HIÊN cứu tác ĐỘNG của NANO bạc và NANO sắt lên CHẤT LƯỢNG cây GIỐNG IN VITRO ở một số cây TRỒNG có GIÁ TRỊ KINH tế

ĐẠI HỌC HUẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC ĐỖ MẠNH CƯỜNG NGHIÊN CỨU TÁCTÁC ĐỘNG CỦA NANO BẠCBẠC VÀ VÀ NANO NGHIÊN CỨU ĐỘNG CỦA NANO SẮT SẮT LÊN LÊN CHẤT LƯỢNG CÂYCÂY GIỐNG IN VITRO Ở NANO CHẤT LƯỢNG GIỐNG IN VITRO ỞMỘT MỘTSỐ SỐCÂY CÂYTRỒNG TRỒNGCÓ CÓGIÁ GIÁTRỊ TRỊKINH KINHTẾ TẾ LUẬN ÁN TIẾN SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC Thừa Thiên Huế - 2022 ĐẠI HỌC HUẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC NGHIÊN CỨU TÁC ĐỘNG CỦA NANO BẠC VÀ NANO SẮT LÊN CHẤT LƯỢNG CÂY GIỐNG IN VITRO Ở MỘT SỐ CÂY TRỒNG CÓ GIÁ TRỊ KINH TẾ LUẬN ÁN TIẾN SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC Ngành: Công nghệ Sinh học Mã số: 9420201 Người hướng dẫn khoa học: GS.TS Dương Tấn Nhựt PGS.TS Trương Thị Bích Phượng Hoc viên thực hiện: Đỗ Mạnh Cường Thừa Thiên Huế - 2022 LỜI CẢM ƠN Đối với khoảnh khắc mà quên lúc lên tuổi, ba mẹ gửi cho Cha nhà thờ để học mẫu giáo Cuộc sống gắn liền với nhà thờ học xong đại học Khoảnh khắc thứ hai lúc tơi bước vào phịng Sinh học Phân tử chọn tạo giống trồng để học mơn Cơng nghệ Sinh học Thực vật Chính môi trường làm việc, thầy cô, anh chị bạn sinh viên mở cho chân trời mới, ước mơ Để có ngày hôm nay, biết thân nhận nhiều giúp đỡ người Người mà biết ơn sâu sắc Thầy - GS.TS Dương Tấn Nhựt (Viện Nghiên cứu Khoa học Tây Ngun) Thầy tận tình bảo cho tơi biết nghiên cứu khoa học, qua giảng dạy Thầy, bầu trời trí thức mở trước mắt tôi; cho biết ưu tú nghề nhà giáo không kiến thức mà hết đạo đức, phong cách sư phạm Tôi điều kỳ diệu khơng có tâm huyết, nhiệt tình tận tụy Thầy Tơi khắc ghi lời răn dạy nghiêm khắc họp; hay câu chuyện hóm hỉnh đầy tính triết lý - nhân văn sống bữa ăn, chuyến hội nghị - công tác Tơi cảm thấy vinh dự sống, làm việc Thầy Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Cô - PGS.TS Trương Thị Bích Phượng (Trường Đại học Khoa học, Đại học Huế) Cơ ln tận tình giúp đỡ động viên tơi suốt q trình học tập thực luận án Tơi xin cảm ơn TS Hồng Thanh Tùng, người dành thời gian, nhiệt tình bảo, giúp đỡ tơi q trình viết chỉnh sửa luận án Qua đó, tơi học nhiều kiến thức kỹ nghiên cứu khoa học Cảm ơn hỗ trợ kinh phí đề tài, dự án phòng Sinh học Phân tử Chọn tạo giống trồng - Viện Nghiên cứu Khoa học Tây Ngun hỗ trợ cho tơi hồn thành luận án Tôi xin gửi lời cảm ơn đến Anh, Chị, bạn sinh viên, học viên cao học nghiên cứu sinh phòng Sinh học Phân tử Chọn tạo giống trồng - Viện i Nghiên cứu Khoa học Tây Nguyên, nơi thực nội dung luận án, giúp đỡ tơi q trình học tập, thực thí nghiệm hồn thành luận án Tơi xin cảm ơn ban giám hiệu Trường Đại học Khoa học, Đại học Huế, Q Thầy Cơ phịng Sau Đại học, Q Thầy Cô Khoa Sinh học cung cấp cho kiến thức giúp đỡ tơi suốt q trình học tập trường Tôi xin cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Nghiên cứu Khoa học Tây nguyên Ban lãnh đạo Công ty cổ phần Công nghệ Sinh học Thái Dương cho phép tạo điều kiện tốt cho tơi suốt q trình thực đề tài Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn đến ba mẹ người sinh con, bên cạnh, động viên tạo điều kiện để học tập, nghiên cứu Anh cảm ơn Vợ người yêu thương đồng hành anh chặng đường Lâm Đồng, ngày tháng năm 2022 Đỗ Mạnh Cường ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan nghiên cứu “Nghiên cứu tác động nano bạc