Trong đề tài này, ánh sáng đèn LED đỏ và LED xanh kết hợp với với các tỷ lệ khác nhau được sử dụng làm nguồn sáng để nghiên cứu ảnh hưởng của chúng lên sự tái sinh, sinh trưởng và phát
Trang 1VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM
*****
NGUYỄN BÁ NAM
NGHIÊN CỨU VÀ ỨNG DỤNG HỆ THỐNG
CHIẾU SÁNG ĐƠN SẮC TRONG NHÂN GIỐNG TRÊN MỘT
SỐ LOẠI CÂY TRỒNG CÓ GIÁ TRỊ KINH TẾ
Chuyên ngành: Khoa học cây trồng
Mã số: 62.62.01.10
TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP
TP HỒ CHÍ MINH - 2016
Trang 2Phòng Sinh học phân tử và Chọn tạo giống cây trồng,
Viện Nghiên cứu Khoa học Tây Nguyên
Người hướng dẫn khoa học:
1 PGS.TS Dương Tấn Nhựt
2 TS Nguyễn Đình Lâm
Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án sẽ được bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp Viện họp tại Viện Khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp Miền nam ngày tháng năm
Có thể tìm hiểu luận án tại:
1 Thư Viện Quốc gia
2 Thư Viện Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam
3 Thư Viện (ghi tên các thư Viện nộp luận án)
Trang 3MỞ ĐẦU
1 Tính cấp thiết của đề tài
Hiện nay, đèn huỳnh quang là nguồn chiếu sáng chính trong các phòng nuôi cấy mô thực vật Tuy nhiên, nó vẫn còn tồn tại một số nhược điểm nhất định như: tuổi thọ thấp, tiêu tốn nhiều điện năng, phát nhiệt, có những phổ ánh sáng không cần thiết… Việc sử dụng ánh sáng đơn sắc (đèn LED) có thể khắc phục được những hạn chế trên cũng như cải thiện khả năng sinh trưởng và phát triển của cây trồng Việc
thực hiện đề tài “Nghiên cứu và ứng dụng hệ thống chiếu sáng đơn sắc trong nhân giống trên một số loại cây trồng có giá trị kinh tế” là
rất cần thiết
2 Mục tiêu và yêu cầu của đề tài
Xác định tỷ lệ chiếu sáng LED đỏ và LED xanh tối ưu cho quá trình tái sinh, sinh trưởng của một số đối tượng trong nuôi cấy mô là cúc, dâu tây, lan Hồ Điệp, sâm Ngọc Linh
Xác định tỷ lệ chiếu sáng LED đỏ và LED xanh thích hợp trong canh tác cây hoa cúc nhằm tiết kiệm chi phí điện năng
Thiết kế hệ thống chiếu sáng LED mới có thể gia tăng hiệu quả sử
dụng của đèn LED trong nhân giống in vitro
3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài
a) Phương pháp luận của đề tài
Ánh sáng có vai trò quan trọng trong quá trình sinh trưởng và phát triển thực vật, tuy nhiên, trong tất cả vùng quang phổ của ánh sáng nhìn thấy thì vùng ánh sáng xanh dương và ánh sáng đỏ là quan trọng hơn cả Những tín hiệu từ ánh sáng đỏ và xanh tác động đến quá trình trao đổi chất và biểu hiện hoạt động của gene từ đó cho phép thực vật thay đổi sự sinh trưởng, phát triển và các chức năng khác để thích nghi với điều kiện môi trường
b) Ý nghĩa khoa học
Trang 4Đề tài thực hiện có thể tìm hiểu vai trò của ánh sáng xanh, đỏ và ánh sáng xanh kết hợp với ánh sáng đỏ trong quá trình phát sinh hình thái, sinh trưởng và phát triển của từng loại cây trồng được nghiên cứu Thông qua điều khiển ánh sáng có thể điều khiển quá trình phát sinh hình thái thực vật cũng như nâng cao chất lượng cây giống Tạo ra hệ thống chiếu sáng mới phục vụ riêng cho ngành vi nhân giống
c) Ý nghĩa thực tiễn của đề tài
Có ý nghĩa lớn trong nhân giống in vitro: nâng cao chất lượng đồng nghĩa với việc gia tăng tỷ lệ sống của cây vi nhân giống, tiết kiệm
lượng điện năng tiêu thụ cho hệ thống phát sáng, do đó, làm giảm chi
phí sản xuất trong nhân giống in vitro
4 Đối tượng và phạm vi nghiên cứu của đề tài
a) Đối tượng nghiên cứu
Hệ thống chiếu sáng đơn sắc được ứng dụng để nghiên cứu quá
trình tái sinh, sinh trưởng của cây cúc (Chrysanthemum morifolium), dâu tây (Fragaria sp.), lan Hồ Điệp (Phalaenopsis amabilis), sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.)
