virus dịch tả vịt nhược độc DP-EG-2000.
Chuẩn bị trứng: Như phần 2.3.1.
Tiến hành: Thí nghiệm được tiến hành 3 lần, mỗi lần pha giống virus với nước sinh lý thành 8 độ pha loãng từ 10-1đến 10-8. Mỗi độ pha loãng tiêm cho 5 phôi, mỗi phôi tiêm 0,2 ml.
Sau khi tiêm, theo dõi phôi ở các thời điểm từ 24 giờđến 96 giờ. Xác định tổng số phôi chết và tổng số phôi sống ở từng độ pha loãng. Tính tỷ lệ phôi chết theo công thức:
Tỷ lệ phôi chết (%) = Tổng số phôi chTổng sết + Tố phôi chổng sếốt phôi sống × 100 Áp dụng công thức tính ELD50 của Reed Muench
Lg ELD50 = lgA + X lgf Trong đó:
X = A’ - B’ 50 - A’
X: Khoảng cách cân đối
A: Độ pha loãng virus gây chết cận trên 50% A’: Tỷ lệ % phôi chết cận trên 50%
B’: Tỷ lệ phôi chết cận dưới 50% f: Bậc pha loãng của virus
2.3.3. Phương pháp xác định chỉ số EID50 (liều gây nhiễm 50% phôi) của chủng virus dịch tả vịt nhược độc DP-EG-2000. chủng virus dịch tả vịt nhược độc DP-EG-2000.
Chuẩn bị trứng: Như phần 2.3.1.
Tiến hành: Thí nghiệm được tiến hành lần, mỗi lần pha giống virus vacxin với nước sinh lý thành 8 độ pha loãng từ 10-1 đến 10-8. Mỗi độ pha loãng tiêm cho 5 phôi, mỗi phôi tiêm 0,2 ml. Sau khi tiêm, theo dõi phôi ở các thời điểm từ
24 giờ đến 96 giờ đối với trứng gà và từ 1-6 ngày đối với trứng vịt. Kiểm tra và cho những thai chết vào tủ lạnh 40C trong 24 giờ. Sau 96 giờ cho toàn bộ trứng
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 31 vào tủ lạnh 40C trong 24 giờ. Mổ trứng, gắp phôi ra đĩa lồng và kiểm tra bệnh tích của phôi (kể cả phôi sống sau 96 giờ. Xác định tổng số phôi có bệnh tích (phôi nhiễm) và tổng số phôi không có bệnh tích (phôi không nhiễm) ở từng nồng độ.
Tính tỷ lệ phôi nhiễm theo công thức: Tỷ lệ phôi nhiễm (%) = ×100
Tính EID50 theo công thức của Reed Muench (tươmg tự như công thức tính ELD50).