nano sắt lên chất lượng giống in vitro số trồng có giá trị kinh tế” cơng trình nghiên cứu tơi hướng dẫn GS.TS Dương Tấn Nhựt PGS.TS Trương Thị Bích Phượng Nghiên cứu phần nhánh số Dự án trọng điểm cấp Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam “Nghiên cứu tác động hạt nano kim loại lên khả tái sinh, sinh trưởng phát triển tích luỹ hoạt chất q trình nhân giống số trồng có giá trị kinh tế cao Việt Nam” thuộc Hợp phần IV “Nghiên cứu chế tác động đánh giá an toàn sinh học chế phẩm nano”, mã số: VAST.TD.NANO.04/15-18 đề tài “Thiết lập phương pháp khử trùng mẫu, môi trường nuôi cấy khắc phục số tượng bất thường vi nhân giống số đối tượng trồng có giá trị kinh tế”, Mã số: 106.01-2019.301 Quỹ Phát triển Khoa học Công nghệ Quốc gia (NAFOSTED) Đề tài nghiên cứu thực phòng Sinh học Phân tử Chọn tạo Giống trồng thuộc Viện Nghiên cứu Khoa học Tây Nguyên Các số liệu hình ảnh trình bày luận án trung thực khách quan, nghiêm túc chưa sử dụng để cơng bố cơng trình khác Tơi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm cam đoan Lâm Đồng, ngày tháng năm 2022 Đỗ Mạnh Cường iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT 2,4-D : 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid AAS : Atomic Absorbtion Spectrometric (phương pháp Quang phổ hấp phụ nguyên tử) ACC : 1-Aminocyclopropane-1-Carboxylic Acid ACS : ACC Synthase Ag : Bạc AgNO3 : Bạc nitrat AgNPs : Các hạt nano bạc BA : Benzyladenine BAP : Benzylaminopurine DNA : Deoxyribonucleic Acid EDTA : Ethylenediamine Tetra Acetate Fe : Sắt FeNPs : Các hạt nano sắt GA3 : Gibberellic acid GC : Gas chromatography (hệ thống Sắc ký khí GC) HCl : Chlohydric Acid HNO3 : Nitric Acid IBA : 3-Indolebutyric Acid IBA : 3-Indolebutyric acid Kin : Kinetin MS : Môi trường Murashige Skoog (1962) NAA : Naphthaleneacetic acid SAM : S-adenosyl-L-methionine SEM : Scanning Electron Microscope (Kính hiển vi điện tử qt) SH : Mơi trường Schenk Hildebrandt (1972) SPSS : Statistical Package for the Social Sciences (Phần mềm thống kê cho ngành khoa học xã hội) TDZ : Thidiazuron iv MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i LỜI CAM ĐOAN iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iv MỤC LỤC v DANH MỤC BẢNG x DANH MỤC HÌNH xii DANH MỤC BIỂU ĐỒ xiv MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU Vi nhân giống 1.1.1 Khái niệm vi nhân giống 1.1.2 Các giai đoạn vi nhân giống thực vật 1.1.2.1 Khử trùng bề mặt 1.1.2.2 Phát sinh hình thái 1.1.2.3 Cây hồn chỉnh thích nghi vườn ươm 12 1.1.3 Một số hạn chế vi nhân giống thực vật 13 1.1.3.1 Tích luỹ khí ethylene 13 1.1.3.2 Hoá nâu mẫu cấy 15 Nano kim loại 16 1.2.1 Giới thiệu chung 16 1.2.2 Ứng dụng nano kim loại vi nhân giống thực vật 17 1.2.3 AgNPs FeNPs vi nhân giống thực vật 19 1.2.3.1 AgNPs vi nhân giống thực vật 19 v 1.2.3.2 FeNPs vi nhân giống thực vật 22 1.2.3.3 Hấp thu, vận chuyển chuyển hóa nano kim loại 25 1.2.4 Tính an tồn sinh học nano kim loại 27 Sơ lược đối tượng trồng sử dụng nghiên cứu 28 1.3.1 Cây salem 28 1.3.2 Dâu tây 29 1.3.3 Sâm Ngọc Linh 31 CHƯƠNG VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 Vật liệu 34 2.1.1 Vật liệu thực vật 34 2.1.2 Dung dịch nano 34 2.1.3 Thiết bị, dụng cụ, hoá chất 34 Nội dung nghiên cứu 35 2.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng AgNPs lên khử trùng bề mặt cảm ứng mẫu cấy 35 2.