b) Phạm vi nghiên cứu của đề tài
Đề tài được thực hiện với sự kết hợp của kỹ thuật vật lý trong thiết
kế đèn LED và kỹ thuật nuôi cấy mô trong nghiên cứu ảnh hưởng của ánh sáng LED đến sự tái sinh, sinh trưởng cây trồng Ngoài ra, việc thực hiện đề tài còn tiến hành trên đồng ruộng để đánh giá hiệu quả của ánh sáng đơn sắc trong canh tác cây hoa cúc cũng như tạo ra thiết
bị chiếu sáng mới sử dụng đèn LED trong nuôi cấy mô hiện nay
5 Những đóng góp mới của luận án
Nghiên cứu có tính tiên phong và có hệ thống về ứng dụng đèn LED trong tái sinh, sinh trưởng cây trồng tại Việt Nam
Xây dựng quy trình nhân giống của bốn loại cây trồng là cúc, dâu tây, lan Hồ Điệp và sâm Ngọc Linh dưới đèn LED
Trang 5Trong điều kiện nhà kính, việc sử dụng ánh sáng LED có thể tiết kiệm năng lượng điện chiếu sáng lên đến 50% nhưng vẫn thúc đẩy sự sinh trưởng của cây trồng
Luận án đã thiết kế hệ thống chiếu sáng LED mới - đèn LED kết hợp với truyền điện không dây - mở ra tiềm năng mới trong việc ứng dụng đèn LED nhằm tiết kiệm năng lượng và tiết kiệm không gian trong phòng nuôi cấy mô
6 Kết cấu của luận án
Luận án gồm 175 trang (kể cả tài liệu tham khảo) chia thành các phần: Phần mở đầu 5 trang; chương 1: Tổng quan tài liệu, 31 trang; chương 2: Vật liệu và phương pháp, 32 trang; chương 3: Kết quả và thảo luận, 89 trang; chương 4: Kết luận và đề nghị, 1 trang; các công trình đã công bố liên quan đến luận án, 2 trang; phần tài liệu tham khảo, 15 trang với 165 tài liệu tham khảo bằng tiếng Việt, tiếng Anh
và internet Luận án có 34 bảng, 48 hình và biểu đồ
CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU
Luận án đã tham khảo 3 tài liệu tiếng Việt, 158 tài liệu tiếng Anh
và 4 tài liệu internet với các nội dung liên quan đến: (1) Vai trò ánh sáng trong sinh lý thực vật; (2) Ứng dụng đèn LED trong nuôi cấy mô
tế bào thực vật và canh tác cây trồng; (3) sơ lược các đối tượng nghiên cứu: cây hoa cúc; cây dâu tây; cây lan Hồ Điệp và sâm Ngọc Linh
Nhân giống in vitro là một phương pháp công nghệ sinh học hiện
đại sản xuất những cây giống hoàn toàn sạch bệnh trong nông nghiệp
và lâm nghiệp Hiệu quả nhân giống trên quy mô thương mại phụ
thuộc vào mức độ phát triển nhanh của cây in vitro trong giai đoạn
nhân giống, tỷ lệ cây sống cao trong giai đoạn thuần hóa và tự động hóa trong sản xuất Tuy nhiên, cây sinh trưởng trong bình nuôi cấy có
Trang 6thể tích nhỏ có mật độ dinh dưỡng cao về khoáng đa lượng và khoáng
vi lượng, độ ẩm cao, mức độ carbohydrate và hormone cao, ánh sáng
có cường độ thấp, áp lực nước và áp suất thẩm thấu thấp, và sự trao đổi khí O2 và CO2 thấp Những nhân tố này đúc kết vào môi trường dinh dưỡng và vi môi trường bình nuôi cấy giúp cây tăng sinh nhanh, nhưng thường phát sinh những trạng thái sinh lý, cấu trúc và hình thái không bình thường dẫn đến tỷ lệ sống thấp khi chuyển cây ra điều kiện
ex vitro, do đó, làm tăng giá thành sản xuất Trong một vài hệ thống
