cải biờn.
- Nguyờn tắc: Sau khi cho huyết thanh tỏc dụng với dung dịch cơ chất, axit Pyruvic được tạo thành trong cả hai trường hợp sGOt và sGPT.
Axit Pyruvic, tỏc dụng với 2,4 dimitrophenylhydraza clohydrat, quỏ trỡnh xỳc tỏc của men ngừng hoạt động và tạo ra dinitrophenyl hydrazol pyruvic. Chất vừa tạo thành dinitrophenyl hydrazol pyruvic tỏc dụng với natri hydroxit chuyển thành natri dinitrophenyl hydrazol pyruvic cú màu nõu đỏ. Cường độ của màu đỏ (nghĩa là mật độ quang học của nú ở bước súng ngắn 470nm) tỷ lệ thuận với lượng axit pyruvic tạo thành. So màu bằng quang kế.
- Húa chất cần thiết để định lượng men sGOT và sGPT:
Axit α-xetoglutaric Pyruvat natri
D.L axit aspastic (L.aspactic) Na2HPO4
KH2PO4
Alanin KOH NaOH 2,4 dinitrophenyl hydrazine Axit xitric Toluen Chỉ thị màu Etanol.
Xỏc định hoạt độ men sGOT
- Mẫu thớ nghiệm:
Trong ống ly tõm 10ml, hỳt vào pipet 0,5ml dung dịch (cơ chất để xỏc định sGOT). Đặt vào chậu nước 250C trong 4-5 phỳt. Sau đú thờm 0,5 ml huyết thanh để làm phản ứng chuyển amin. Tiếp tục để ở chậu nước 250C trong 20 phỳt. Sau đú thờm 3 giọt dung dịch alininxitrat lắc đều và để yờn 20 phỳt ở nhiệt độ phũng để tiến hành khử cacboxyl. Sau đú thờm 0,5 ml dung dịch 2,4 DNPH lắc đều để yờn 5 phỳt ở nhiệt độ phũng để phản ứng diễn ra tiếp tục. Thờm 2,5 ml dung dịch Toluen bóo hũa, lắc kỹ trong 10 phỳt và đem ly tõm 2000 vũng/phỳt trong 5 phỳt.
Dựng pipet khụ 2ml hỳt 1,5 ml lớp nước ở trờn (trỏnh vẩn đục lớp dưới) cho vào ống nghiệm khụ.
Thờm 4,5ml cồn 2,5% KOH, lắc đều để yờn 10 phỳt ở nhiệt độ phũng.
Sau đú xem so màu, kớnh lọc màu xanh, bước súng 470nm. Ống trắng là hỗn hợp cỏc húa chất.
- Mẫu kiểm tra, húa chất:
Mẫu này chứa tất cả cỏc chất của mẫu thớ nghiệm trừ huyết thanh. Thay 0,5ml huyết thanh bằng 0,5ml nước cất, làm hai ống. Mẫu kiểm tra tiến hành song song và tiến hành trong tất cả cỏc điều kiện như trờn.
Xỏc định hoạt độ men sGPT:
- Mẫu thớ nghiệm:
Lấy vào ống ly tõm đỏy nhọn 0,5ml cơ chất cho sGPT ủ trong chậu nước 250C. Sau thờm 0,5ml huyết thanh lại ủ 20 phỳt cho phản ứng men xảy ra, thờm 0,5ml dung dịch 2,4 DNPH, lắc kỹ 5 phỳt ở nhiệt độ phũng, sau đú quỏ
trỡnh tiếp tục như với sGOT.
- Ống trắng là hỗn hợp cỏc húa chất:
Hoạt độ men sGOT và sGPT được tớnh bằng lượng men cần thiết để tạo 1kg axit pyruvic làm đơn vị. Để biết được số lượng pyruvic của thớ nghiệm người ta dựa vào đường cong chuẩn rồi đem số àg tỡm được nhõn với 2, tức là ứng với 1ml huyết thanh.
Gan và quỏ trỡnh đụng mỏu
Trong gan, protrombin, antitrombin, fibrinogen v.v… được tổng hợp. Quỏ trỡnh tổng hợp đú cần cú vitamin K.
Hoàng đản do tắc ống mật, mật khụng ra được tỏ tràng, nhũ húa và hấp thụ mỡ ở đường ruột bị trở ngại, cơ thể thiếu vita min K (K - avitaminosis).
Hoàng đản do tổn thương gan, antitrombin tăng, hàm lương fibrinogen giảm. Trong xơ gan lượng fibrinogen giảm đến 20%; viờm gan cấp tớnh giảm đến 50% so với bỡnh thường.
Những bệnh làm tắc ống mật, tổn thương gan thường cú triệu chứng mỏu khú đụng.
Tiết 15: SINH THIẾT GAN (BIOPSIA)
1. Mục tiờu: Giỳp sinh viờn hiểu biết về sinh thiết gan, ý nghĩa và phương
phỏp của sinh thiết gan trong chẩn đoỏn bệnh.
2. Nội dung:
- Khỏi niệm về sinh thiết gan - Phương phỏp sinh thiết gan