3.1.3.1. Tỷ lệ nhiễm và cƣờng độ nhiễm KST ở cá tầm giống:
Bảng 3.2. Tỷ lệ nhiễm và cường độ nhiễm KST ở cá tầm Nga giống
Ký sinh trùng Tỷ lệ nhiễm (%) Cƣờng độ nhiễm
(trùng/lam)
Nhớt
(da, vây, mang) Mật Nhớt
(da, vây, mang) Mật
Trichodina nigra 20,0 3,0
Gyrodactyrus sp. 7,0 1,7
Ichthyophthirus multifiliis 8,6 1,3
Ceratomyxa sp. 0,8 3,2*
Ghi chú: *: là trùng/TTK40X.
Qua bảng số liệu trên, cá tầm giống Nga thu tại Lâm Đồng đều bị nhiễm 4 loài ký sinh trùng trong thời gian thu mẫu. Trichodina nigra có tỷ lệ nhiễm cao nhất (20%), tiếp theo là Ichthyophthirus multifiliis (8,6%), Gyrodactyrus sp. (7,0%), đối với Ceratomyxa
sp. mặc dù có tỷ lệ thấp nhất (0,8%) nhưng cường độ nhiễm cao nhất (3,2). Cường độ nhiễm của Trichodina nigra 3 trùng/lam.
Bảng 3.3. Tỷ lệ nhiễm và cường độ nhiễm KST ở cá tầm Siberi giống
Ký sinh trùng
Tỷ lệ nhiễm (%) Cƣờng độ nhiễm
(trùng/TTK10X) Nhớt
(da, vây, mang) Mật Nhớt
(da, vây, mang) Mật
Trichodina nigra 16,1 1,9
Gyrodactyrus sp. 5,1 1,5
Ichthyophthirus multifiliis 5,1 0,6
Ceratomyxa sp. 1,7 2,8*
Ghi chú: *: là trùng/TTK40X.
Đối với cá tầm Siberi, cũng cho thấy một kết quả tương tự. Từ bảng số liệu trên cho thấy, Trichodina nigra có tỷ lệ nhiễm cao nhất với 16,1%, tiếp đến là Gyrodactyrus
sp. (5,1%), Ichthyophthirus multifiliis (5,1%), tỷ lệ nhiễm thấp nhất là Ceratomyxa sp. (1,7%). Cường độ nhiễm của các trùng trên cá tầm cũng khác nhau, cao nhất là
Ceratomyxa sp. (2,8) và Trichodina nigra (1,9). Cá tầm Siberi trong thời gian nghiên cứu, bắt gặp Gyrodactyrus sp. và Ichthyophthirus multifiliis song cường độ nhiễm của 2 loài này tương đối thấp 1,5 và 0,6 trùng/lam.
Theo Bùi Quang Tề (2008), cường độ nhiễm Trichodina spp. từ 20 – 30 trùng/thị trường với độ phóng đại 10X đã gây nguy hiểm cho cá. Cá sẽ phát bệnh khi nhiễm 50 – 100 trùng/TT10X, tỉ lệ cá chết dao động từ 70 – 100%. Trong nghiên cứu này, tỷ lệ và cường độ nhiễm của Trichodina nigra tương đối thấp, từ 16,1% (cá tầm Siberi) và 20,0% (cá tầm Nga) mặc dù chưa gây chết nhưng cũng ảnh hưởng đến sức khỏe cho cá, nhất là giai đoạn giống. Cá bị kích thích bơi cọ xát vào thành hay các vật dụng trong bể ương, rất dễ có những tổn thương cho cá. Trichodina spp. sinh sản rất nhanh nếu gặp điều kiện môi trường thích hợp (Đỗ Thị Hòa và cs, 2004), do đó nếu không có biện pháp can thiệp kịp thời thì tạo thành dịch bệnh, có thể gây chết hàng loạt cho cá nuôi. Đây là loài ký sinh trên da, vây mang, gây ra những tổn thương nhỏ trên bề mặt cơ thể cá, tạo điều kiện cho các tác nhân cơ hội khác như nấm, vi khuẩn có cơ hội xâm nhập và gây bệnh. Điều này được Brown và Gratzek (1980); McArdle, 1984; El–Khatib, 1989 và Hassan, 1992 công bố trên cá bị nhiễm Trichodina spp. Cá bị nhiễm ký sinh trùng này với cường độ cao gây nên những tổn thương hay rách lớp màng vây, bào mòn tế bào biểu bì, lở loét. Cơ thể cá kèm theo tích tụ dịch nhầy dày đặc ở bộ phận tổn thương như là cơ chế tự bảo vệ trước sự xâm nhập của ký sinh trùng.