nhân giống hoa và các loại cây trồng khác trên quy mô công nghiệp, lượng cây con bị chết khi chuyển ra ngoài vườn ươm chiếm khoảng 10-40% hoặc cao hơn nữa Cho đến nay, đèn huỳnh quang là nguồn chiếu sáng được sử dụng phổ biến trong nhân giống thực vật Ánh sáng huỳnh quang là sự phối trộn của nhiều vùng quang phổ từ những vùng ánh sáng có bước sóng ngắn 320 nm đến bước sóng dài 800 nm Có những vùng bước sóng ngắn không có lợi cho sự sinh trưởng của thực vật Vì vậy, sự phát triển những hệ thống chiếu sáng mới trong những phòng nuôi cấy mô sẽ mang lại những lợi ích đáng kể trong việc giảm giá thành trong nhân giống vô tính Trong đó, nguồn chiếu sáng đơn sắc (LED) đang được chú trọng trong vi nhân giống thực vật So với đèn huỳnh quang thì đèn LED có nhiều ưu điểm hơn: kích thước và thể tích nhỏ, tuổi thọ cao và vùng quang phổ được kiểm soát Với những ưu điểm trên đèn LED có thể được thay thế dần đèn huỳnh quang như nguồn chiếu sáng trong vi nhân giống
Hiện nay, ở Việt Nam có hàng trăm phòng thí nghiệm nuôi cấy mô để sản xuất cây giống bao gồm cây hoa cảnh, cây lâm nghiệp, cây nông nghiệp Theo số liệu thống kê, riêng tại tỉnh Lâm Đồng có tới gần 60 phòng nuôi cấy mô hằng năm cung cấp hàng triệu cây giống cho sản xuất và xuất khẩu [170] Ngoài ra, diện tích trong canh tác cây
Trang 7hoa cúc thương phẩm tại Đà Lạt và Lạc Dương vào khoảng 400ha phải
sử dụng đèn compact 3U để chiếu sáng bổ sung vào ban đêm nhằm ngăn hiện tượng ra hoa sớm, đồng thời, điều khiển ra hoa theo đúng dịp lễ, tết để nâng cao giá trị kinh tế Với việc thắp sáng phòng nuôi
và chiếu sáng bổ sung cho cây hoa cúc mỗi năm các nhà sản xuất giống
và nông dân trồng cúc tiêu tốn hàng triệu kWh điện Nếu đèn LED bóng dài được thay thế hoàn toàn đèn huỳnh quang trong phòng nuôi cấy mô và thay thế toàn bộ đèn compact 3U bằng đèn LED bóng tròn trong canh tác cây hoa cúc ở điều kiện nhà kính thì điện năng tiêu thụ cũng như tổng kinh phí phải trả cho điện năng thắp sáng giảm đi đáng
kể Xuất phát từ cơ sở trên, đề tài luận án“Nghiên cứu và ứng dụng
hệ thống chiếu sáng đơn sắc trong nhân giống trên một số loại cây trồng có giá trị kinh tế” được thực hiện Trong đề tài này, ánh sáng
đèn LED đỏ và LED xanh kết hợp với với các tỷ lệ khác nhau được sử dụng làm nguồn sáng để nghiên cứu ảnh hưởng của chúng lên sự tái sinh, sinh trưởng và phát triển của một số loại cây có giá trị kinh tế cao như cúc, dâu tây, lan Hồ Điệp và sâm Ngọc Linh Từ đó, xác định được tỷ lệ ánh sáng LED đỏ và xanh phù hợp với tái sinh, sinh trưởng của từng loại cây trồng để nâng cao chất lượng cây giống cũng như giảm giá thành trong nhân giống
CHƯƠNG II VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu
2.1.1 Vật liệu thực vật
Vật liệu được sử dụng là: lá, lớp mỏng thân, chồi ngọn in vitro và
ex vitro cây cúc (Chrysanthemum morifolium); lá và chồi dâu tây (Fagaria sp.), phôi, PLB (protocorm like body) và cây con lan Hồ Điệp (Phalaenopsis amabilis), phôi, cây con sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.)
