Chƣơng 2 ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu
2.3.3 Phƣơng pháp định lƣợng bằng quang phổ đạo hàm tỷ đối
a) hu n dung i:
Sử dụng dung môi là dung dịch đệm phosphat pH 7,2 đƣợc pha theo Dƣợc điển Việt Nam IV nhƣ sau: hòa trộn 250 ml dung dịch kali dihydrophosphat 0,2 M với 175 ml dung dịch natri hydroxid 0,2 M và thêm nƣớc vừa đủ 1000 ml [3].
b) Chu n b dung d ch chu n và dung d ch thử
Dung dịch chuẩn PAR: cân chính xác 500 mg PAR nguyên liệu, pha với dung dịch đệm phosphat pH 7,2 trong bình định mức 100 ml. Hút chính xác 10 ml cho vào bình định mức 100 ml, bổ sung bằng dung dịch đệm pH 7,2 đƣợc dung dịch gốc PAR 500 mg/l. Pha dung dịch chuẩn PAR 32,5 mg/l.
Dung dịch chuẩn IBU: cân chính xác 200 mg IBU nguyên liệu, pha với dung dịch đệm phosphat pH 7,2 trong bình định mức 100 ml. Hút chính xác 10 ml cho vào bình định mức 100 ml, bổ sung bằng dung dịch đệm pH 7,2 đƣợc dung dịch gốc IBU 200 mg/l. Pha dung dịch chuẩn IBU 20 mg/l.
Dung dịch chuẩn hỗn hợp PAR (thay đổi) + IBU (cố định): pha dung dịch chuẩn paracetamol có nồng độ thay đổi trong khoảng từ 24- 40 mg/l (20, 24, 28, 32, 36, 40), còn nồng độ của ibuprofen luôn cố định khoảng 20 mg/l.
Dung dịch chuẩn hỗn hợp PAR (cố định) + IBU (thay đổi): pha dung dịch chuẩn ibuprofen có nồng độ thay đổi trong khoảng từ 12- 28
29
mg/l (12, 16, 20, 24, 28, 32) còn nồng độ paracetamol luôn cố định khoảng: 32,5 mg/l.
Với dung dịch thử: cân lƣợng cốm tƣơng đƣơng khoảng 10 viên, nghiền mịn. Cân chính xác một lƣợng bột thuốc tƣơng ứng với 32,5 mg PAR và 20,0 mg IBU, cho vào bình định mức 100 ml, thêm dung dịch đệm phosphat pH 7,2, lắc, siêu âm khoảng 20 phút và thêm đệm cho vừa đủ 100ml. Lọc, loại bỏ 20 – 30 ml dịch lọc đầu. Lấy 10 ml dịch lọc, cho vào bình định mức 100 ml, thêm dung dịch đệm cho vừa đủ rồi lắc đều.
c) Phương pháp phổ đạo hà tỷ đối
Với PAR: lấy phổ hấp thụ của dung dịch chuẩn hỗn hợp và chế phẩm thử chia cho phổ hấp thụ của dung dịch chuẩn IBU 20 mg/l, đƣợc phổ tỷ đối. Tiến hành lấy đạo hàm bậc 1 của phổ tỷ đối.
Với IBU: lấy phổ hấp thụ của dung dịch hỗn hợp và chế phẩm thử chia cho phổ hấp thụ của dung dịch chuẩn PAR 32,5 mg/l, đƣợc phổ tỷ đối. Tiến hành lấy đạo hàm bậc 1 của phổ tỷ đối [16].