Theo Bazari và cs (2009) khi nghiên cứu sự nhiễm ký sinh trùng trên cá tầm Ba Tư, không tìm thấy Trichodina reticulate trong bể ương với nguồn nước xử lý và ăn thức ăn công nghiệp, nhưng khi đưa ra ngoài ao nuôi, xuất hiện T. reticulate ký sinh trên cá. Tỷ lệ nhiễm là từ 10,0 – 46,7% trên cá giống ương trong ao đất, cũng thời điểm này, cá tầm thu mẫu từ sông có tỷ lệ nhiễm loài trùng bánh xe này là 13,0 – 100,0%. So sánh với kết quả từ nghiên cứu này cho thấy, tỷ lệ nhiễm Trichodina trên cá tầm ương tại Lâm Đồng là thấp hơn. Khan (2004) cho biết, Trichodina spp. có thể gây tổn thương bào mòn trên ký chủ khi ký sinh ở mức cao, thậm chí có khả năng gây tử vong. Những thay đổi trong chất lượng môi trường cũng trực tiếp ảnh hưởng đến sự xuất hiện của các động vật nguyên sinh (Hossain và cs, 2008).
Võ Thế Dũng và cs (2011) báo cáo bắt gặp 2 loài ký sinh trùng Gyrodactyrus sp. và Trichodina sp. trên cá tầm với tỷ lệ 37,5% và 25,0 %. Cũng theo nhóm tác giả, đây là những tác nhân gặp phổ biến trong các hệ thống nuôi công nghiệp trên Thế giới. Trong nghiên cứu này, tỷ lệ nhiễm của Gyrodactyrus sp. thấp hơn, không ảnh hưởng lớn đến sức khỏe của cá nuôi. Cá bị nhiễm tác nhân này thường có những biểu hiện như bơi không định hướng do kích thích cọ xát vào các vật dụng trong bể, cá không có dấu hiệu chết khi nhiễm trùng này. Tuy nhiên, Gyrodactyrus sp. là loài đẻ con, cơ thể chứa cả thế hệ thứ 2, 3; sinh sản đơn giản, nhanh nếu gặp môi trường thuận lợi, do đó dễ bùng phát thành bệnh nguy hiểm cho cá nuôi nếu không có biện pháp can thiệp kịp thời (Võ Thế Dũng và cs, 2011, 2012). (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Theo Johnson và cs (1979), khi nghiên cứu trên cá hồi được nuôi ở Bắc Mỹ cho thấy rằng, bệnh bào tử sợi Ceratomyxosis gây ra bởi loài C. shasta có thể gây chết cho cá hồi không chỉ ở giai đoạn cá trưởng thành mà cả trên cá giống, gây tổn thất lớn cho vùng nuôi. Trong thời gian kiểm tra mẫu thu từ các trại nuôi ở Lâm Đồng, tỷ lệ nhiễm loài
Ceratomyxa sp. rất thấp (1,7%), cường độ nhiễm là 2,8 trùng/TTK40X chưa thấy tác hại lớn đối với cá nuôi, cá không có biểu hiên bất thường nào. Điều này cũng phù hợp với nghiên cứu của Võ Thế Dũng và cs (2012). Ceratomyxa spp. nội ký sinh trong mật, được tìm thấy phổ biến trên các đối tượng cá biển với tỷ lệ nhiễm cao. Cá không có dấu hiệu bệnh lý rõ ràng, một số con tuy nhiễm với tỷ lệ cao nhưng cá vẫn thể hiện trạng thái khỏe mạnh (Đỗ Thị Hòa, 2004).
