3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài
3.2.So sánh phẩm chất tinh dịch của ngựa bạch Việt Nam và ngựa bạch
Tây Tạng - Trung Quốc nuôi tại Thái Nguyên
Tinh dịch ngựa sau khi khai thác được đánh giá thông qua một số các chỉ tiêu sinh học: lượng xuất tinh (V), hoạt lực (A), nồng độ (C), tổng số tinh trùng tiến thẳng (VAC), áp suất thẩm thấu (ASTT)….Chúng tôi tiến hành đánh giá tinh dịch ngựa bach Việt Nam và Trung Quốc được khai thác ở các mùa vụ khác nhau. Kết quả đánh giá chất lượng tinh dịch ngựa bạch Việt Nam qua các mùa khác nhau thể hiện ở bảng 3.4.
Bảng 3.4: Kết quả đánh giá phẩm chất tinh dịch ngựa bạch Việt Nam ở các mùa vụ khai thác khác nhau
Chỉ tiêu ĐVT
Vụ xuân Vụ hè thu Vụ đông
n X SE n X SE n X SE V ml 5 39,20b0,75 5 41,30a0,70 5 37,50c0,89 Keo phèn ml 5 8,00a0,16 5 7,40a0,19 5 7,70a0,25 A % 5 71,00b1,87 5 74,00a1,00 5 68,80c1,07 C triệu/ml 5 170,60a8,01 5 171,00a5,74 5 169,20a6,06 VAC tỷ/lần 5 4,77b0,36 5 5,23a0,23 5 4,36b0,16 K % 5 13,74a0,24 5 13,44a0,28 5 14,40a0,26 R 5 3548a 44,99 5 3530a37,42 5 3462a44,09 pH 5 7,06a0,04 5 7,08a0,05 5 7,10a0,06 ASTT mOsm/kg 5 289a,603,54 5 284,60a5,45 5 284,00a2,43
Mầu tinh nguyên Trắng sữa Trắng sữa Trắng sữa
Các giá trị TB trong cùng một hàng có chỉ số trên bằng chữ khác nhau thì sai khác có ý nghĩa thống kê (P<0,05)
Kết quả đánh giá phẩm chất tinh dịch ngựa bạch Tây Tạng khai thác ở các mùa vụ được thể hiện ở bảng 3.5.
Bảng 3.5: Kết quả đánh giá phẩm chất tinh dịch ngựa bạch Tây Tạng ở các mùa vụ khai thác khác nhau
Chỉ tiêu ĐVT
Vụ xuân Vụ hè thu Vụ đông
n X SE n X SE n X SE V ml 5 42,50b1,13 5 44,50a0,96 5 38,80c1,59 Keo phèn ml 5 8,10a0,10 5 8,10a0,33 5 7,90a0,24 A % 5 69,00b1,87 5 72,00a1,22 5 68,00b1,22 C triệu/ml 5 167,40a7,44 5 168,40a7,88 5 169,40a6,77 VAC tỷ/lần 5 4,94b0,39 5 5,38a0,23 5 4,476b0,26 K % 5 13,58a0,09 5 13,58a0,11 5 13,84a0,14 R 5 3480a48,99 5 3540a24,49 5 3440a67,82 pH 5 7,10a0,04 5 7,06a0,04 5 7,02a0,02 ASTT mOsm/kg 5 285,80a3,62 5 286,50a4,01 5 281,80a2,08
Mầu tinh nguyên Trắng sữa Trắng sữa Trắng sữa
Các giá trị TB trong cùng một hàng có chỉ số trên bằng chữ khác nhau thì sai khác có ý nghĩa thống kê (P<0,05)
Kết quả so sánh, đánh giá chất lượng tinh dịch ngựa bạch Việt Nam và ngựa bạch Tây Tạng Trung Quốc qua các mùa khác nhau thể hiện ở bảng 3.6 và biểu đồ 3.3.
