Phương pháp xác định khả năng thích ứng và ổn định của chủng virus d ịch tả vịt nhược độc DP-EG-2000 trên phôi gà.

Một phần của tài liệu Nghiên cứu biện pháp bảo tồn quỹ gen virus dịch tả vịt nhược độc DP - EG - 2000 dạng tươi ở -86c (Trang 39)

- Chuẩn bị trứng: Trứng gà có phôi 9 ngày tuổi, soi trứng, chọn những phôi khoẻ mạnh, đánh dấu buồng hơi, đánh dấu vị trí đầu phôi, sát trùng bằng cồn 700 xung quanh vỏ trứng, sát trùng vị trí buồng hơi bằng cồn Iod 5%.

- Chuẩn bị giống virus: Giống virus khi dùng đem pha với nước muối sinh lý 0,9% thành huyễn dịch 10-2.

- Bố trí thí nghiệm: Mỗi lần cấy truyền dùng 30 phôi, virus được tiêm vào xoang niệu mô, mỗi phôi được tiêm 0,2 ml. Trong mỗi lần cấy truyền sử dụng 5 phôi làm đối chứng, không tiêm virus.

- Tiến hành: Sau khi sát trùng vỏ trứng, dùng dùi đục vô trùng đục 1 lỗ

trên đỉnh buồng hơi; sử dụng seringer 1 ml để tiêm. Khi tiêm đưa kim qua lỗđã dùi chếch một góc 450 sâu 1,5-2 cm, đầu kim hướng về phía đầu phôi, rồi bơm 0,2 ml giống virus vacxin đã pha. Lấy paraphin gắn kín lỗ tiêm lại, để trứng nằm trên khay trứng và cho vào tủấm 370C ấp tiếp. Đối với trứng gà sau các khoảng thời gian 24 giờ, 48 giờ, 72 giờ, 96 giờ kiểm tra xem thai trứng còn sống hay chết. Nếu thai chết, cho vào tủ lạnh 40C trong 12 giờ để mạch máu co nhỏ lại tránh xuất huyết, rồi mổ trứng, thu nước trứng và kiểm tra bệnh tích của phôi. Những phôi làm đối chứng không tiêm virus và cũng cho vào tủấm ấp. Theo dõi cùng với phôi thí nghiệm ở các khoảng thời gian từ 24 giờđến 96 đối với trứng gà rồi đánh giá kết quả.

Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 30

Một phần của tài liệu Nghiên cứu biện pháp bảo tồn quỹ gen virus dịch tả vịt nhược độc DP - EG - 2000 dạng tươi ở -86c (Trang 39)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(76 trang)