Trang 82.1.2 Thiết bị - dụng cụ, hóa chất chuẩn và dung môi
Máy SPAD-502; máy đo diện tích lá LI-3000C; máy đo cường độ ánh sáng LI-250A Light meter; Thiết bị dùng trong phân tích HPLC
(High-performance liquid chromatography: sắc ký lỏng cao áp) Hóa chất chuẩn: Rg1;Rb1; MR2 Dung môi để chạy sắc ký lớp mỏng là: Cloroform:methanol:nước (65:35:10)
2.1.3 Thiết bị chiếu sáng
2.1.3.1 Đèn huỳnh quang
2.1.3.2 Hệ thống chiếu sáng LED
a Hệ thống chiếu sáng LED panel
Các linh kiện điện tử được sử dụng
Điều kiện chiếu sáng trong thí nghiệm được thiết lập như sau: D: điều kiện tối hoàn toàn; FL: ánh sáng đèn huỳnh quang (đối
chứng sử dụng trong in vitro); 3U: ánh sáng đèn compact 3U ánh sáng
vàng (đối chứng sử dụng trong nhà kính); 100R: 100% LED đỏ; 90R:10B: 90% ánh sáng LED đỏ + 10% ánh sáng LED xanh; 80R:20B: 80% ánh sáng LED đỏ + 20% ánh sáng LED xanh; 70R:30B: 70% ánh sáng LED đỏ + 30% ánh sáng LED xanh; 60R:40B: 60% ánh sáng LED đỏ + 40% ánh sáng LED xanh; 50R:50B: 50% ánh sáng LED đỏ + 50% ánh sáng LED xanh; 40R:60B: 40% ánh sáng LED đỏ + 60% ánh sáng LED xanh; 30R:70B: 30% ánh sáng LED đỏ + 70% ánh sáng LED xanh; 20R:80B: 20% ánh sáng LED đỏ + 80% ánh sáng LED xanh; 10R:90B: 10% ánh sáng LED đỏ + 90% ánh sáng LED xanh; 100B: 100% ánh sáng LED xanh, tỷ lệ kết hợp của LED xanh và LED đỏ phụ thuộc vào số bóng kết hợp giữa chúng theo phương pháp của Nhut,
2002 [99] Tùy vào mục đích thí nghiệm mà các mẫu cấy sẽ được đặt dưới các loại ánh sáng và tỷ lệ ánh sáng khác nhau LED panel được
Trang 9sử dụng cho tất cả các thí nghiệm tái sinh, sinh trưởng và phát triển của cây trồng dưới tỷ lệ kết hợp giữa LED xanh và LED đỏ
b Các hệ thống chiếu sáng LED cải tiến sử dụng trong nghiên cứu Đèn LED bóng tròn: Đèn LED bóng tròn gồm các chíp LED đơn
xanh và đỏ kết hợp trong một bóng (Công ty bóng đèn phích nước
Rạng Đông); Đèn LED tuýp: Đèn LED được sử dụng trong thí nghiệm
là đèn Plant Grow LED (Công ty TNHH thương mại dịch vụ kỹ thuật
CSV - Hồ Chí Minh) (Hình 2.3a); Hệ thống LED truyền điện bằng dây cáp (LED uni-Pack (LP)): Thiết bị LED-uniPack (LP) sử dụng trong
thí nghiệm được nhóm nghiên cứu tự thiết kế bằng mica có kích thước
8 cm (chiều dài), 2 cm (cao), 8 cm (rộng) Nguồn chiếu sáng LED được gắn trên trần của hộp (bảng mạch đèn LED được lắp đặt với 29 LED (20 LED đỏ : 9 LED xanh, tương ứng với tỷ lệ R:B ~ 7:3, công
suất 2,9W/hộp) (Hình 2.3b); Hệ thống LED truyền điện không dây [Wireless power transfer - LED uni-Pack (WPT - LP)]: Thiết bị được
nhóm nghiên cứu tự thiết kế gồm hai mạch: (1) Mạch phát: mạch biến đổi dòng điện thành từ trường (2) Mạch thu: mạch thu từ trường và biến đổi thành điện năng tiêu thụ cung cấp cho bảng mạch LED được thiết kế giống hệ thống LP Hệ thống được mô tả chi tiết theo hình 2.3a,b,c,d
Hình 2.2 Các hệ thống chiếu sáng
bằng đèn LED a Đèn LED với tỷ lệ
chiếu sáng 70% LED đỏ kết hợp 30%
LED xanh; b LED uni-Pack (LP)
Hình 2.3 Hệ thống nuôi cấy LED truyền điện không
dây (Wireless power transfer – LED uni-Pack (WPT
