(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)

(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh và gây độc tế bào của vi nấm nội sinh trên cây thông đỏ (Taxus chinensis)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Bùi Thị Liên LUẬN VĂN THẠC SĨ NGÀNH: SINH HỌC NGHIÊN CỨU HOẠT TÍNH KHÁNG SINH VÀ GÂY ĐỘC TẾ BÀO CỦA VI NẤM NỘI SINH TRÊN CÂY THÔNG ĐỎ (Taxus chinensis) Hà Nội – 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Bùi Thị Liên NGHIÊN CỨU HOẠT TÍNH KHÁNG SINH VÀ GÂY ĐỘC TẾ BÀO CỦA VI NẤM NỘI SINH TRÊN CÂY THÔNG ĐỎ (Taxus chinensis) Chuyên ngành: Mã số: Sinh học thực nghiệm 842 01 14 LUẬN VĂN THẠC SĨ NGÀNH: SINH HỌC CÁN BỘ HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS Phí Quyết Tiến Hà Nội – 2021 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài: “Nghiên cứu hoạt tính kháng sinh gây độc tế bào vi nấm nội sinh thông đỏ (Taxus chinensis)” trực tiếp thực hướng dẫn PGS TS Phí Quyết Tiến Số liệu kết nghiên cứu luận văn hoàn tồn xác, trung thực Mọi thơng tin nội dung tham khảo báo cáo trích dẫn rõ ràng tên tác giả, tên cơng trình, thời gian, địa điểm nguồn gốc Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm lời cam đoan này! Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Học viên Bùi Thị Liên ii LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn sâu sắc, trước tiên em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới PGS TS Phí Quyết Tiến – Phó Viện Trưởng Viện Công nghệ sinh học; Giám đốc Trung tâm Giống Bảo tồn nguồn gen vi sinh vật, Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm khoa học Công nghệ Việt Nam, người thầy trực tiếp hướng dẫn, lên ý tưởng, định hướng nghiên cứu, tận tình bảo truyền đạt kinh nghiệm quý báu cho em suốt thời gian thực đề tài nghiên cứu Em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành đến TS Vũ Thị Hạnh Nguyên, TS Quách Ngọc Tùng cán Trung tâm Giống Bảo tồn nguồn gen vi sinh vật tận tình hướng dẫn, bảo em thực thí nghiệm phạm vi luận án đồng thời truyền đạt nhiều kinh nghiệm thực tiễn quý giá hoạt động nghiên cứu khoa học lĩnh vực vi sinh vật học Em xin gửi lời cảm ơn tới Ban giám đốc, thầy, cô giáo thuộc Khoa Cơng nghệ sinh học Phịng Đào tạo, Quản lý Khoa học Hợp tác quốc tế Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam tạo điều kiện, hướng dẫn, truyền đạt cho em nhiều kiến thức trình học tập Học viện Cuối cùng, xin cảm ơn gia đình, bạn bè người thân động viên, hậu phương vững giúp em có động lực học tập Luận văn thực nhờ hỗ trợ kinh phí Đề tài: “Nghiên cứu khai thác nấm nội sinh dược liệu địa nhằm thu nhận số hợp chất (paclitaxel số hợp chất khác) có hoạt tính sinh học" cấp Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, mã số TĐCNSH.05/2022 iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tên đầy đủ A-549 Ung thư phổi người (human lung carcinoma) bapt baccatin III:3-amino-3 phenylpropanoyltransferase BLAST Basic Local Alignment Search Tool bp Base pair CMV Virus cytomegalo dbat taxane 10b-hydroxylase DMSO Dimethyl sulfoxide DNA Deoxyribonucleic Acid FDA Cục Quản lý Thực phẩm Dược Phẩm Mỹ HGT Horizontal gene transfer – Chuyển gen ngang IC50 Nồng độ ức chế 50% ITS Internal transcribed spacer kDa kiloDalton MCF7 Ung thư vú người (human breast carcinoma) MIC Minimun