Bảng 3.6: Bảng tổng hợp so sánh phẩm chất tinh dịch ngựa bạch Việt Nam và Tây Tạng ở các mùa vụ khai thác khác nhau
Số TT Chỉ tiêu ĐVT n (lần/mùa) Vụ đông Vụ xuân Vụ hè Ngựa bạch Việt Nam Ngựa bạch Trung Quốc Ngựa bạch Việt Nam Ngựa bạch Trung Quốc Ngựa bạch Việt Nam Ngựa bạch Trung Quốc 1 V ml 15 37,50d0,89 38,80d1,59 39,20d0,75 42,50b1,13 41,30c0,70 44,50a0,96 2 Keo phèn ml 15 7,70a0,25 7,90a0,24 8,00a0,16 8,10a0,10 7,40a0,19 8,10a0,33 3 A % 15 68,80c1,07 68,00c1,22 71,00b1,87 69,00c1,87 74,00a1,00 72,00b1,22 4 C triệu/ml 15 169,20a6,06 169,40a6,77 170,60a8,01 167,40a7,44 171,00a5,74 168,40a7,88 5 VAC tỷ/lần 15 4,36c0,16 4,476c0,26 4,77c0,36 4,94c0,39 5,23b0,23 5,38a0,23 6 K % 15 14,40a0,26 13,84a0,14 13,74a0,24 13,58a0,09 13,44a0,28 13,58a0,11 7 R 15 3462a44,09 3440a67,82 3548a44,99 3480a48,99 3530a37,42 3540a24,49 8 pH 15 7,10a0,06 7,02a0,02 7,06a0,04 7,10a0,04 7,08a0,05 7,06a0,04 9 ASTT mOsm/kg 15 284,00a2,43 281,80a2,08 289a,603,54 285,80a3,62 284,60a5,45 286,50a4,01
10 Mầu tinh nguyên 15 Trắng sữa Trắng sữa Trắng sữa Trắng sữa Trắng sữa Trắng sữa
37,5 38,8 39,2 42,5 44,5 41,3 34,0 36,0 38,0 40,0 42,0 44,0 46,0
Ngựa bạch Việt Nam Ngựa bạch Trung Quốc
Thể tích tinh dịch (ml)
Vụ đông Vụ Xuân Vụ hè
Biểu đồ 3.3: Thể tích tinh dịch ngựa bạch Việt Nam và ngựa bạch Tây Tạng Trung Quốc ở 3 vụ khai thác
Kết quả bảng 3.6 và biểu đồ 3.3 cho thấy, thể tích tinh dịch của ngựa bạch Việt Nam và ngựa bạch Tây Tạng Trung Quốc có sự sai khác nhau. Trong cùng mùa, thể tích tinh dịch ngựa bạch Trung Quốc (38,8 - 44,5 ml) cao hơn hẳn ngựa bạch Việt Nam (37,5 - 41,3 ml). So sánh giữa mùa xuân, mùa hè và mùa đông, thể tích tinh dịch ngựa thay đổi theo mùa rõ rệt, trong đó mùa hè có thể tích cao nhất (ngựa bạch Việt Nam đạt 41,3ml; ngựa bạch Trung Quốc đạt 44,5ml). Hoạt lực tinh trùng (A) ngựa bạch Việt Nam cao hơn ngựa bạch Trung Quốc ở mùa hè và mùa xuân (lần lượt là 71% và 68%; 74% và 69%). Theo Janett (2003) [52], hoạt lực tinh trùng ngay sau khai thác thay đổi theo mùa; thấp nhất về mùa đông, sau đó đến mùa xuân và cao nhất là mùa hè, chỉ tiêu này tương ứng với các mùa là 68,4; 70,0 và 73,0%. Tuy nhiên chỉ số này không có sự sai khác giữa 2 giống ở mùa đông. Tổng số tinh trùng tiến thẳng (VAC) ở ngựa Việt Nam thấp hơn so với ngựa Trung Quốc ở mùa hè (lần lượt là 5,23 tỷ/lần và 5,38 tỷ/lần), mùa đông và mùa xuân chỉ số này không sai khác nhau giữa 2 giống. Cả 2 chỉ số trên đều cao hơn ở mùa hè ở cả 2 giống. Các chỉ số khác như keo phèn, C, K, R, màu tinh đều không có sự sai khác giữa 2 giống và các mùa khác nhau.
Theo Packett và Back (1973), Rossdale và Rickett (1980), độ pH tinh dịch ngựa dao động từ 7,35-7,7. Theo Packett, (1976; 1989), ASTT của ngựa dao động 290 - 310. Nếu ASTT < 200 mOsm/kg và ASTT > 310 mOsm/kg đều là những chỉ số ASTT bất thường sẽ ảnh hưởng đến hình thái và chức năng của tinh trùng. Dowsett và Pattie (1987) nghiên cứu cho thấy: Tỷ lệ keo phèn phụ thuộc vào từng giống ngựa khác nhau như: Lượng keo phèn thấp nhất là ở ngựa Arap (2,68%), cao nhất là ở ngựa Shetland (22,78%). Lượng keo phèn tập trung vẫn ở tỷ lệ từ 7,9%-14% trên các giống ngựa: Appaloosa, Standardbred, Quarterhorse, Palomino... (Davies Morel, 1999) [46].