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng AgNPs lên phát sinh hình thái loại mẫu nuôi cấy in vitro 35 2.2.3 Nghiên cứu ảnh hưởng AgNPs FeNPs lên trình tạo hồn chỉnh từ chồi ni cấy in vitro 35 2.2.4 Nghiên cứu khả sinh trưởng in vitro nuôi cấy môi trường bổ sung AgNPs thay Fe-EDTA FeNPs tối ưu giai đoạn ex vitro 36 Phương pháp nghiên cứu 36 2.3.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm 36 2.3.1.1 Thí nghiệm 1: Nghiên cứu ảnh hưởng AgNPs lên khử trùng bề mặt cảm ứng mẫu cấy 36 vi 2.3.1.2 Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng AgNPs lên phát sinh hình thái loại mẫu nuôi cấy in vitro 37 2.3.1.3 Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng AgNPs FeNPs lên trình tạo hồn chỉnh từ chồi ni cấy in vitro 38 2.3.1.4 Thí nghiệm 4: Theo dõi khả thích nghi, sinh trưởng, phát triển tích luỹ hoạt chất in vitro nuôi cấy môi trường bổ sung AgNPs thay Fe-EDTA FeNPs tối ưu giai đoạn ex vitro 40 2.3.2 Phương pháp theo dõi tiêu 41 2.3.3 Phương pháp quan sát bề mặt mô sẹo 42 2.3.4 Phương pháp giải phẫu thực vật 42 2.3.5 Phương pháp quan sát đếm số lượng tế bào 42 2.3.6 Phương pháp xác định hàm lượng khí ethylene 43 2.3.7 Phương pháp xác định hàm lượng AgNPs hấp thụ 43 2.3.8 Phương pháp phân tích định lượng saponin (G-Rg1, M-R2, G-Rb1) 44 Điều kiện nuôi cấy 44 Địa điểm thời gian tiến hành thí nghiệm 44 Phương pháp xử lý thống kê 45 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 46 Nghiên cứu ảnh hưởng AgNPs lên khử trùng bề mặt cảm ứng mẫu cấy 46 3.1.1 Ảnh hưởng AgNPs lên khử trùng bề mặt cảm ứng mẫu salem 46 3.1.2 Ảnh hưởng AgNPs lên khử trùng bề mặt cảm ứng mẫu dâu tây 49 vii 3.1.3 Ảnh hưởng AgNPs lên khử trùng bề mặt cảm ứng mẫu sâm Ngọc Linh 52 Nghiên cứu ảnh hưởng AgNPs lên phát sinh hình thái loại mẫu ni cấy in vitro 57 3.2.1 Ảnh hưởng AgNPs lên gia tăng số lượng tế bào từ mô sẹo salem nuôi cấy in vitro 57 3.2.2 Ảnh hưởng AgNPs lên tái sinh chồi từ huyền phù tế bào salem nuôi cấy in vitro 60 3.2.3 Ảnh hưởng AgNPs lên q trình phát sinh tăng sinh phơi từ mô sẹo sâm Ngọc Linh nuôi cấy in vitro 62 Nghiên cứu ảnh hưởng AgNPs FeNPs lên trình tạo hồn chỉnh từ chồi ni cấy in vitro 68 3.3.1 Ảnh hưởng AgNPs FeNPs lên trình tạo hồn chỉnh từ chồi salem nuôi cấy in vitro 68 3.3.2 Ảnh hưởng AgNPs FeNPs lên q trình tạo hồn chỉnh từ chồi dâu tây nuôi cấy in vitro 71 3.3.3 Ảnh hưởng AgNPs FeNPs lên q trình tạo hồn chỉnh từ chồi sâm Ngọc Linh nuôi cấy in vitro 74 Khả sinh trưởng in vitro nuôi cấy môi trường bổ sung AgNPs thay Fe-EDTA FeNPs tối ưu giai đoạn ex vitro 84 3.4.1 Khả sinh trưởng salem in vitro nuôi cấy môi trường bổ sung AgNPs thay Fe-EDTA FeNPs tối ưu giai đoạn ex vitro 84 3.4.2 Khả sinh trưởng dâu tây in vitro nuôi cấy môi trường bổ sung AgNPs thay Fe-EDTA FeNPs tối ưu giai đoạn ex vitro 87 viii Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 SLH NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 2,3333 3,00 2,6667 2,00 Sig 4,3333 ,506 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 KLT NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 3,00 2,00 Sig 28,9333 35,2667 61,5333 1,000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 Bảng 3.11 Kết phân tích thống kê đặc điểm dâu tây vỉ xốp sau tuần nuôi trồng TLS NT Subset for alpha = 0.05 N Duncana 1,00 69,3333 2,00 72,3333 3,00 86,0000 Sig ,527 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 SL NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 