Một số tác giả trong nước đã sử dụng các nồng độ và tổ hợp khác nhau của các Cytokinin để nghiên cứu quá trình kéo dài chồi của các giống mía (Đỗ Năng Vịnh và cs, 1995; Hà Thị Thúy và cs, 1999, 2000, 2001) BAP là chất điển hình của nhóm Cytokinin có tác dụng mạnh mẽ lên quá trình tạo chồi và kéo dài chồi. BAP là thành phần không thể thiếu trong môi trường kéo dài chồi không những của mía mà còn của các giống lúa, ngô … Khi quá trình hình thành chồi kết thúc thì ta tiến hành cấy chuyển chồi sang môi trường có bổ sung BAP để kéo dài chồi của giống mía BR2, BR7515 và QĐ 93-159.
Bảng 4.6: Ảnh hưởng BAP ở các nồng độ khác nhau lên quá trình nhân nhanh chồi của của giống mía Br2 và Br7515 sau 4 tuần nuôi cấy
Chú giải:
(- )Chồi gầy, xanh nhạt( +) Chồi gầy, xanh (+) Chồi mập, xanh đậm
CT Nồng độ BAP (mg/l) Số mẫu cấy
Sau 4 tuần nuôi cấy Br2
Sau 4 tuần nuôi
cấy Br7515 Chất lượng chồi Số chồi thu được Hệ số nhân Số chồi thu được Hệ số nhân CT1 0,0 150 150 1,0 165 1,1 - CT2 0,1 150 165 1,1 195 1,3 + CT3 0,2 150 389 2,6 405 2,7 ++ CT4 0,3 150 525 3,5 570 3,8 ++ CT5 0,4 150 601 4,0 645 4,3 ++ CT6 0,5 150 720 4,8 750 5,0 + CT7 1,0 150 345 2,3 375 2,5 + CV (%) 4,7 4,8 LSD0, 5 0,229 0,25
Bảng4.7: Ảnh hưởng BAP ở các nồng độ khác nhau lên quá trình nhân nhanh chồi của của giống mía QĐ93-159
CT Nồng độ
BAP (mg/l) Số mẫu cấy
Sau 4 tuần nuôi cấy QĐ 93-159 Ghi chú Số chồi thu được Hệ số nhân CT1 0, 0 150 150 1,0 - CT2 0, 1 150 165 1,1 + CT3 0, 2 150 345 2,3 ++ CT4 0, 3 150 555 3,7 ++ CT5 0, 4 150 736 4,9 ++ CT6 0, 5 150 602 4,0 + CT7 1, 0 150 330 2,2 + CV (%) 5,3 LSD0,5 0,26 Chú giải:
(- )Chồi gầy, xanh nhạt( +) Chồi gầy, xanh (+) Chồi mập, xanh đậm
Hình 4.8 Biểu đồ thể hiện ảnh hưởng của BAP ở các nồng độ khác nhau lên quá trình nhân nhanh chồi của ba giống mía BR2, QĐ 93-159 và BR7515
Với giá trị LSD05 đạt 0,229 các công thức thí nghiệm có sự sai khác nhau có ý nghĩa ở mức độ tin cậy 95%. Trong đó nồng độ BAP 0,5mg/l (CT6) cho hệ số
nhân chồi cao nhất đạt 4,8 chồi/mẫu chất lượng Chồi mập, xanh đậm. Kế tiếp là công thức 5 bổ sung BAP 0,4mg/l đạt hệ số nhân 4,0 chồi/mẫu. Tiếp theo là công thức 4 bổ sung BAP 0,3 mg/l đạt hế số nhân 3,5 chồi/mẫu. Thấp hơn là công thức 3 bổ sung BAP 0,2mg/l hệ số nhân đạt 2,6 chồi/mẫu. Kế tiếp là công thức 7 bổ sung BAP 1,0mg/l cho hệ số nhân đại 2,3 chồi/mẫu. Thấp nhất là 2 công thức CT1 (Đ/C) và CT2 bổ sung BAP 1mg/l cho hệ số nhân 1,0 và 1,1 chồi/mẫu.