Thể tích tinh dịch giữa các mùa có sự sai khác: Mùa hè lượng tinh dịch thu được cao hơn mùa thu, đông. Điều này có thể do ảnh hưởng của thời tiết khí hậu và đặc biệt là có thể ảnh hưởng của mùa vụ sinh sản (ở ngựa mùa vụ động dục cũng là mùa sinh đẻ của ngựa cái từ tháng 3 đến hết tháng 6 trong năm).
Theo Jenett (2003) [52], thể tích tinh dịch ngựa Warmblood thay đổi theo mùa, cao nhất là mùa hạ (41,2ml), thấp nhất là mùa đông (33,9ml), mùa xuân và mùa thu cho kết quả như nhau (36,3-36,8ml). Hoạt lực dao động từ 70,2-75,9% (thấp nhất mùa đông và cao nhất về mùa hạ). Theo Nguyễn Hữu Trà (2005) [25], lượng xuất tinh của ngựa Việt Nam là 40,50ml. Theo Brinsko S. P (2000) [38], lượng xuất tinh ngựa giao động từ 40 - 100ml/lần và nồng độ tinh trùng là 191 triệu/ml. Theo Dowsett và Pattie (1987); Pickett và Shiner (1994), chỉ tiêu này còn phụ thuộc vào lao tác và độ tuổi đực giống; ít nhất 24 giờ sau lao tác con vật mới được đưa vào khai thác. Thể tích tinh dịch của ngựa dao động 30 -250ml, trung bình 100ml. Trong đó 20 -40ml là keo phèn, 60 - 80ml là tinh nguyên (Dowsett và Pattie, 1982; Pickett, 1988; Fayrer Hosken và Caudle, 1989 và Rickett, 1993 - theo Davies Morel, 1999 [46]). Độ tuổi sử dụng từ 4-16 năm tuổi.
Ngoài ra thể tích tinh dịch còn phụ thuộc nhiều vào quãng thời gian dài hay ngắn gây kích thích đực giống trước khi khai thác (mùi tiết ra từ hocmon
ngựa cái) (Ionata, 1991). Như vậy, các tác giả đều kết luận mùa vụ có ảnh hưởng rõ rệt đến thể tích và chất lượng tinh trùng, và cao nhất vào mùa hè và thấp nhất vào mùa đông. Nghiên cứu của chúng tôi cũng cho kết quả tương tự, tuy nhiên chỉ thấy khá rõ về thể tích và hoạt lực tinh trùng.
Kết quả khảo sát đánh giá phẩm chất tinh dịch ngựa bạch Việt Nam tại Thái Nguyên và Lào Cai được thể hiện ở bảng 3.7. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Bảng 3.7: Chỉ tiêu đánh giá phẩm chất tinh dịch ngựa bạch Việt Nam tại Thái Nguyên và Lào Cai
Chỉ tiêu ĐVT Huyện Phú Bình - Thái Nguyên Huyện Si Ma Cai - Lào Cai n X SE n X SE V ml 3 39,83a1,36 3 40,50a0,50 Keo phèn ml 3 8,33a0,17 3 7,67a0,33 A % 3 71,67a3,33 3 70,45a1,67 C triệu/ml 3 179,00a3,51 3 175,67a5,36 VAC tỷ/lần 3 5,11a0,28 3 5,09a0,08 K % 3 13,77a0,62 3 14,47a0,29 R 3 3592a 4,26 3 3590a 7,45 pH 3 7,13a0,07 3 7,10a0,10 ASTT mOsm/kg 3 282,67a2,33 3 287,33a1,45
Mầu tinh nguyên Trắng sữa Trắng sữa
Các giá trị TB trong cùng một hàng có chỉ số trên bằng chữ khác nhau thì sai khác có ý nghĩa thống kê (P<0,05)
Kết quả bảng 3.7 cho thấy: Thể tích tinh dịch của ngựa bạch Việt Nam tại Thái Nguyên và Lào Cai dao động từ 39,83ml đến 40,50ml. Tỷ lệ keo phèn của tinh dịch dao động từ 19 đến 21% (7,6-8,3ml/lần khai thác). Hoạt lực tinh trùng >70%, nồng độ tinh trùng 175 đến 179 triệu/ml. Các chỉ tiêu về tinh dịch ngựa bạch Việt Nam ở Thái Nguyên và Lào Cai không có sự sai khác nhau.
