+ Thuốc thử: Hayem HgCl2 - 0,5g;
Na2SO4 .10H20 – 5g; NaCl – 2g;
Nước cất 200 ml.
+ Cỏch làm: Một ống nghiệm thật khụ, cho vào 1ml huyết thanh tươi, rồi dựng ống hỳt 5ml, giọt từ từ dung dịch Hayem, vừa giọt vừa lắc ống nghiệm, cho đến lỳc cú kết tủa khụng tan. Kết quả được tớnh bằng mililit dung dịch đó dựng.
Ở trõu khỏe, phản ứng Gro: 2,4-2,6( ml)
Phản ứng được tớnh là dương tớnh khi kết quả bằng 1/2 bỡnh thường hay ớt hơn. Phản ứng Gro dương tớnh: Tổn thương phõn tỏn trờn gan, viờm gan, xơ gan. Gro dương tớnh kộo dài chứng tỏ bệnh chuyển qua mạn tớnh.
Hoàng đản do cơ giới Gro õm tớnh.
IV. Phản ứng với Lugụn (Lugol)
+ Thuốc thử Lugụn:
I2 – 20,0g; IK – 40,0g;
Nước cất – 300ml. + Cỏch làm:
Cho 1 giọt Lugụn lờn phiến kớnh rồi trộn vào 1 giọt huyết thanh tươi, trộn đều. Đọc kết quả sau 5 phỳt.
Huyết thanh vún từng cục: ++++
Vún từng hạt: +++
Vún từng hạt nhỏ: ++ Vún từng hạt li ti: + Huyết thanh trong suốt: _
1. Mục tiờu: Giỳp sinh viờn nắm được cơ năng trao đổi lipit và sắc tố mật
trong trạng thỏi sinh lý bỡnh thường và trạng thỏi bệnh lý cũng như cỏc xột nghiệm để biết cỏc rối loạn trao đổi lipit và sắc tố mật khi gan bị bệnh.
2. Nội dung: Cỏc xột nghiệm cơ năng gan (lipit và sắc tố mật).I. Xột nghiệm cơ năng trao đổi Lipit I. Xột nghiệm cơ năng trao đổi Lipit
Thường phải định lượng lipit tổng số, cholesterol và cholesterol este, phospholipit trong mỏu; điện di lipoprotein.
Vai trũ của gan trong quỏ trỡnh trao đổi lipit bắt đầu từ giai đoạn tiờu húa mỡ trong đường ruột. Mật và cỏc axit mật như axit tocorolic (taucorolic) hoạt húa men lipaza, cựng với cỏc Na+ tạo thành cỏc muối của axit mật. Cỏc muối này làm thay đổi chức năng bề mặt của hạt mỡ, nhũ tương húa nú để dễ hấp thụ. Cả quỏ trỡnh thủy húa, oxy húa, chuyển húa lipit phức tạp gắn liền chức phận của gan.
Trong thỳ y, cú nhiều tư liệu về cỏc xột nghiệm cholesterol trong mỏu, điện di lipoprotein huyết thanh.
Cholesterol trong mỏu, trong cỏc tổ chức cơ, thần kinh, nhất là trong nóo. Cholesterol tự do, Cholesterit (este) trong thức ăn, qua tiờu húa ở ruột non, trong cỏc giọt mỡ hấp thu vào mỏu. Nguồn nội sinh được tổng hợp chủ yếu trong cỏc tế bào nền của gan từ cỏc axetyl CoA. Ngoài gan, Cholesterol cũng được tổng hợp ở một số tổ chức khỏc.
Gan cú vai trũ to lớn trong việc điều chỉnh nồng độ Cholesterol trong mỏu.
Ở gan, xảy ra quỏ trỡnh este húa Cholesterol tạo thành Cholesterit (Cholesterol este). Là nguồn Cholesterit chủ yếu của huyết tương. Khi tế bào gan bị tổn thương, Cholesterit huyết tương giảm, và do đú, tỷ lệ:CholesteroCholesteril toan tphan giảm. Tỷ lệ đú càng giảm, bệnh càng trầm trọng. Thường gặp trong cỏc bệnh viờm gan nhiễm trựng, nhiễm độc nặng, xơ gan, hoàng đản kộo dài,…
Riờng Cholesterit ngoại sinh trong cỏc giọt mỡ đến gan thỡ lại thuỷ phõn nhờ men Cholesterol esteraza ở gan. Sau khi thuỷ phõn lại tạo este húa để tham gia vào lipoprotein huyết tương.
