- Phân loại dựa vào khả năng gây bệnh cho người và các động vật: Vi khuẩn lao người, vi khuẩn lao bò, vi khuẩn lao chim, vi khuẩn lao chuột.
2.5.2.Kỹ thuật nhuộm soi bệnh phẩm bằng phƣơng pháp Ziehl-Neelsen
* Tiêu bản sau khi được dàn, để khô tự nhiên và cố định sẽ được nhuộm theo quy
trình như sau:
- Nhuộm tiêu bản bằng dung dịch Fuchsin Carbol 0,3%:
Xếp tiêu bản theo thứ tự trên giá nhuộm sao cho mặt tiêu bản quay lên trên và các tiêu bản không chạm nhau (nên cách nhau 0,5cm). Mỗi lần nhuộm không quá 12 tiêu bản.
Nhỏ dung dịch Fuchsin 0,3% kín toàn bộ bề mặt tiêu bản. Nếu Fuchsin chảy tràn ra ngoài phải bổ sung thêm để phủ kín.
- Hơ nóng tiêu bản đã nhỏ Fuchsin Carbol:
Hơ nóng tiêu bản từ phía dưới cho tới khi Fuchsin bốc hơi. Không để Fuchsin sôi.
Để 5 phút
- Rửa tiêu bản:
Rửa nhẹ nhàng tiêu bản dưới vòi nước để loại bỏ phần Fuchsin thừa. Nghiêng tiêu bản cho nước chảy hết. Lúc này tiêu bản có màu hồng.
- Tẩy màu
Nhỏ dung dịch cồn tảy HCI 3% phủ kín toàn bộ bề mặt tiêu bản, để 3 phút
- Rửa tiêu bản:
Rửa nhẹ nhàng tiêu bản dưới vòi nước, không xối thẳng vòi nước vào mặt tiêu bản để tránh bong, trôi bệnh phẩm.
Nghiêng tiêu bản cho chảy hết nước
Nếu tiêu bản còn màu hồng tẩy lại lần 2 từ 1-3 phút cho tới khi hết màu hồng sau đó rửa nước tiêu bản.
- Nhuộm nền bằng Methylene blue 0,3%:
Nhỏ dung dịch Methylene 0,3% lên tiêu bản. Để 1 phút
- Rửa tiêu bản:
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Nghiêng tiêu bản cho nước chảy hết Xếp tiêu bản vào giá để khô tự nhiên.
Không hủy bệnh phẩm cho đến khi tất cả các tiêu bản đã được đọc và ghi kết quả.
* Đọc và nhận định kết quả soi kính:
Vi khuẩn lao AFB có hình que mảnh, hơi cong bắt màu đỏ, đứng riêng rẽ hay xếp đôi hoặc từng đám dễ nhận biết trên nền xanh. Đếm số lượng AFB và ghi kết quả như bảng sau [3, 4, 13, 33].
Bảng 2.1. Phân loại kết quả nhuộm soi
Số lƣợng AFB Kết quả Phân loại
> 10 AFB/ 1 vi trường Dương tính (soi ít nhất 20 VT)
3 +
1 -10 AFB/ 1 vi trường Dương tính (soi ít nhất 50 VT)
2 +
10 – 99 AFB/ 100 VT Dương tính 1 + (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
1 – 9 AFB/ 100 VT Dương tính Ghi số lượng cụ thể Không AFB/ 100 VT Âm tính