6,0000 2,00 6,3333 3,00 Sig 8,6667 ,604 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 CCC NT Subset for alpha = 0.05 N Duncana 1,00 6,6667 2,00 7,3333 3,00 11,3333 Sig ,356 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 DTL NT Subset for alpha = 0.05 N Duncana 1,00 1,9433 2,00 2,0667 3,00 3,2400 Sig ,717 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 TLT NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 5,4667 2,00 5,8333 3,00 Sig 8,8667 ,598 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 CHLL NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 33,5333 2,00 35,0333 3,00 Sig 39,9000 ,170 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 Bảng 3.12 Kết phân tích thống kê đặc điểm salem bịch nhựa sau 12 tuần nuôi trồng CCC NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 10,3000 2,00 11,4000 3,00 Sig 15,1000 ,472 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 TLDT NT Subset for alpha = 0.05 N Duncana 1,00 50,0000 2,00 76,6667 3,00 81,7600 Sig 1,000 ,478 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 NF1 NT Subset for alpha = 0.05 N Duncana 1,00 2,0000 2,00 3,0000 3,00 6,0000 Sig ,267 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 NF2 NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 ,0000 2,00 ,0000 3,00 Sig 3,0000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 DTL NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 7,4667 2,00 7,9867 3,00 Sig 14,0067 ,744 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 KLT NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 21,8000 2,00 22,8333 3,00 Sig 39,8667 ,727 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 Bảng 3.13 Kết phân tích thống kê đặc điểm sâm Ngọc Linh vỉ xốp sau tháng nuôi trồng TLS NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 3,00 2,00 Sig 44,4467 63,4900 93,6533 1,000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 SL NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana ,00 5,60 1,20 Sig 1,0000 2,0000 3,3333 1,000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 CCC NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana ,00 5,60 1,20 Sig 1,1667 3,3000 4,6667 1,000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 DTL NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana ,00 5,60 1,20 Sig ,3067 1,9400 3,7400 1,000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 KLT NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana ,00 5,60 1,20 Sig 1,0333 2,1000 3,8667 1,000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 CHLL NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana ,00 5,60 1,20 3 16,7367 19,6533 23,9500 Sig 1,000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 Bảng 3.14 Kết phân tích thống kê đặc điểm sâm Ngọc Linh rổ nhựa sau 18 tháng nuôi trồng SL NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 1,6667 3,00 2,3333 2,00 Sig 4,3333 ,207 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 CCC NT N Subset for alpha = 0.05 1,00 Duncana 3,00 2,00 3 1,6333 3,9000 6,7333 Sig 1,000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 DTL NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 3,00 2,00 Sig ,5200 2,6833 6,0233 1,000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 KLT NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 3,00 2,00 Sig 1,4333 2,6667 5,2000 