Trần Văn Thi (1985) [18], nghiên cứu phẩm chất tinh dịch ngựa đực lai 25% Cabardin cho biết, thể tích tinh dịch 59 ml/lần, hoạt lực tinh trùng 62%, nồng độ tinh trùng 120 triệu/ml. Theo Nguyễn Hữu Trà (2005) [25] lượng xuất tinh ngựa Cabardin là 70,82ml, ngựa nội là 40,50ml. Như vậy, khi so sánh kết quả cho thấy thể tích tinh dịch ngựa bạch Việt Nam thấp hơn so với ngựa Cabardin và tương đương ngựa nội, tuy nhiên nồng độ tinh trùng của ngựa bạch Việt Nam lại cao hơn. Từ dó có thể nhận xét thể tích tinh dịch có liên quan đến khối lượng cơ thể ngựa. Điều này phù hợp với kết luận của Pickett (1998) [57], chỉ tiêu tinh dịch của mỗi lần khai thác phụ thuộc vào giống, độ tuổi, lao tác và thời gian gây kích dục.
Brinsko (2000) [38], thông báo lượng xuất tinh ngựa giao động từ 40- 100ml và nồng độ tinh trùng là 191 triệu/ml. Trần Tiến Dũng (2002) [6] cho biết pH tinh dịch ngựa dao động 6,2 - 7,8, trung bình 7,3. Theo Hiroshi (1992) [51] pH tinh dịch ngựa dao động 6,9-7,7; pH trung bình 7,3. Kết quả nghiên cứu của chúng tôi về nồng độ tinh trùng và độ pH của tinh trùng là tương đương với kết quả của các tác giả trên.
3.3. Xác định thời điểm phối giống thích hợp trong chu kỳ động dục
3.3.1. Đánh giá kết quảgiải đông tinh cọng rạ
Chế độ giải đông là khâu quan trọng làm ″thức tỉnh″ khả năng hoạt động của tinh trùng. Một chế độ giải đông tốt nhất sẽ ″đánh thức″ được nhiều tinh trùng hoạt động trở lại với khả năng hoạt động với chức năng cao nhất.
Trước khi tiến hành các thị nghiệm truyền tinh nhân tạo ta tiến hành lấy ngẫu nhiên 05 cọng tinh để tiến hành giải đông và đánh giá chất lượng tinh cọng rạ. Chúng tôi tiến hành giải đông ở nhiệt độ 450C ở 5 giây, tiếp 370C trong 30 giây cho kết quả giải đông tinh cọng rạ trong thí nghiệm được thể hiện ở bảng 3.8.
Bảng 3.8: Kết quả giải đông tinh cọng rạ ngựa bạch Việt Nam(n=5) Chỉ tiêu ĐVT X SE V ml 0,5 A % 36 C triệu/ml 319,60 3,26 V.A.C triệu/cọng 57,871,22 K % 14,060,11
Kết quả giải đông cho thấy: Hoạt lực tinh trùng sau giải đông đạt 36%, nồng độ tinh trùng/ml 319 triệu con và tổng số tinh trùng tiến thẳng VAC là 57 triệu tinh trùng/cọng. Hoạt lực tinh trùng sau giải đông của tinh cọng rạ ngựa đạt yêu cầu.
Theo Boyle (1996) [36], tinh ngựa có hoạt lực sau giải đông >35% là đạt yêu cầu, 30-35% có thể chấp nhận được và hoạt lực <30% là kém.
Volkmann (1987) [65], nghiên cứu tinh ngựa sau giải đông có hoạt lực tinh trùng phải >30% có thể sử dụng trong thụ tinh nhân tạo.
Theo Kuisma và cs (2006) [54], nên sử dụng nhiệt độ và thời gian giải đông khác nhau đối với các kích cỡ dạng cọng rạ khác nhau; loại cọng rạ 0,5ml/cọng, nhiệt độ giải đông 370C ít nhất 30 giây; loại cọng rạ 2,5ml/cọng, nhiệt độ giải đông tương ứng với 500C khoảng 40 giây với tốc độ giải đông phải đạt ≥350C/giây. Trong lúc đó, Loomis (1983) [53], khuyến cáo loại cọng rạ 0,5ml/cọng, nên giải đông ở nhiệt độ 380C trong 30 giây. Cochran và cs (1984) [42], cho rằng: loại cọng rạ 0,5ml/cọng nên giải đông ở nhiệt độ 750C trong 7 giây, sau đó chuyển xuống 370C trong ít nhất 5 giây cho kết quả tốt hơn 370C trong 30 giây có hoạt lực tương ứng là 34% và 29%.
