3.3.2.1. Kết quả kiểm tra tạp nhiễm viêm gan vịt
Kiểm tra tạp nhiễm viêm gan vịt bằng sản phản ứng RT-PCR được điện di trên thạch agarose 1% để kiểm tra. Kết quả chạy điện di được thể hiện trên hình 3.3.
Hình 3.3: Kết quả RT-PCR phát hiện tạp nhiễm virus viêm gan vịt
M: Chỉ thị phân tử DNA
Giếng 1: Chủng virus viêm gan vịt nhược độc DH-EG-2000.
Giếng 2: Hỗn dịch kháng nguyên virus dịch tả vịt nhược độc DP-EG-2000. Hình 3.3 cho thấy kết quả kiểm tra RT-PCR ở giếng 2 âm tính không xuất hiện băng sáng giống như đối chứng dương giếng 1 có chứa chủng virus viêm gan vịt nhược độc DH-EG-2000. Như vậy có thể khẳng định rằng hỗn dịch kháng nguyên virus dịch tả vịt nhược độc DP-EG-2000 không tạp nhiễm virus viêm gan vịt.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 49
3.3.2.2. Kết quả kiểm tra tạp nhiễm những virus có khả năng gây ngưng kết hồng cầu
Để kiểm tra thuần khiết của hỗn dịch kháng nguyên với virus có khả năng ngưng kết hồng cầu chúng tôi tiến hành phản ứng HA. Sau khi pha loãng theo quy trình mỗi giếng chứa 50 µl hỗn dịch virus và có hiệu giá lần lượt là 1/2, 1/4,... 1/1024, nhỏ 50 µl hồng cầu 1% vào từng giếng. Lắc đều, để tấm nhựa ở
nhiệt độ phòng sau 20 phút ta được bảng kết quả sau.
Bảng 3.6: Kết quả kiểm tra phản ứng ngưng kết hồng cầu HA Hiệu giá virus Lô hỗn dịch virus 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024 Kết quả I - - - - - - - - - - Âm tính II - - - - - - - - - - Âm tính III - - - - - - - - - - Âm tính
Qua bảng 3.6 thấy hỗn dịch kháng nguyên virus dịch tả vịt nhược độc DP-EG-2000 ở cả 3 lô xét nghiệm đều âm tính với phản ứng HA chứng tỏ
chúng không bị tạp nhiễm virus có khả năng gây ngưng kết hồng cầu ví dụ như: virus Newcastle và virus cúm gia cầm.
Như vậy, có thể kết luận được rằng: hỗn dịch kháng nguyên virus dịch tả
vịt nhược độc DP-EG-2000 hoàn toàn đạt yêu cầu về mức độ thuần khiết của một vacxin virus.