Nhiệt độ ảnh hƣởng nhiều đến hàm lƣơng chất màu chiết đƣợc. Trên thực tế, lƣợng chất màu phụ thuộc đồng thời vào bản chất dung môi, nhiệt độ. Do đó, một dung môi có hiệu quả chiết tốt nhất ở nhiệt độ phòng có thể không phải là dung môi chiết tốt nhất ở nhiệt độ cao hơn. Vì vậy, để chọn nhiệt độ chiết thích hợp cần thay đổi đồng thời dung môi và nhiệt độ.
Bảng 2.1. Bố trí thí nghiệm chọn dung môi, nhiệt độ đối với các phương pháp chiết khác nhau
Phƣơng pháp chiết
Chiết nhờ siêu âm Ngâm chiết gia nhiệt Etanol/nƣớc 40% (v/v) Nƣớc cất Etanol/nƣớc 40% (v/v) Nƣớc cất Nhiệt độ (0C) 28 28 28 28 40 40 40 40 60 60 60 60 80 80 80 80 - - 100 100
a) Sơ đồ bố trí thí nghiệm
Hình 2.4. Bố trí thí nghiệm chọn dung môi, nhiệt độ chiết thích hợp
b) Thuyết minh sơ đồ
Đề tài nghiên cứu chiết anthocyanin trong 2 trƣờng hợp sau:
- Ngâm chiết có gia nhiệt, sử dụng dung môi là H2O và etanol 960/H2O, trong đó nhiệt độ thay đổi từ t0
phòng 1000C.
- Siêu âm có gia nhiệt, sử dụng dung môi H2O và etanol 960/H2O, trong đó nhiệt độ thay đổi từ t0
phòng 800C (do thiết bị siêu âm phòng thí nghiệm sử
Ngâm chiết (20 phút):
Dung môi chiêt là Etanol/ H2O 40% (v/v) và nƣớc cất. Nhiệt độ thay đổi theo bảng 2.1.
Chiết có siêu âm (20 phút): Dung môi chiết là Etanol/ H2O 40% (v/v) và nƣớc cất. Nhiệt độ thay đổi theo bảng 2.1.
Chọn dung môi, nhiệt độ, phƣơng pháp chiết thích hợp Xử lý Lọc Đo độ hấp thụ, tính hàm lƣợng anthocyanin Rau dền đỏ Bã
dụng chỉ có thể đạt nhiệt độ tối đa là 800C). Tiến hành:
Cân chính xác khoảng 1 g nguyên liệu (đã xử lý, trộn đều) cho vào các bình nón 100 ml, chia làm 2 lô thí nghiệm:
- Lô TN1: Thêm H2O và etanol 960/H2O (tỷ lệ dung môi/nguyên liệu thích hợp đã đƣợc xác định từ kết quả thí nghiệm 2.2.3.2). Đậy kín, cho vào tủ sấy (đã gia nhiệt đến nhiệt độ xác định) trong 20 phút. Nhiệt độ thay đổi lần lƣợt là:
t0
phòng (mẫu này không đƣa vào tủ sấy) ; 400C; 600C;800C và 1000C.
Sau đó, lấy ra lọc lấy dịch chiết, định mức bằng nƣớc cất đến một thể tích chính xác (D ml). Đo độ hấp thụ của các dung dịch ở 538 nm. Đánh giá hàm lƣợng màu anthocyanin.
- Lô TN2: Tiến hành tƣơng tự lô TN1 nhƣng nhƣng cho vào bể siêu âm trong 20 phút, trong đó nhiệt độ siêu âm thay đổi lần lƣợt là:
t0phòng ;400C; 600C và 800C (Nhiệt độ tối đa của bể là 800C).
Các yếu tố khác đƣợc cố định.So sánh hàm lƣợng màu chiết đƣợc ở từng phƣơng pháp từ đó chọn dung môi và nhiệt độ phù hợp.