Từ kết quả mục 3.2.1, chúng tôi bổ sung chitin 1,0% hoặc vách tế bào nấm S. rolfsii 0,5% vào môi trường TSM để nuôi cấy T. longibrachiatum TD16. Sau 5 ngày nuôi cấy, tiến hành thu tủa enzyme thô và khảo sát sự hiện diện các dạng isozyme endochitinase của chủng T. longibrachiatum TD16 bằng điện di native- PAGE theo mục 2.4.9.
Kết quả quan sát từ hình 3.1 thể hiện rõ hai băng hoạt độ endochitinase khi nuôi cấy chủng T. longibrachiatum TD16 trong môi trường TSM chứa 0,5% vách tế bào nấm S. rolfsii như là nguồn carbon cảm ứng (hình 3.1B, giếng 2); tương tựđối với cơ chất chitin 1,0%, chủng Trichoderma này cũng cảm ứng biểu hiện hai băng hoạt độ endochitinase sau 5 ngày nuôi cấy (hình 3.1A, giếng 2).
Sự biểu hiện của các băng protein khi nuôi cấy chủng T. longibrachiatum TD16 trên hai cơ chất khác nhau cũng khác nhau (hình 3.1, giếng 1). Điều này có thể lý giải vì ngoài chitin, vách tế bào nấm được cấu tạo từ nhiều thành phần khác nhau như β-glucan, protein... nên có khả năng cảm ứng sinh tổng hợp các hệ enzyme thủy phân khác. Hơn nữa, không phải tất cả các băng protein được quan sát trên gel polyacrylamide đều mang hoạt độ endochitinase. Tương ứng với những băng protein đó, chỉ có hai băng là isozyme endochitinase được biểu hiện bởi chủng T. longibrachiatum TD16 khi nuôi cấy lần lượt trên cơ chất chitin 1,0% hoặc vách tế bào nấm S. rolfsii 0,5%.
Hình 3.1. Các băng protein trên gel polyacrylamide sau khi chạy native-PAGE nhuộm comassive brilliant blue (giếng 1) và nhuộm cơ chất đặc hiệu endochitinase
trên gel agarose (giếng 2) tương ứng hình A-protein thu nhận khi cảm ứng bởi chitin (chi), hình B-protein thu nhận khi cảm ứng bởi
vách tế bào nấm S. rolfsii (SR).