Nguyờn tắc: Nước mỏu đó loại protein trong dung dịch nhờ axit Feric chlorua, cú Cholesterol hoà tan trong đú. Cholesterol trong nước mỏu cú tỏc dụng với axit sulfuric đặc. Và Fe +++ sẽ thành một dẫn xuất màu đỏ tớm ổn định. Cũng xử lý như vậy với dung dịch Cholesterol chuẩn rồi suy ra nồng độ Cholesterol trong huyết thanh.
Thu ốc th ử :
1. Axit axetic đặc (A.R)
2. Dung dịch Feric chlorua gốc: Cõn 840 mg Feric chlorua ( FeCl3.6 H2O) cho vào bỡnh 100ml. Thờm axit axetic đặc vào, ngoỏy cho tan rồi cho tiếp đến 100ml.
3. Dung dịch Feric chlorua dựng: Trộn một phần dung dịch Feric chlorua gốc rồi cho thờm 9 phần axit axetic đặc (pha khi dựng).
4. Dung dịch Feric chlorua trắng: Lấy 8,5 ml dung dịch Feric chlorua gốc rồi cho thờm axit axetic đặc đến 100ml.
5. Dung dịch muối Natro chlorua 0,85%.
6. Dung dịch Cholesterol chuẩn gốc (1ml cú 1mg). Cõn 100 mg Cholesterol (A.R.) cho vào bỡnh định mức 100 ml, dựng axit axetic đặc hũa tan và pha đến khấc 100.
7. Dung dịch Cholesterol chuẩn dựng (1ml cú 0,1 mg). Lấy 10 ml Cholesterol chuẩn gốc cho vào bỡnh 100ml, thờm 98,5 ml dung dịch Feric chlorua gốc, rồi thờm axit axetic đặc đến 100 ml ( pha khi dựng).
8. Axit sulfuric đặc ( A.R).
Thao tỏc:
Cho vào ống li tõm 0,05 ml huyết thanh (hoặc huyết tương).
Cỏc chất Cỏc ống nghiệm
1 2 3 4 5
Số ml Cholesterol chuẩn (0,1 mg) Số ml Cholesterol thực tế
Số lượng Cholesterol trong 100 ml huyết thanh mg % 0,5 0,05 50 1 0,10 100 1,5 0,15 150 2 0,20 200 2,5 0,25 250 Cho cả 5 ống vào bỡnh đun cỏch thủy cho bốc hơi hết. Chỳ ý, chlorform rất dễ chỏy, vỡ vậy lỳc đun phải hết sức cẩn thận. Thờm vào mỗi ống 2,1 ml
thuốc thử, lắc đều, đun cỏch thủy ở 300C trong 20 phỳt và so màu ngay sau đú.
Xột nghịờm:
Dựng 2 ống nghiệm khụ, sạch và cho vào cỏc chất sau: ống xột nghiệm ống trắng
Huyết thanh tươi 0,1ml 0
Thuốc thử 2,0 2,1
Trộn đều, đem cỏch thủy 300C trong 20 phỳt và so màu ngay sau đú bằng quang kế, cúng 0,5 cm; kớnh lọc màu đỏ.
Tinh hàm lượng Cholesterol theo đồ mẫu.
í nghĩa của chẩn đúan
Cholesterol tăng giảm theo tuổi, theo chế độ ăn uống, tăng khi cú thai.
- Cholesterol toàn phần tăng: hoàng đản do tắc mật, hư thận, xơ cứng động mạch, huyết ỏp cao.
- Cholesterol toàn phần giảm: Xơ gan nặng, viờm gan nhiễm trựng; Một số bệnh truyền nhiễm nặng và kộo dài; u nang giỏp trạng, suy thượng thận.
- Cholesterit giảm: Viờm gan, nhiễm trựng, xơ gan. Viờm gan món tớnh, hoàng đản do sỏi.