0.222 32 30 0.428 0.567 57.21 0.543 48.20 0.545 47.30 0.544 47.75 0.569 56.31 0.569 56.31 0.577 52.84 0.542 48.65 0.543 48.20 0.541 49.10 0.563 59.01 0.562 59.46 0.571 55.41 0.542 48.65 0.545 47.30 0.546 46.85 0.571 55.41 0.563 59.01 0.572 54.95 0.543 48.20 0.538 50.45 0.548 49 95 0.565 58.11 0.578 52.25 0.567 57.21 0.544 47.75 0.547 46.40 0.539 50.00 0.567 57.21 0.569 56.31 0.567 57.21 0.544 47.75 0.534 52.25 0.544 47.75 47.75 0.45 55.15 2.00 48.65 0.45 57.96 2.22 47.60 0.94 56.46 2.22 49.33 1.59 55.86 3.16 48.05 1.82 56.91 0.52 49.25 2.60 121 0.477 40 0.222 33 0.435 30 0.473 40 0.232 34 0.434 30 0.472 40 0.222 35 0.428 30 0.472 40 0.222 36 30 0.428 0.569 56.31 0.564 58.56 0.572 54.95 0.542 48.65 0.541 49.10 0.539 50.00 0.569 56.31 0.562 58.11 0.567 52.70 0.542 46.85 0.545 48.20 0.561 48.65 0.569 56.31 0.565 58.11 0.577 52.70 0.546 46.85 0.543 48.20 0.542 48.65 0.569 56.31 0.566 57.66 0.567 57.21 0.548 45.95 0.542 45.65 0.548 45.95 56.61 1.82 49.25 0.69 55.71 2.76 47.90 0.94 55.71 2.76 47.90 0.94 57.06 0.69 45.85 0.17 122 Ph l c 17 B ng phân tích ph Source Model ng sai ANOVA (YTFC) Sum of df Mean Fp-value Squares Square value 70341.49 14 5024.39 80.76 < 0.0001 significant A-N ngăđ c n 2800.44 2800.44 45.01 < 0.0001 B-Nhi tă 3790.36 3790.36 60.93 < 0.0001 C-T l r nl ng D-Th i gian 2035.96 2035.96 32.73 < 0.0001 1545.45 1545.45 24.84 < 0.0001 AB 251.78 251.78 4.05 0.0573 AC 314.09 314.09 5.05 0.0355 AD 38.60 38.60 0.6204
- Xem thêm -

Xem thêm: Sàng lọc khả năng ức chế enzyme xanthine oxidase của một số thực vật và tối ưu quy trình chiết đối với thực vật có hoạt tính tốt nhất ,