3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
3.3.1. Định tính Quế chi
Điều kiện sắc kí
Pha tĩnh: Bản mỏngSilica gel GF254, hoạt hóa ở 110 0C trong 60 phút. Pha động: n-Hexan : cloroform : ethyl acetat (4 : 1 : 1)
Thể tích mẫu: 4µl/mẫu.
Phát hiện: Soi đèn UV ở bước sóng 254 nm. Soi đèn UV 366 nm.
Phun dung dịch 2,4-dinitrophenyl hydrazin.
Dung dịch thử
33
MNC cho vào bình nón 100 ml, thêm 30 ml nước cất, đun sôi cách thủy 15 phút, để nguội, lọc thu dịch lọc. Chuyển dịch lọc vào bình gạn 100 ml, chiết với ether ethylic 3 lần, mỗi lần 15 ml, tập trung dịch chiết ether ethylic, bốc hơi dịch chiết trên cách thủy đến cắn. Hòa tan cắn trong 2ml ether ethylic được dung dịch chấm sắc kí.
Dung dịch đối chiếu
Lấy khoảng 4 g dược liệu Quế chi cắt nhỏ, cho vào bình nón 100 ml, thêm 30 ml nước cất, đun sôi cách thủy 15 phút, để nguội, lọc thu dịch lọc. Chuyển dịch lọc vào bình gạn 100 ml, chiết với ether ethylic 3 lần, mỗi lần 15 ml, tập trung dịch chiết ether ethylic, bốc hơi dịch chiết trên cách thủy đến cắn. Hòa tan cắn trong 2ml ether ethylic được dung dịch chấm sắc kí.
Triển khai sắc ký
Chấm riêng biệt lên bản mỏng 4 µl dung dịch đối chiếu và 4 µl dung dịch thử. Tiến hành sắc ký theo Dược điển Việt Nam IV - Phụ lục 5.4. Sau khi triển khai sắc ký, lấy bản mỏng ra để khô ở nhiệt độ phòng. Soi đèn UV ở bước sóng 254 nm và 366 nm, phun dung dịch 2,4-dinitrophenyl hydrazin.
Kết quả
- Hệ dung môi cho kết quả hiện vết và tách tốt.
- Quan sát dưới đèn UV ở 254 nm, 366 nm: sắc ký đồ của dung dịch thử cho vết có cùng màu sắc và giá trị Rf tương đương với các vết trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu. Kết quảđược trình bày trong hình 3.01 và bảng 3.05 - Phun dung dịch 2,4-dinitrophenyl hydrazin (thuốc thửđặc trưng của aldehyd
cinnamic trong tinh dầu quế) không phát hiện vết trên sắc ký đồ của dung dịch thử.
34 A B Hình 3.01: Sắc kí đồđịnh tính Quế chi A - 254 nm B - 366nm Bảng 3.05: Kết quả SKLM định tính Quế chi ở bước sóng 254 nm Mẫu thử nghiệm Vết Rf * =
Rf x 100 Màu sắc Cao chiết nước Cao chiết ethanol 60% Quế chi 1 6 Đen ++ ++ ++ 2 23 Đen - + ++ 3 37 Đen +++ +++ +++ 4 48 Đen + + 5 52 Đen - - +++ 6 59 Đen - + - 7 62 Đen + - - 8 74 Đen + - -
Khi quan sát ở bước sóng 254 nm cho kết quả hiện vết và tách vết tốt nhất. - Cao chiết nước có 5 vết, cao chiết ethanol 60 % có 5 vết và Quế chi có 4 vết,
35
- Cao chiết nước và cao chiết ethanol 60 % có 2 vết tương đương với Quế chi (màu đen, Rf* = 6, 37).
- Cao chiết ethanol 60 % có thêm 1 vết tương đương với Quế chi (màu đen, Rf* = 23).
- Cao chiết nước có thêm 1 vết tương đương với cao chiết ethanol 60 % (màu
đen, Rf* = 48).