inhibitory concentrations – Nồng độ ức chế tối thiểu NCBI National Center for Biotechnology Information OD Optical Density – Mật độ quang PCR Polymerase chain reaction SRB Sulforhodamine B TCA Trichloracetic acid TLTK Tài liệu tham khảo ts taxadiene synthase VSV Vi sinh vật iv DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Hoạt tính kháng khuẩn kháng nấm chủng vi nấm nội sinh thực vật Bảng 2.1 Một số thiết bị, dụng cụ sử dụng nghiên cứu 20 Bảng 2.2 Trình tự cặp mồi sử dụng phản ứng PCR khuếch đại gen dbat, bapt ts 24 Bảng 2.3 Chu trình nhiệt sử dụng phản ứng PCR khuếch đại gen dbat, bapt ts 24 Bảng 3.1 Khả gây độc tế bào ung thư chủng vi nấm nội sinh thông đỏ Bắc 30 Bảng 3.2 Ma trận độ tương đồng trình tự ITS chủng TQF6 với chủng tham chiếu 41 Bảng 3.3 Ma trận độ tương đồng trình tự ITS chủng TQF25 với chủng tham chiếu 42 Bảng 3.4 Ma trận độ tương đồng trình tự ITS chủng TDF6 với chủng tham chiếu 43 Bảng 3.5 Ma trận độ tương đồng trình tự ITS chủng TDF7 với chủng tham chiếu 44 v DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Mối quan hệ vi vật nội sinh chủ Hình 1.2 Một số chất kháng ung thư từ vi nấm nội sinh Hình 1.3 Cấu trúc số hợp chất kháng virus từ vi nấm nội sinh 10 Hình 1.4 Cây thơng đỏ bắc (Taxus chinensis) 12 Hình 1.5 Con đường sinh tổng hợp paclitaxel 16 Hình 3.1 Hoạt tính kháng Bacillus cereus ATCC 11778 (A) MRSE ATCC 35984 (B) số chủng vi nấm nội sinh 27 Hình 3.2 Tỉ lệ ức chế chủng vi nấm nội sinh VSV kiểm định 28 Hình 3.3 Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định chủng vi nấm nội sinh thông đỏ Ghi chú: E coli ATCC 11105; C albicans ATCC 10231; B cereus ATCC 11778; MRSE ATCC 35984; P aeruginosa ATCC 9027; MRSA ATCC 33591; E faecalis ATCC 29212 29 Hình 3.4 Hoạt tính loại bỏ gốc tự DPPH chủng vi nấm nội sinh tuyển chọn 32 Hình 3.5 Điên di DNA tổng số chủng vi nấm tuyển chọn gel agarose 1,0% Giếng M: thang DNA chuẩn kb (Thermo scientific, Mỹ) 34 Hình 3.6 Điện di đồ sản phẩm PCR khuếch đại gen tham gia sinh tổng hợp paclitaxel chủng tuyển chọn gel agarose 1,0% Giếng M: thang DNA chuẩn 100 bp (Thermo scientific, Mỹ); ĐC: đối chứng âm 35 Hình 3.7 Khuẩn lạc mơi trường Czapek-Dox sau ngày bào tử kính hiển vi quang học với độ phóng đại 400 lần chủng TQF6 (a, b, c) TQF25 (d, e, f) 38 Hình 3.8 Khuẩn lạc môi trường Czapek-Dox sau ngày bào tử kính hiển vi quang học với độ phóng đại 400 lần chủng TDF6 (a, b, c) TDF7 (d, e, f) 38 vi Hình 3.9 Điện di đồ sản phẩm PCR khuếch đại gen ITS gel agarose 1,0% Giếng M: thang DNA chuẩn (Thermo scientific, Mỹ); ĐC: đối chứng âm 39 Hình 3.10 Cây phát sinh chủng loại chủng TQF6, TQF25, TDF6 TDF7 với giá trị Boostrap 1000, sử dụng thuật tốn Kimuar với nhóm ngồi Murco bainieri (NR 103628) 45 vii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT .iii DANH MỤC BẢNG iv DANH MỤC HÌNH v MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 VI NẤM NỘI SINH TRÊN CÂY DƯỢC LIỆU 1.1.1 Giới thiệu vi nấm nội sinh 1.1.2 Sinh tổng hợp chất có hoạt tính sinh học từ vi nấm nội sinh 1.1.2.1 Hoạt chất kháng khuẩn kháng nấm 1.1.2.2 Hoạt chất gây độc tế bào ung thư 1.1.2.3 Hoạt chất kháng virus 1.2.1 Cây thông đỏ (Taxus spp.) 11 1.2.3 Các chất kháng sinh gây độc tế bào ung thư từ vi nấm nội sinh thông đỏ 15 1.2.4 Ứng dụng thị phân tử sàng lọc vi