III. í NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI
2.4.3.Phƣơng phỏp nghiờn cứu sự ụ nhiễm trứng giun T.sui sở
2.4.3.1. Phương phỏp nghiờn cứu sự ụ nhiễm trứng giun T. suis ở nền chuồng, xung quanh chuồng nuụi và vườn bói trồng cõy thức ăn cho lợn
* Phương phỏp thu thập mẫu
- Mẫu cặn nền chuồng: Tại mỗi ụ chuồng lấy mẫu cặn ở 4 gúc và ở
giữa ụ chuồng, trộn đều đƣợc một mẫu xột nghiệm (khoảng 100 g /mẫu). Mỗi mẫu đƣợc để riờng trong tỳi nilon cú ghi nhón: Tờn chủ hộ, địa điểm, thời gian lấy mẫu. Mẫu đƣợc xột nghiệm ngay trong ngày.
Số húa bởi trung tõm học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
- Mẫu đất bề mặt xung quanh chuồng nuụi: Trong khoảng bỏn kớnh 5 m
xung quanh chuồng lợn, cứ 10 - 15 m2 lấy một mẫu đất bề mặt. Một mẫu cú khối lƣợng khoảng 100 g, đƣợc trộn đều bởi 4 mẫu ở 4 gúc và 1 mẫu ở giữa. Mỗi mẫu đƣợc để riờng trong tỳi nilon cú ghi nhón: Tờn chủ hộ, địa điểm, thời gian lấy mẫu.
- Mẫu đất ở vườn, bói trồng cõy thức ăn cho lợn: Cứ 10 - 15 m2 lấy một mẫu đất bề mặt. Một mẫu cú khối lƣợng khoảng 100 g, đƣợc phối hợp bởi 4 mẫu ở 4 gúc và 1 mẫu ở giữa. Mỗi mẫu đƣợc để riờng trong tỳi nilon cú ghi nhón: Tờn chủ hộ, địa điểm, thời gian lấy mẫu.
* Phương phỏp xột nghiệm mẫu
Áp dụng phƣơng phỏp Fulleborn và phƣơng phỏp Gefter để phỏt hiện trứng giun T. suis.
Phƣơng phỏp Gefter: Là phƣơng phỏp đƣợc sử dụng để xột nghiệm trứng giun trong đất.
Cỏch làm: Cho NaOH 5 % vào mẫu đất (tỷ lệ 1,5 NaOH : 1 đất), đƣa vào mỏy lắc 3 - 5 phỳt để tỏch trứng giun ra khỏi đất, sau đú đƣa vào mỏy ly tõm tốc độ 3000 vũng / phỳt, trong 2 - 3 phỳt. Bỏ phần nƣớc phớa trờn, giữ phần cặn cú trứng giun T. suis, cho dung dịch NaNO3 bóo hũa vào, trứng giun
T. suis cú tỷ trọng nhỏ hơn sẽ nổi lờn trờn, dựng vũng thộp vớt trứng hoặc
dựng lam kớnh cho tiếp xỳc với bề mặt của dung dịch ta sẽ thu đƣợc trứng giun T. suis.
2.4.3.2. Phương phỏp nghiờn cứu sự phỏt triển của trứng giun T. suis và khả năng sống của trứng giun T. suis cảm nhiễm ở ngoại cảnh
Thu nhận trứng giun T. suis từ những mẫu phõn của lợn đó đƣợc xỏc
định là chỉ nhiễm giun T. suis và nhiễm ở cƣờng độ nặng.
Số húa bởi trung tõm học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/
- Nuụi trứng giun T. suis trong những mẫu phõn ở phũng thớ nghiệm.
Mỗi mẫu để trong một khay nhựa kớch thƣớc 30 x 20 cm. Trong đú, mỗi mựa theo dừi 5 mẫu. Mỗi ngày lấy 3 - 5 gam phõn /mẫu, xột nghiệm bằng phƣơng phỏp Fulleborn để kiểm tra sự phỏt triển của trứng để xỏc định thời gian trứng phỏt triển thành trứng cú sức gõy nhiễm. Đếm số trứng /3 vi trƣờng kớnh hiển vi và đếm số trứng cú sức gõy bệnh, từ đú xỏc định đƣợc tỷ lệ và thời gian trứng phỏt triển thành trứng cú sức gõy nhiễm. Mụ tả sự phỏt triển của trứng trong quỏ trỡnh theo dừi.
Do thời gian sống của trứng giun T. suis cú sức gõy bệnh cú thể kộo dài nờn khi tất cả cỏc trứng đó phỏt triển thành trứng cú sức gõy bệnh thỡ cứ 5 ngày xột nghiệm một lần để xỏc định khả năng sống của trứng giun T. suis
theo thời gian.
Cỏch xột nghiệm: Mỗi lần lấy khoảng 5 gam phõn /mẫu, xột nghiệm bằng phƣơng phỏp Fulleborn, đếm số trứng cú sức gõy bệnh /3 vi trƣờng và đếm số trứng chết. Từ đú, xỏc định đƣợc tỷ lệ trứng giun T. suis chết theo thời gian.