- LP)) a thiết bị phát; b thiết bị thu; c.d hoạt động của hệ thống
Trang 102.2 Nội dung nghiên cứu
2.2.1 Nội dung 1: Nghiên cứu ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng khác nhau lên sự tái sinh chồi và sinh trưởng của cây hoa cúc
2.2.2 Nội dung 2: Nghiên cứu ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng khác nhau lên sự tái sinh chồi và sinh trưởng của cây dâu tây
2.2.3 Nội dung 3: Nghiên cứu ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng khác nhau lên sự hình thành cây con và sinh trưởng của cây lan
Hồ Điệp
2.2.4 Nội dung 4: Nghiên cứu ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng lên khác nhau sự hình thành cây con, sinh trưởng và tích lũy các hợp chất thứ cấp của cây sâm Ngọc Linh
2.2.5 Nội dung 5: Nghiên cứu ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng bổ sung khác nhau vào ban đêm lên sự sinh trưởng và phát triển cây cúc trồng trong nhà kính
2.2.6 Nội dung 6: Nghiên cứu ảnh hưởng của hệ thống chiếu sáng
mới lên sự sinh trưởng của cây cúc và cây dâu tây nuôi cấy in vitro và
sự sinh trưởng tiếp theo của chúng ở giai đoạn vườn ươm
2.2.7 Nội dung 7: Ước tính hiệu quả kinh tế và giá thành sản xuất cây
giống giữa đèn LED tuýp với đèn huỳnh quang sử dụng trong phòng nuôi cấy mô và đèn LED bóng tròn với đèn compact 3U trong nhà kính
2.3 Phương pháp nghiên cứu
2.3.1 Cơ sở của việc sử dụng LED đỏ và LED xanh trong thí nghiệm 2.3.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm
2.3.2.1 Thí nghiệm 1 Khảo sát ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng khác nhau lên sự tái sinh chồi từ mẫu cấy lá cúc
2.3.2.2 Thí nghiệm 2 Khảo sát ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng khác nhau lên sự tái sinh chồi từ lớp mỏng thân cúc
2.3.2.3 Thí nghiệm 3 Khảo sát ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng khác nhau lên sự sinh trưởng của cây cúc in vitro và sự sinh trưởng tiếp theo của chúng ở giai đoạn vườn ươm
2.3.2.4 Thí nghiệm 4 Khảo sát ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng khác nhau lên sự tái sinh chồi từ mẫu lá dâu tây
2.3.2.5 Thí nghiệm 5 Khảo sát ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng khác nhau lên sự sinh trưởng của cây dâu tây in vitro và sự sinh trưởng tiếp theo của chúng ở giai đoạn vườn ươm
Trang 112.3.2.6 Thí nghiệm 6 Khảo sát ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng khác nhau lên sự hình thành và nhân nhanh PLB từ phôi lan Hồ Điệp
2.3.2.7 Thí nghiệm 7 Khảo sát ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng khác nhau lên sự hình thành cây con từ PLB lan Hồ Điệp
2.3.2.8 Thí nghiệm 8 Khảo sát ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng khác nhau lên sự sinh trưởng của cây lan Hồ Điệp in vitro và sự sinh trưởng tiếp theo của chúng ở giai đoạn vườn ươm
2.3.2.9 Thí nghiệm 9 Khảo sát ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng khác nhau lên sự hình thành cây con từ phôi sâm Ngọc Linh