nấm nội sinh sinh paclitaxel dẫn xuất paclitaxel 16 1.3 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TẠI VIỆT NAM VỀ VI NẤM NỘI SINH 17 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 ĐỐI TƯỢNG 19 2.1.1 Chủng giống 19 2.1.2 Hóa chất, thiết bị 19 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.2.1 Xác định hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 20 2.2.2 Tách chiết hoạt chất sinh học thô từ vi nấm nội sinh 21 viii 2.2.3 Xác định hoạt tính gây độc tế bào ung thư 21 2.2.4 Khảo sát khả loại bỏ gốc tự DPPH chủng tuyển chọn 23 2.2.5 Khảo sát khả sinh tổng hợp paclitaxel thông qua sàng gen thị 23 2.2.6 Xác định đặc điểm hình thái bào tử chủng vi nấm nội sinh tuyển chọn 24 2.2.7 Phân loại chủng vi nấm nội sinh tuyển chọn giải phân tích trình tự vùng ITS 25 2.2.8 Xử lý thống kê số liệu 26 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 27 3.1 SÀNG LỌC HOẠT TÍNH KHÁNG SINH CỦA CÁC CHỦNG VI NẤM NỘI SINH TRÊN CÂY THÔNG ĐỎ 27 3.2 SÀNG LỌC HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ CỦA CÁC CHỦNG VI NẤM NỘI SINH 29 3.3 NGHIÊN CỨU HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HĨA TỪ DỊCH CHIẾT THÔ CỦA CÁC CHỦNG VI NẤM 31 3.4 SỬ DỤNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ ĐỂ SÀNG LỌC KHẢ NĂNG SINH PACLITAXEL CỦA CÁC CHỦNG VI NẤM 33 3.5 ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI VÀ PHÂN LOẠI CÁC CHỦNG VI NẤM NỘI SINH TQF6, TQF25, TDF6, TDF7 37 3.5.1 Nghiên cứu đặc điểm hình thái khuẩn lạc, bào tử cuống sinh bào tử chủng vi nấm nội sinh tuyển chọn 37 3.5.2 Phân loại chủng vi nấm nội sinh tuyển chọn giải phân tích trình tự ITS 39 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 47 KẾT LUẬN 47 KIẾN NGHỊ 47 TÀI LIỆU THAM KHẢO 48 PHỤ LỤC 56 43 Bảng 3.4 Ma trận độ tương đồng trình tự ITS chủng TDF6 với chủng tham chiếu Chủng TDF6 F foetens CBS 110286 (NR_15986) F inflexum NRRL 20433 (NR_152941) F bactridioides CBS 100057 (NR_120262) F circinatum CBS 405.97 (NR_120263) F pseudocircinatum CBS 449.97 (NR_163683) TDF6 100,00 99,58 98,92 98,95 99,16 98,92 F foetens CBS 110286 (NR_159865) 99,58 100,00 95,99 95,69 95,88 95,59 F inflexum NRRL 20433 (NR_152941) 98,92 95,99 100,00 98,46 98,65 98,40 F bactridioides CBS 100057 (NR_120262) 98,95 95,69 98,46 100,00 99,82 99,60 F circinatum CBS 405.97 (NR_120263) 99,16 95,88 98,65 99,82 100,00 99,80 F pseudocircinatum CBS 449.97 (NR_163683) 98,92 95,59 98,40 99,60 99,80 100,00 44 Bảng 3.5 Ma trận độ tương đồng trình tự ITS chủng TDF7 với chủng tham chiếu Chủng TDF7 F foetens CBS 110286 (NR_15985) F inflexum NRRL 20433 (NR_152941) F pseudoanthophilum CBS 414.97 (NR_163682) F circinatum CBS 405.97 (NR_120263) F bactridioides CBS 100057 (NR_120262) TDF7 100,00 92,95 89,92 88,91 87,96 87,80 F foetens CBS 110286 (NR_159865) 92,95 100,00 95,99 95,50 95,88 95,69 F inflexum NRRL 20433 (NR_152941) 89,92 95,99 100,00 98,27 98,65 98,46 F pseudoanthophilum CBS 414.97 (NR_163682) 88,91 95,50 98,27 100,00 99,63 99,45 F circinatum CBS 405.97 (NR_120263) 87,96 95,88 98,65 99,63 100,00 99,82 F bactridioides CBS 100057 (NR_120262) 87,80 95,69 98,46 99,45 99,82 100,00 45 Hình 3.10 Cây phát sinh chủng loại chủng TQF6, TQF25, TDF6 TDF7 với giá trị Boostrap 1000, sử dụng thuật toán Kimuar với nhóm ngồi Murco bainieri (NR 103628) Sản phẩm PCR khuếch đại vùng ITS từ chủng TDF6 TDF7 cho băng điện di sắc nét có kích thước khoảng 550 bp (Hình 3.9) So sánh trình tự gen ITS chủng TDF6 với gen tham chiếu sở liệu GenBank (NCBI) cho thấy, chủng TDF6 thể độ tương đồng cao với chủng nấm Fusarium foetens CBS 110286 (99,58%), F pseudoanthophilum CBS 414.97 (99,36%) F circinatum CBS 405.97 (98,74%) (Bảng 3.4) Tương tự, chủng TDF7 có độ tương đồng cao với chủng nấm Fusarium foetens CBS 110286 (99,59%), F pseudoanthophilum CBS 414.97 (98,00%) F circinatum CBS 405.97 (98,37%) (Bảng 3.5) Cây phát sinh loài khẳng định 46 chủng TDF6 TDF7 thuộc nhóm (Hình 3.10) Kết hợp đặc điểm hình thái so với với công bố trước trình tự ITS, chủng nấm TDF6, TDF7 phân loại thuộc loài Fusarium foetens Năm 2016, Vasundhara báo cáo hoạt tính chống oxy hóa ức chế sư phát triển tế bào chủng F tricinctum T6 phân lập từ thông đỏ (T tabaca L subsp wallichiana (Zucc.) Pilger) Ấn Độ Chủng F tricinctum T6 cho thấy ức chế phát triển dòng tế bào ung thư MCF-7 HeLa với giá trị IC 50 dịch chiết nấm 225 ± 26 220 ± 18 μg/L dòng tế bào MCF-7 HeLa Hơn nữa, F tricinctum thể hoạt tính chống oxy hóa với giá trị IC 50 482 ± μg/mL [52] Năm 2015, Zaiyou cộng phân lập 435 chủng vi nấm nội sinh từ T wallichiana var mairei Trong đó, có chủng thuộc chi Fusarium có khả sản xuất paclitaxel Năng suất paclitaxel tồn mơi trường ni cấy PDB môi trường nuôi cấy qua sử dụng từ chủng 0,0153 mg/L 0,0119 mg/L Hàm lượng paclitaxel sợi nấm khô 0,27 mg/kg Các kết cho thấy tiềm sản xuất paclitaxel từ chủng Fusarium nói chung chủng Fusarium foetens TDF7 nói riêng lớn [73] Fusarium foetens biết đến loài nấm gây bệnh héo hải đường (Begonia hiemalis) phát Begonia Canada, Mỹ, Nhật Bản, Hà Lan, Đức Na Uy F foetens chưa báo cáo nhiều khả sinh hợp chất kháng khuẩn gây độc tế bào ung thư, nhiên chất có hoạt chất sinh học phân lập từ loài khác thuộc chi Fusarium nhiều 47 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN  Từ 25 chủng vi nấm nội sinh thông đỏ (T chinesis) thu thập Hà Giang, sàng lọc 12/25 (chiếm 48%) chủng có khả kháng VSV kiểm định Tuyển chọn chủng nấm gồm TQF6, TQF25, TDF6, TDF7 có khả kháng chủng VSV kiểm định  Chủng TDF7 ức chế mạnh với tế bào ung thư phổi A549 MCF7 với tỷ lệ ức chế tế bào đạt 93,91 ± 2,18% 89,22 ± 4,09 Tỷ lệ ức chế tế bào tế bào ung thư phổi A-549 ung thư vú MCF-7 chủng TDF6 đạt 92,65 ± 1,4% 77,15 ± 1,98%  Cả chủng TQF6, TQF25, TDF6 TDF7 có hoạt tính chống oxy hóa cao Tại nồng độ 400 µg/mL hoạt tính chống oxy hóa DPPH TQF6, TQF25, TDF6 TDF7 93,78; 93,49; 89,15 60,71%  Đánh giá khả sinh paclitaxel chủng TQF6, TQF25, TDF6 TDF7 thị phân tử cho thấy chủng TQF25 mang hai gen dbat bapt, chủng TQF6 TDF6 mang gen dbat; gen dbat, bapt ts không khuếch đại chủng TDF7  Kết hợp đặc điểm hình thái, bào tử phân tích trình tự gen ITS, chủng TQF6, TQF25, TDF6, TDF7 định danh Neofusicoccum italicum TQF6, Hypoxylon sp TQF25, Fusarium foetens TDF6 Fusarium foetens TDF7 KIẾN NGHỊ  Tiếp tục nghiên cứu tối ưu môi trường điều kiện lên men nhằm nâng cao khả sinh tổng hợp chất có hoạt tính kháng sinh ức chế tế bào ung thư từ chủng vi nấm TQF6, TQF25, TDF6 TDF7  Tách chiết phân tích cấu trúc hợp chất có hoạt tính sinh học từ dịch lên men chủng vi nấm 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO