Dường I: Sóng cực phổ thiamin Imng mẫu
Đ ư ờ n g 2: Só ng c ự c p h ổ Ilii ¡ìmiii trong m ẫ u c ó (liím I ml IIIÊU cliuẢnlO M
c. Đường chuẩn xâc dinh BI trong stricnin klìỏiìR có clíin.
1. ỉ )iền c h ế đ u n g (lịch n ề n : c đ n I g s l r i c n i n lioă t a n ( r o n g I lí( (Imig
tlicli A s;ui đ ó d i ề u c h i l l i |)II l ín 7 , 9 .
2. I ,ập đ ư ờ n g cluiẩn : Ti ến hănh pha IA y m ẫ u cliủm vilíimin Mị
king câch hút lần lưcrt 0,1 till tiến 0.8 ml dung tlicli tliinnin góc 10 M, clinli mức l('ii 10 ml lìằng (lung dịch nền.
- Ill'll I ml dung dịch niiiii pha thănh 10 nil bằng nước cất san (ló lnil 0,4 ml (lung tỉịcli nến. Tiốn hănh xâc định B| (V câc điều kiện liín .
Phương trình lính hăm lượng BI Y = - 0,1356 + 0,0325 X
Yx = 3.l ===== X = 99,5 BI = 24.9 mg/ml
d. Đường cluian xâc đinh vila min B| trong stncmịn cổ đĩm.
* I hănh phần (lung dịch chất inang : KCI 0,1 M EDTA 0,03% sii icniti 0 , 1 % axít xitric 0.05% sau dó điều chính đến |)l ỉ = 7,9.
- 'l iến hănh pha d a y chuẩn vă pha mău như ớ trín.
0 100 200 300
ni
I lìnli 34 : Oường chuẩn xâc định Ihmniin Irong stricnin + đệm 111
P ỉ m ơ n g trình Y = 0.2446 + 0,0564 X
Yx = 5,83 MI = 24,9 mg/nil
e ,JJường clniẩn xâc dinh B| trong, rongalit
- I hănh phĂn liền : KCI 0.1 M; EDTA = 0,03% Rongalil 0,03% |)l I = 7,9 - I .ập đường chuẩn vă lììĂu xâc địnli vitamin B, nlnr trín.
Y = 2,6868 + 0,0568%
Yx = 8,4 ===== X = 100,6
107
h. Đ n ờ i m c h u An xâ c d i n j i R) Irons, Hước :
I lùinli phăn nĩn KCI 0.1 M EDTA = 0,03%. pi I = 7,9- C.'icli xâc định nlur trín. - C.'icli xâc định nlur trín.
KOI Cịii.i Iren hình 34 diking 3
Y = 2.65 = 0 , 0 3 3 7 X X = 65 ,3Yx = 4,85 Yx = 4,85 RI =21.8 mg/ml THUẬT EiA._Ắả£ju|cm y i ĩ A i m j & 3 . 6 . 1. i ) â e Irunu, c ư c p h ổ DIM* x â c đ i n l i v i t a m i n B 6
I ■ Chon nền : Để chọn được nền phù hợp đối với việc xâc (linh Vi
la mill Bf, c l u i n g lôi k h ả o sât 2 n ề n
+ Nền xilrât 0,1 M pi I = 8 + Nôn Axôtit 0,1 M Ị »l i = 8
C l u i n g tỏi tIOII h ă n h g h i c ự c p h ổ x u n g với h ă m l ư ợ n g Br, k h â c n h a u II OI lị» c â c Hổn đ ó .
Sự Ithụ thuộc chiều cao píc - nồng dộ vitamin B6 hiểu diễn trcn hình 35.
llìuli ( ’ : I )ií()ngcực phổ vitaiìiinl36 [B6Ị ~ Il5.7|ig/ml
I r X i t r a t 2 : A x e t a t
3.6.2. Câc yốu lố âtilì hưởng đốn cỉiiĩu cao pĩc
109
pi I của đung dịch không ânh hưởng tới chiều cao của sóng Vilnmin n„ lìliùm pll ảnh hưửng tới thế phđn liuỷ. NeII pll căng nhỏ thì thế phđn
h ủ y n ề n Ciìng diiclnu vă nẽii p l l c ă n g lớn í hì Ihí p h đ n luiỷ n ề n c ă n g Am.
Như vạy khi pỉ 1 lliay đổi dẫn tới chđn của sóng cũng thay dổi. Khi |)l I quâ nhỏ Ihì sóng cùa vitamin sẽ mđì đỉnh vì thế đỉnh píc gần trùng với lliô phần hný I1C I 1. Nhưng pH cũng không dược lớn quâ vì vitamin B6 trong mòi lnròng kiềm bị pliAn liuy bởi ânh sâng đo vậv chiìng (ôi chi kliêo sât pl I lù' 6,5 - 9 vói cả hai nĩn [vilamin Bf>] = 79.8 ng/ml.
2. Kliăo s â t nồng d ò nền.
Chúng lòi khảo sât 110112, độ của câ hai nĩn. Nền xilnít pl 1 = 8 vă I1CI1
axílât pl I = 7,5 nồng độ nền biến thiín từ 0,01 - 0,3 I Br,| = 40,3
!>ĩĩ» a x p t . i t