Với giá trị LSD05 đạt 0,248 các công thức thí nghiệm có sự sai khác nhau có ý nghĩa ở mức độ tin cậy 95%. Trong đó nồng độ BAP 0,5mg/l (CT6) cho hệ số
nhân chồi cao nhất đạt 5,0 chồi/mẫu chất lượng Chồi mập, xanh đậm. Kế tiếp là công thức 5 bổ sung BAP 0,4mg/l đạt hệ số nhân 4,3 chồi/mẫu. Tiếp theo là công thức 4 bổ sung BAP 0,3 mg/l đạt hế số nhân 3,8 chồi/mẫu. Thấp hơn là công thức 3 bổ sung BAP 0,2mg/l hệ số nhân đạt 2,7 chồi/mẫu và công thức 7 bổ sung BAP 1,0mg/l cho hệ số nhân đại 2,5 chồi/mẫu. Thấp nhất là 2 công thức CT1 (Đ/C) và CT2 bổ sung BAP 1mg/l cho hệ số nhân 1,0 và 1,1 chồi/mẫu.
Từ bảng 4.7 cho thấy với giá trị LSD05 đạt 0,256 các công thức thí nghiệm có sự sai khác nhau có ý nghĩa ở mức độ tin cậy 95%. Trong đó nồng độ BAP 0,4mg/l (CT5) cho hệ số nhân chồi cao nhất đạt 4,9 chồi/mẫu chất lượng Chồi mập, xanh
đậm. Kế tiếp là công thức 6 bổ sung BAP 0,5mg/l đạt hệ số nhân 4,0 chồi/mẫu. Tiếp theo là công thức 4 bổ sung BAP 0,3 mg/l đạt hế số nhân 3,7 chồi/mẫu. Thấp hơn là công thức 3 bổ sung BAP 0,2mg/l hệ số nhân đạt 2,3 chồi/mẫu và công thức 7 bổ
sung BAP 1,0mg/l cho hệ số nhân đại 2,2 chồi/mẫu. Thấp nhất là 2 công thức CT1 (Đ/C) và CT2 bổ sung BAP 1mg/l cho hệ số nhân 1,0 và 1,1 chồi/mẫu.
Kết quả được giải thích như sau: BA là chất kích thích sinh trưởng khi sử
dụng nồng độ thích hợp tuy nhiên nếu sử dụng hàm lượng cao quá dẫn đến ức chế
quá trình sinh trưởng của mẫu – gây độc cho mẫu. Hệ số nhân chồi ở cả 3 giống không có thay đổi khi bổ sung BAP 0,1mg/l với nồng độ thấp BAP chưa có ảnh hưởng đến quá trình nhân chồi. Khi tăng nồng độ BAP từ 0,1-0,5mg/l thì hệ số nhân chồi cũng tăng lên ở cả 3 giống do ở nồng độ này nó kích thích sự hình thành chồi
nách, ngăn chặn sự già hóa. Tuy nhiên tăng BAP lên 1mg/l hệ số nhân chồi giảm do cản trở quá trình trao đổi chất của tế bào làm giảm sự hình thành chồi.
Vậy nồng độ BAP thích hợp nhất cần bổ sung vào môi trường nhân chồi là 0,5 mg/l MT cho hệ số nhân bằng 4,8 chồi/mẫu ở giống BR2 và 5,0 chồi/mẫu ở
giống BR7515. Tuy nhiên ở giống QĐ 93-159 chỉ cần 0,4 mg/lMT BAP đã cho hệ
số nhân cao nhất 4,9 chồi/mẫu.
Hình 4.9 Ảnh hưởng của BAP trong kéo dài chồi sau 4 tuần nuôi cấy
4.3. Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ NAA đến quá trình hình thành rễ bất định của các giống mía Br2, Br7515 và QĐ 93-159 tạo cây hoàn chỉnh