Bano, N., I.F Rizvi, N Sharma, M.H Siddiqui, M Kalim, A Khan, and S Akhtar, 2016, Production of bioactive secondary metabolites from endophytic fungi, International Research Journal of Engineering and Technology, 3(6), pp 11-21 Daisy, B.H., G.A Strobel, U Castillo, D Ezra, J Sears, D.K Weaver, and J.B Runyon, 2002, Naphthalene, an insect repellent, is produced by Muscodor vitigenus, a novel endophytic fungus, Microbiology, 148(11), pp 3737-3741 Schulz, B and C Boyle, 2005, The endophytic continuum, Mycological Research, 109(6), pp 661-686 Arnold, A.E., L.C Mejía, D Kyllo, E.I Rojas, Z Maynard, N Robbins, and E.A Herre, 2003, Fungal endophytes limit pathogen damage in a tropical tree, Proceedings of the National Academy of Sciences, 100(26), pp 15649-15654 Howitz, K.T and D.A Sinclair, 2008, Xenohormesis: sensing the chemical cues of other species, Cell, 133(3), pp 387-391 Wu, Y.-Y., T.-Y Zhang, M.-Y Zhang, J Cheng, and Y.-X Zhang, 2018, An endophytic Fungi of Ginkgo biloba L produces antimicrobial metabolites as potential inhibitors of FtsZ of Staphylococcus aureus, Fitoterapia, 128(pp 265-271 Hawksworth, D.L., 2001, The magnitude of fungal diversity: the 1· million species estimate revisited, Mycological Research, 105(12), pp 1422-1432 Schulz, B., C Boyle, S Draeger, A.-K Römmert, and K Krohn, 2002, Endophytic fungi: a source of novel biologically active secondary metabolites, Mycological Research, 106(9), pp 996-1004 Huang, W., Y Cai, K Hyde, H Corke, and M Sun, 2008, Biodiversity of endophytic fungi associated with 29 traditional Chinese medicinal plants, Fungal diversity, pp 11-19 10 Dreyfuss, M and I.H Chapela, Potential of fungi in the discovery of novel, low-molecular weight pharmaceuticals, in Discovery of Novel Natural Products with Therapeutic Potential 1994 p 49-80 49 11 Aly, A.H., R Edrada-Ebel, I.D Indriani, V Wray, W.E Müller, F Totzke, U Zirrgiebel, C Schächtele, M.H Kubbutat, and W Lin, 2008, Cytotoxic metabolites from the fungal endophyte Alternaria sp and their subsequent detection in its host plant Polygonum senegalense, Journal of Natural Products, 71(6), pp 972-980 12 Ibrahim, S.R., H.M Abdallah, E.S Elkhayat, N.M Al Musayeib, H.Z Asfour, M.F Zayed, and G.A Mohamed, 2018, Fusaripeptide A: new antifungal and anti-malarial cyclodepsipeptide from the endophytic fungus Fusarium sp, Journal of Asian Natural Products Research, 20(1), pp 75-85 13 Strobel, G and B Daisy, 2003, Bioprospecting for microbial endophytes and their natural products, Microbiology and Molecular Biology Reviews, 67(4), pp 491-502 14 Li, J.Y and G.A Strobel, 2001, Jesterone and hydroxy-jesterone antioomycete cyclohexenone epoxides from the endophytic fungus Pestalotiopsis jesteri, Phytochemistry, 57(2), pp 261-265 15 Lugtenberg, B.J., J.R Caradus, and L.J Johnson, 2016, Fungal endophytes for sustainable crop production, FEMS Microbiology Ecology, 92(12), pp 88-94 16 Demain, A.L., 2000, Microbial natural products: a past with a future, Special publication-royal society of chemistry, 257(pp 3-16 17 Berardo, C., I.M Bulai, E Venturino, P Baptista, and T Gomes, 2018, Modeling the endophytic fungus Epicoccum nigrum action to fight the “olive knot” disease caused by Pseudomonas savastanoi