1,000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 CHLL NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 19,7367 3,00 20,9867 2,00 Sig 24,9500 ,421 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 Biểu đồ 3.5 Kết phân tích thống kê khối lượng tươi củ sâm Ngọc Linh nhà kính sau 24 tháng ni trồng KLT NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 3,00 2,00 Sig 43,5033 61,7467 77,5033 1,000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 Biểu đồ 3.6 Kết phân tích thống kê hàm lượng saponin củ sâm Ngọc Linh nhà kính sau 24 tháng ni trồng SPN1 NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 1,2843 3,00 1,3133 2,00 Sig 1,5503 ,728 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 SPN2 NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 3,00 2,00 Sig 1,4170 2,4140 3,1203 1,000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 SPN3 NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 1,0117 3,00 1,0347 2,00 Sig 1,3700 ,767 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 SPN4 NT N Subset for alpha = 0.05 Duncana 1,00 3,00 2,00 Sig 3,7130 4,7620 6,0407 1,000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000 Dựa kết nghiên cứu trên, quy trình nhân giống salem, dâu tây sâm Ngọc Linh mơi trường có diện AgNPs, FeNPs đề xuất sau: Khử trùng bề mặt salem ex vitro ½ MS + 1,0 mg/L Picloram môi trường rắn tuần 0,2 mg/L AgNPs 20 phút 0,5 mg/L AgNPs trong15 phút Mơ sẹo ½ MS + 1,0 mg/L Picloram môi trường lỏng 1,2 mg/L AgNPs 20 ngày Nuôi cấy huyền phù tế bào salem ½ MS + 1,0 mg/L Zeatin tuần 1,6 mg/L AgNPs Tái sinh chồi salem MS + 0,4 mg/L NAA tuần 0,4 mg/L AgNPs Ra rễ salem Cây có nguồn gốc từ nghiệm thức có bổ sung 0,4 mg/L AgNPs 4, 12 tuần Thích nghi, sinh trưởng, phát triển hoa điều kiện vườn ươm Sơ đồ 3.1 Quy trình nhân giống salem có diện AgNPs nồng độ thời gian thích hợp Khử trùng bề mặt dâu tây ex vitro MS + 1,0 mg/L TDZ + 0,1 mg/L IBA tuần 0,2 mg/L AgNPs 20 phút Chồi MS + 0,4 mg/L NAA tuần 0,5 mg/L AgNPs 1,4 mg/L FeNPs Ra rễ dâu tây 4, 12 tuần Cây có nguồn gốc từ nghiệm thức thay 1,4 mg/L FeNPs Thích nghi, sinh trưởng, phát triển, hoa, đậu tạo ngó điều kiện vườn ươm Sơ đồ 3.2 Quy trình nhân giống dâu tây có diện AgNPs FeNPs nồng độ thời gian thích hợp Khử trùng bề mặt sâm Ngọc Linh ex vitro ½ MS + 1,0 mg/L 2,4-D + 0,2 mg/L TDZ tuần 0,2 mg/L AgNPs 20 phút Mô sẹo MS + 1,0 mg/L 2,4-D + 0,5 mg/L NAA + 0,2 mg/L Kin 14 tuần 1,6 mg/L AgNPs Phát sinh tăng sinh phôi sâm Ngọc Linh SH + 1,0 mg/L NAA 1,2 mg/L AgNPs 12 tuần Ra rễ sâm Ngọc Linh tháng, năm, năm Cây có nguồn gốc từ nghiệm thức có bổ sung 1,2 mg/L AgNPs Thích nghi, sinh trưởng, phát triển tích luỹ saponin hoa điều kiện vườn Sơươm đồ 3.3 Quy trình nhân giống sâm Ngọc Linh có diện hạt nano kim loại thích hợp ... HỌC NGHIÊN CỨU TÁC ĐỘNG CỦA NANO BẠC VÀ NANO SẮT LÊN CHẤT LƯỢNG CÂY GIỐNG IN VITRO Ở MỘT SỐ CÂY TRỒNG CĨ GIÁ TRỊ KINH TẾ LUẬN ÁN TIẾN SĨ CƠNG NGHỆ SINH HỌC Ngành: Công nghệ Sinh học Mã số: 9420201... đề tài “Nghiên cứu tác động nano bạc nano sắt lên chất lượng giống in vitro số trồng có giá trị kinh tế? ?? Trong nghiên cứu này, trồng sử dụng làm đối tượng nghiên cứu salem (Limonium sinuatum)... ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan nghiên cứu “Nghiên cứu tác động nano bạc nano sắt lên chất lượng giống in vitro số trồng có giá trị kinh tế? ?? cơng trình nghiên cứu tơi hướng dẫn GS.TS Dương Tấn