- Exfoliatine: là các enzim phá hủy lớp thượng bì Men này gây tổn thương da tạo các bọng nước Ví dụ điển hình là hội chứng Lyell do tụ cầu.
2.3.4.Phƣơng pháp xác định chỉ tiêu vi khuẩn Salmonella trong thịt lợn tƣơ
S treptococcus Proteus
2.3.4.Phƣơng pháp xác định chỉ tiêu vi khuẩn Salmonella trong thịt lợn tƣơ
Xác định chỉ tiêu vi khuẩn Salmonella trong thịt tươi áp dụng theo TCVN 5153:1990 [18]. Bao gồm các bước sau:
Bước 1 - Chuẩn bị, đồn nhất mẫu và tăng sinh lần 1:
Cân 25g thịt (không lấy mỡ, gân, bạc nhạc), nghiền nhuyễn, cho vào bình
tam giác 500, bổ sung 225ml dịch dinh dưỡng Nutrient broth, được nồng độ 10-1
.
Ly tâm 3000vòng/phút trong 30 phút. Để tủ ấm 37o
C/16-24h.
Bước 2 - Tăng sinh lần 2 mẫu đã đồng nhất:
Dùng pipet vô trùng hút 1ml mẫu đã đồng nhất theo bước 1, cấy vào 10ml môi trường Selenite Broth, bồi dưỡng 43oC/24h (ở nhiệt độ này Proteus spp và nhiều vi khuẩn tạp nhiễm từ phân bị ức chế không phát triển).
Cấy trực tiếp canh khuẩn Selenite Broth 24h vào môi trường XLD agar, Đồng nhất và pha loãng mẫu
Macconkey ở 37o
C trong 24h Thạch máu ở 37o
C trong 24h
TSI ở 37o
C trong 24h
Nutrien Broth 44oC trong 24h
BHI ở 37o
C trong 24h 24h
Nhuộm Gram Kháng sinh đồ
Tiêm chuột
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu - Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
bồi dưỡng 37oC/24h. Đọc kết quả.
- Salmonella phát triển mạnh, không lên men lactose, khuẩn lạc dạng S, màu đỏ, giữa có chấm đen, tròn (do sản sinh H2S).
- E. coli phát triển yếu, khuẩn lạc dạng S, màu vàng nhạt tạo một vùng sáng ở xung quanh khuẩn lạc (do lên men lactose, sinh hơi).
Bƣớc 3 – Giám định đặc tính sinh hoá:
Chọn khuẩn lạc nghi Salmonella, kiểm tra hình thái, kích thước 0,4-0,6 x
1-3m, không có giáp mô, không sinh nha bào, di động được do có lông, từ 7-12
lông (trừ Salmonella pullorum và Salmonella gallinarum), bắt màu gram (-). Giám định đặc tính lên men đường glucose (+), lactose (-), H2S (+), Indole 370C (-), urease (-), Citrate (+). Giám định serotype kháng huyết thanh O, H (kháng nguyên lông H).
Xác định khả năng sản sinh độc tố, độc lực của chủng vi khuẩn
Salmonella phân lập được.
(adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});