pv savastanoi (Psv) bacteria in Olea europaea L Trees, Trends in Biomathematics: Modeling, Optimization Computational Problems, pp 189-207 18 Tayung, K., B Barik, D Jha, and D Deka, 2011, Identification and characterization of antimicrobial metabolite from an endophytic fungus, Fusarium solani isolated from bark of Himalayan yew, Mycosphere, Journal of Fungal Biology, 2(3), pp 203-213 19 Rao, H.Y and S Satish, 2015, Genomic and chromatographic approach for the discovery of polyketide antimicrobial metabolites from an endophytic Phomopsis liquidambaris CBR-18, Frontiers in Life Science, 8(2), pp 200-207 50 20 Tawfik, N., R Abdo, G Abbott, U.R Abdelmohsen, R Edrada-Ebel, and E Haggag, 2017, Metabolomics and Bioactivity Guided Isolation of Secondary Metabolites from the Endophytic Fungus Chaetomium sp, Journal of Advanced Pharmacy Research, 1(1), pp 66-74 21 Ma, Y.-m., K Qiao, Y Kong, M.-y Li, L.-x Guo, Z Miao, and C Fan, 2017, A new isoquinolone alkaloid from an endophytic fungus R22 of Nerium indicum, Natural Product Research, 31(8), pp 951-958 22 Lai, D., A Wang, Y Cao, K Zhou, Z Mao, X Dong, J Tian, D Xu, J Dai, and Y Peng, 2016, Bioactive dibenzo-α-pyrone derivatives from the endophytic fungus Rhizopycnis vagum Nitaf22, Journal of Natural Products, 79(8), pp 2022-2031 23 Wu, L.-S., M Jia, L Chen, B Zhu, H.-X Dong, J.-P Si, W Peng, and T Han, 2016, Cytotoxic and antifungal constituents isolated from the metabolites of endophytic fungus DO14 from Dendrobium officinale, Molecules, 21(1), pp 14-21 24 Xie, S and J Zhou, 2017, Harnessing plant biodiversity for the discovery of novel anticancer drugs targeting microtubules, Frontiers in plant science, 8(pp 720-727 25 Stierle, A., G Strobel, and D Stierle, 1993, Taxol and taxane production by Taxomyces andreanae, an endophytic fungus of Pacific yew, Science, 260(5105), pp 214-216 26 Puri, S.C., A Nazir, R Chawla, R Arora, S Riyaz-ul-Hasan, T Amna, B Ahmed, V Verma, S Singh, and R Sagar, 2006, The endophytic fungus Trametes hirsuta as a novel alternative source of podophyllotoxin and related aryl tetralin lignans, Journal of Biotechnology, 122(4), pp 494-510 27 Jiao, R.H., S Xu, J.Y Liu, H.M Ge, H Ding, C Xu, H.L Zhu, and R.X Tan, 2006, Chaetominine, a cytotoxic alkaloid produced by endophytic Chaetomium sp IFB-E015, Organic Letters, 8(25), pp 5709-5712 28 Guo, B., J.-R Dai, S Ng, Y Huang, C Leong, W Ong, and B.K Carté, 2000, Cytonic acids A and B: novel tridepside inhibitors of hCMV protease from the endophytic fungus Cytonaema species, Journal of Natural Products, 63(5), pp 602-604 ... QUẢ VÀ THẢO LUẬN 27 3.1 SÀNG LỌC HOẠT TÍNH KHÁNG SINH CỦA CÁC CHỦNG VI NẤM NỘI SINH TRÊN CÂY THÔNG ĐỎ 27 3.2 SÀNG LỌC HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ CỦA CÁC CHỦNG VI NẤM NỘI SINH. .. khai thác hoạt chất kháng sinh 3.2 SÀNG LỌC HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ CỦA CÁC CHỦNG VI NẤM NỘI SINH Ngoài khả sinh kháng sinh ức chế vi sinh vật gây bệnh, vi nấm nội sinh thơng đỏ cịn nguồn... VÀ ĐÀO TẠO VI? ??N HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VI? ??T NAM HỌC VI? ??N KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Bùi Thị Liên NGHIÊN CỨU HOẠT TÍNH KHÁNG SINH VÀ GÂY ĐỘC TẾ BÀO CỦA VI NẤM NỘI SINH TRÊN CÂY