- Tắnh mẫn cảm với kháng sinh của các chủng Ẹcoli phân lập
3.3.2.Phương pháp xác ựịnh một số ựặc tắnh sinh hóa chủ yếu ựối với vi khuẩn Ẹcoli và Salmonella theo phương pháp thường quy
3 Proteus Mọc lan tràn Trắng 4 Enterobacter
3.3.2.Phương pháp xác ựịnh một số ựặc tắnh sinh hóa chủ yếu ựối với vi khuẩn Ẹcoli và Salmonella theo phương pháp thường quy
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 34
3.3.2.1. Phản ứng lên men ựường
Thành phần của dung dịch pepton: Pepton:15 g
Nước cất vô trùng: 1000ml - Cách tiến hành:
Trong 100ml môi trường pepton cho vào 1ml chỉ thị màu Andrader, lắc ựều rồi chia ra các ống nghiệm. Mỗi ống nghiệm có 5ml, có ống Durham (ựể kiểm tra sinh hơi của vi khuẩn).
Pha các loại ựường Glucoza, lactoza ... thành dung dịch 10%, 20% hấp ướt 1100C trong vòng 20-30 phút.
Cho vào mỗi ống môi trường nước pepton 5-6 giọt dung dịch ựường 10%, 20%. để tủ ấm 370C trong 24h, kiểm tra có tạp khuẩn thì loại bỏ ngay thay thế bằng ống khác. Sau ựó cấy vi khuẩn cần giám ựịnh vào rồi bồi dưỡng ở nhiệt ựộ 370C trong 24h.
- đánh giá kết quả: cùng một lúc kiểm tra ựược 2 tắnh chất:
Phản ứng lên men ựường:
+ Phản ứng dương tắnh: môi trường chuyển màu hồng ựỏ + Phản ứng âm tắnh: môi trường không chuyển màu
Phản ứng sinh hơi:
+ Phản ứng dương tắnh: Ống Durham bị ựẩy lên và trong ống có một khoảng khắ
+ Phản ứng âm tắnh: Ống Durham vẫn ở ựáy ống nghiệm, tromg ống không có gì.
3.3.2.2. Phản ứng Indole
Nguyên lý: trong môi trường không có ựường mà chỉ có pepton, một số vi khuẩn sản sinh men Trytophataza làm phân giải tryptophan ựể sinh indol.
Cách tiến hành: Cấy vi khuẩn vào môi trường nuôi cấy, bồi dưỡng tủ ấm 370C trong 24h, lấy ra rồi nhỏ vào môi trường 5-6 giọt dung dịch Kovac,
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 35
quan sát trong vòng 1 phút.
+ Phản ứng dương tắnh: Trên bề mặt môi trường xuất hiện một vòng tròn màu ựỏ
Triptophan -> Indole
Indol + P.Dimetylamynobenzaldehyt ->Rosindol (màu ựỏ) + Phản ứng âm tắnh: môi trường không chuyển màụ
3.3.2.3. Phản ứng sinh H2S
Dùng que cấy ựầu nhọn vô trùng lấy vi khuẩn rồi cấy trắch sâu vào môi trường TSI agar ựể tủ ấm 370 trong 24h. Nếu vi khuẩn sinh H2S thì dọc ựường cấy sẽ xuất hiện màu ựen.