2.3.2.10 Thí nghiệm 10 Khảo sát ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng khác nhau lên sự sinh trưởng và tích lũy hợp chất thứ cấp của cây sâm Ngọc Linh nuôi cấy in vitro
2.3.2.11 Thí nghiệm 11 Khảo sát ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng khác nhau đến quá trình thích nghi của cây sâm Ngọc Linh ở điều kiện vườn ươm
2.3.2.12 Thí nghiệm 12 Khảo sát ảnh hưởng của các điều kiện chiếu
sáng bổ sung khác nhau vào ban đêm lên khả năng sinh trưởng và phát triển của ba giống cúc (Sapphire; Đóa vàng; Kim cương) được trồng trong nhà kính
2.3.2.13 Thí nghiệm 13 Khảo sát ảnh hưởng của các hệ thống chiếu
sáng khác nhau lên sự sinh trưởng của cây cúc nuôi cấy in vitro và sự sinh trưởng tiếp theo của chúng ở giai đoạn vườm ươm
2.3.2.14 Thí nghiệm 14 Khảo sát ảnh hưởng của các hệ thống chiếu
sáng khác nhau lên sự sinh trưởng của cây dâu tây nuôi cấy in vitro
và sự sinh trưởng tiếp theo của chúng ở giai đoạn vườm ươm
2.3.3 Phương pháp theo dõi các chỉ tiêu
2.3.3.1 Xác định cường độ ánh sáng
2.3.3.2 Xác định các chỉ tiêu tái sinh
Thời gian ghi nhận số liệu cũng như các chỉ tiêu ghi nhận sẽ thay đổi tùy vào từng đối tượng, loại mẫu và giai đoạn tái sinh khác nhau
2.3.3.3 Xác định các chỉ tiêu sinh trưởng
Thời gian ghi nhận số liệu cũng như các chỉ tiêu ghi nhận sẽ thay đổi tùy vào từng đối tượng, loại mẫu và giai đoạn tái sinh khác nhau
2.3.3.4 Một số công thức tính được tiến hành khi thu nhận số liệu
Tốc độ sinh trưởng tương đối (RGR) và tốc độ tích lũy thuần được tính bằng công thức theo phương pháp của Hunt, 2002 [54]:
Trang 12RGR (mg/mg/tuần) =Ln(W2) − Ln(W1)
T2 − T1 NAR (mg/cm 2 /ngày) =W2 − W1
(T2 − T1)𝑥
Ln(L2) − Ln(L1) (L2 − L1)
Hiệu quả chuyển đổi năng lượng (Energy efficiency - EE) theo phương pháp của Liu và cộng sự (2011) [83]:
EE (mg/W) =W2 − W1
P/n
2.3.3.5 Phương pháp sắc ký lớp mỏng
2.3.3.6 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC: High
Performance Liquid Chromatography)
2.3.4 Phương pháp xử lý thống kê
Trung bình các chỉ tiêu theo dõi của mỗi lần lặp lại giữa các nghiệm thức thí nghiệm được xử lý bằng phương pháp phân tích phương sai (ANOVA), sau đó so sánh với phép thử Ducan ở mức tin cậy P ≤ 0,05 [37] bằng phần mềm SAS 9.1 Tùy thuộc vào dạng số liệu có thể được chuyển sang dạng (x + 0,5)0,5 hoặc arcsin (x)0,5 để xử
lý thống kê [29] Đường bình độ được vẽ bằng phần mềm Surfer version 11.0.642 (Golden software, Inc) Phân tích tương quan trên phần mềm Microsoft excel 2013 Giá trị “r” thể hiện mức độ “chặt chẽ” của tương quan
2.4 Điều kiện nuôi cấy
2.5 Địa điểm và thời gian tiến hành thí nghiệm
CHƯƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.1 Ảnh hưởng của các điều kiện chiếu sáng khác nhau lên sự tái sinh chồi và sinh trưởng của cây hoa cúc
3.1.1 Ảnh hưởng của các điều kiện chiếu sáng khác nhau lên sự tái
sinh chồi từ mẫu lá cúc
Dưới điều kiện 100R, cho số mẫu tái sinh và số chồi cúc hình thành
là cao nhất, tuy nhiên, dưới tỷ lệ 70R:30B lại cho chiều cao trung bình chồi tốt nhất (1,51 cm) với 81,35% chồi cao hơn 1 cm (Bảng 3.1)