Theo Đào Đức Thà và cs (2007) [17], cho biết hoạt lực tinh trùng ngựa sau khi tan băng trung bình đạt 33,78%. Vũ Đình Ngoan (2013) [14], tinh cọng ngựa giải đông ở nhiệt độ 450C ở 5 giây, tiếp 370C trong 30 giây cho kết quả tốt nhất.
Qua kết quả các tác giả cho thấy hoạt lực tinh trùng ngựa bạch sau giải đông trong thí nghiệm đạt khá cao và đảm bảo chất lượng để sử dụng cho truyền tinh nhân tạo.
3.3.2. Đánh giá thời gian truyền tinh thích hợp trong chu kỳ động dục
Chọn lọc 15 ngựa cái tiêu chuẩn trong tổng đàn ngựa bạch tại Trung tâm nghiên cứu và phát triển chăn nuôi miền núi để đưa vào thí nghiệm. Qua số liệu theo dõi, ngựa cái được chọn từ đàn giống tốt khỏe mạnh, không mắc bệnh đường sinh dục và đã qua 1 lần lứa đẻ (Kết quả bảng 3.9).
Bảng 3.9: Kết quả chọn lọc ngựa cái đủ tiêu chuẩn thí nghiệm
TT Chỉ tiêu ĐVT
Kết quả
X SE
1 Số ngựa cái đưa vào phối con 15
2 Khối lượng trung bình kg 184,22,93
3 Cao vây cm 116,51,35
4 DTC cm 118,51,56
5 Vòng ngực cm 129,50,55
6 Tuổi năm 4,150,19 (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Số ngựa cái bạch trong thí nghiệm chúng tôi chọn lọc có khối lượng trung bình 184kg/con, độ tuổi >4 tuổi. Ngựa đã được tiêm phòng đầy đủ. Ngoại hình ngựa đạt tiêu chuẩn giống và sinh lý sinh sản bình thường. Điều đó khẳng định chất lượng ngựa đưa vào sử dụng làm thí nghiệm để TTNT thử nghiệm bằng tinh cọng rạ là đảm bảo.
Thực hiện thí nghiệm thụ tinh nhân tạo cho ngựa cái bằng phương pháp truyền tinh đơn ở 8h00 sáng vào các ngày thứ 5,6,7 của chu kỳ động dục và đánh giá kết quả truyền thai sau 25 ngày (kể từ ngày TTNT). Kết quả thể hiện ở bảng 3.10.
Bảng 3.10: Kết quả truyền tinh bằng phương pháp truyền tinh đơn ở các ngày động dục khác nhau TT Kết quả Chỉ tiêu ĐVT Ngày động dục thứ 5 Ngày động dục thứ 6 Ngày động dục thứ 7
1 Số lượt ngựa cái đưa vào theo dõi Con 5 5 5
2 Số ngựa cái truyền tinh Con 5 5 5
3 Số ngựa cái có chửa Con 1 3 2
4 Tỷ lệ thụ thai % 20,0 60,0 40,0
Kết quả bảng 3.10 cho thấy: Tỷ lệ thụ thai bằng phương pháp TTNT 1 lần vào 8h00 sáng vào các ngày 5,6,7 trong chu kỳ động dục cho kết quả tương ứng: 20%, 60%, 40%, trung bình 40,0%. Mặc dù số mẫu triển khai thí nghiệm không lớn để đủ phản ánh chính xác, nhưng qua bảng 3.11 ta thấy, thụ tinh nhân tạo cho ngựa vào ngày thứ 6 của chu kỳ động dục cao hơn so với các ngày thứ 5 và thứ 7 trong chu kỳ động dục.
Theo Wendy Conlon (2010) [66], thời gian động dục thường 5-7 ngày, thời gian rụng trứng kể từ khi động dục từ 24 - 48h. Tác giả cho biết thời gian thụ tinh đối với tinh cọng rạ thích hợp nhất là trước 6h và sau 6h rụng trứng.
Theo Christa (2014) [40], khi phát hiện ngựa có biểu hiện động dục thì sau 48 giờ trứng sẽ rụng và tỷ lệ thụ thai sẽ cao nếu truyền tinh cho ngựa vào thời điểm 6 giờ sau khi rụng trứng.
Tác giả Nguyễn Hữu Trà (1996) [23], cho biết khi theo dõi thời gian