Trang 13Bảng 3.1 Ảnh hưởng của các điều kiện chiếu sáng khác nhau lên sự tái sinh chồi từ mẫu lá cúc
Chú thích: **: những chữ cái khác nhau (a, b, c…) được nêu trong các cột biểu diễn sự khác
nhau có ý nghĩa với P ≤ 0,05 trong Duncan’s test (1), (2): lần lượt là các giá trị đã được biến đổi dưới dạng (x+0,5) 0,5 và arcsin (x) 0,5 để xử lý thống kê, các giá trị trên bảng là giá trị trung bình gốc
3.1.2 Ảnh hưởng của các điều kiện chiếu sáng khác nhau lên sự tái
sinh chồi từ lớp mỏng thân cúc
Dưới điều kiện 70R:30B, các chỉ tiêu so sánh như tỷ lệ mẫu tái sinh chồi (50,60%), số chồi/mẫu (5,24 chồi), chiều cao trung bình của chồi (0,96 cm) cũng như tỷ lệ chồi lớn hơn 1 cm (44,20%) đều cao hơn so với các điều kiện chiếu sáng khác (Bảng 3.2)
Bảng 3.2 Ảnh hưởng của các điều kiện chiếu sáng khác nhau lên sự tái sinh chồi từ lớp mỏng
thân cúc in vitro
Chú thích: **: những chữ cái khác nhau (a, b, c…) được nêu trong các cột biểu diễn sự khác
nhau có ý nghĩa với P ≤ 0,05 trong Duncan’s test (1), (2): lần lượt là các giá trị đã được biến đổi dưới dạng (x+0,5) 0,5 và arcsin (x) 0,5 để xử lý thống kê, các giá trị trên bảng là giá trị trung bình gốc
Trang 143.1.3 Ảnh hưởng của các điều kiện chiếu sáng khác nhau lên sự
sinh trưởng của cây cúc in vitro và sự sinh trưởng tiếp theo ở giai đoạn vườn ươm
Bảng 3.3 Ảnh hưởng của các điều kiện chiếu sáng khác nhau lên sự sinh trưởng của cây cúc
nuôi cấy in vitro
Chú thích: **: những chữ cái khác nhau (a, b, c…) được nêu trong các cột biểu diễn sự khác
nhau có ý nghĩa với P ≤ 0,05 trong Duncan’s test KLT: khối lượng tươi; KLK: khối lượng khô; SR: số rễ; CDR: chiều dài rễ; CC: chiều cao; DTL: diện tích lá; CDĐ: chiều dài đốt; RGR: tốc
độ sinh trưởng (mg/mg/tuần); NAR: tốc độ tích lũy (mg/cm 2 /ngày); (1) các giá trị đã được biến đổi dưới dạng (x+0,5) 0,5 để xử lý thống kê, các giá trị trên bảng là giá trị trung bình gốc
Dưới tỷ lệ 70R:30B, cây cúc sinh trưởng mạnh với khối lượng tươi (1,14 g/cây), khối lượng khô (94,83 mg/cây) và diện tích lá 3,52 cm2
cao hơn so với các mẫu cây sinh trưởng dưới các tỷ lệ LED khác và dưới ánh sáng huỳnh quang (Bảng 3.3) Sau 4 tuần tiếp tục sinh trưởng
ở điều kiện vườn ươm, các cây cúc được nuôi cấy dưới ánh sáng LED đều sinh trưởng tốt hơn so với đối chứng Đặc biệt, cây cúc ở điều kiện 70R:30B Như vậy, tỷ lệ 100R thích hợp cho giai đoạn đầu của quá trình tái sinh chồi từ mẫu lá, nhưng để chồi sinh trưởng tốt hơn thì mẫu cấy nên được chuyển vào điều kiện 70R:30B, và điều kiện này cũng
phù hợp cho các giai đoạn sinh trưởng cây hoa cúc in vitro và ex vitro
3.2 Ảnh hưởng của các điều kiện chiếu sáng khác nhau lên sự tái sinh chồi và sinh trưởng của cây dâu tây
3.2.1 Ảnh hưởng của các điều kiện chiếu sáng khác nhau lên sự tái
sinh chồi từ mẫu lá dâu tây
Sau 8 tuần nuôi cấy, các số liệu về sự tái sinh được ghi nhận trong bảng 3.6 kết quả cho thấy, sự hình thành chồi có thể được thực hiện