3.1.3.2. Mức độ nhiễm ký sinh trùng ở cá tầm giống theo tháng:
Bảng 3.4. Mức độ nhiễm ký sinh trùng ở cá tầm Nga giống theo tháng
KST Tỷ lệ nhiễm % (theo tháng thu)
T11 T12 T2 T3 T4
Trichodina nigra 16,7 18,2 24,0 16,0 15,4
Gyrodactyrus sp. 3,3 4,5 8,0 8,0 11,5
Ichthyophthirus multifiliis 6,7 9,1 12,0 8,0 7,7
Bảng 3.5. Mức độ nhiễm ký sinh trùng ở cá tầm Siberi giống theo tháng
KST Tỷ lệ nhiễm % (theo tháng thu)
T11 T12 T2 T3 T4
Trichodina nigra 21,7 14,3 20,0 12,5 12,0
Gyrodactyrus sp. 0,0 0,0 8,0 8,3 8,0
Ichthyophthirus multifiliis 0,0 0,0 8,0 4,2 12,0
Ceratomyxa sp. 4,3 4,8 0,0 0,0 0,0
Trichodina nigra được bắt gặp trên cả cá tầm Nga và cá tầm Siberi ở tất cả các tháng trong thời gian nghiên cứu. Với tỷ lệ nhiễm giao động từ 15,4 – 24,0% ở cá tầm Nga, 12,0 – 21,7% đối với cá tầm Siberi. Trichodina spp. có phạm vi phân bố rộng, sinh sản quanh năm. Theo Đỗ Thị Hòa và cs (2004) loài T. nigra sinh sản trong điều kiện ẩm ướt, nhiệt độ giao động từ 22 – 280
C nên dễ dàng tìm thấy loài này ký sinh trên cả 2 loài cá tầm này từ tháng 11 đến tháng 4. Tỷ lệ nhiễm nhìn chung tương đối đồng đều trong các tháng. Mohamed (1999), nghiên cứu tỷ lệ nhiễm của Trichodina sp. trên cá rô phi cho thấy, 49,6 % cá bị nhiễm ký sinh trùng này, tỷ lệ nhiễm cao nhất rơi vào những tháng mùa xuân, đông (62,9 và 56,3%) tiếp theo là mùa thu, hè (41,3 và 35,0%). Cá chết khi nhiễm với cường độ cao kèm theo những điều kiện bất lợi như nuôi mật độ cao cá bị ức chế, khí độc cao (NH3 >0,8mg/l), oxy hòa tan thấp, cá thiếu dinh dưỡng mà Trichodina sp. là tác nhân cơ hội (Ahmed, 1976; Paperna, 1980) .
Gyrodactyrus sp. và Ichthyophthirus multifiliis cũng tìm thấy trên hai loài cá tầm với tỷ lệ tương đối đồng đều trong các tháng 2 – 4. Riêng đối với cá tầm Siberi, không thấy xuất hiện hai loài ký sinh trùng này ở tháng 11 – 12, bởi trong thời gian nghiên cứu, mẫu được thu ở các địa điểm nuôi khác nhau, nguồn nước đưa vào ương nuôi cũng khác nhau, điều kiện sinh thái khác nhau. Do đó, đã bắt gặp trùng trên cá ở vùng này nhưng vùng nuôi khác thì không tìm thấy ký sinh trùng.
Ceratomyxa sp. bắt gặp trên cá tầm giống ương nuôi tại Lâm Đồng từ tháng 11 – 12 với tỷ lệ nhiễm thấp (3,3% – cá tầm Nga, 4,3 – 4,8% – cá tầm Siberi). Từ tháng 2 – 4 không tìm thấy loài này gây bệnh trên cá tầm. Tuy nhiên, hiện nay hiểu biết về vòng đời, về sinh thái của các loài thuộc giống này còn hết sức hạn chế, hơn nữa nghiên cứu này chưa xác định được loài cụ thể, do đó chưa thể giải thích được sự thay đổi đột ngột về tỷ lệ nhiễm trên cá tầm giống.
Thành phần loài ký sinh trùng tìm thấy trên cá tầm Nga và cá tầm Siberi giống tại các thời điểm thu mẫu tại Lâm Đồng là khác nhau. Một số loài được tìm thấy trong suốt thời gian nghiên cứu, một số loài lại bắt gặp ký sinh trên cá ở những thời điểm nhất định, hay trong cùng một thời gian thu, bắt gặp loài KST này nhưng lại không thấy trên đối tượng cá khác. Sự khác nhau không quá rõ rệt về thành phần và mức độ nhiễm giữa các tháng thu mẫu. Trichodina spp. gặp nhiều và thường xuyên trên cá cũng như phổ biến trong các thời điểm khác nhau trong năm, điều này được nhiều tác giả đưa ra Đỗ Thị Hòa 2004; Võ Thế Dũng và cs, 2011, 2012; Snieszko và cs, 1971; Lom, 1962). Thời tiết thay đổi, nguồn nước vẩn đục, giàu chất hữu cơ, cá không được cung cấp đủ dinh dưỡng kèm theo ức chế do mật độ ương nuôi dày là những điều kiện thuận lợi cho các tác nhân cơ hội ký sinh gây bệnh cho cá.
Quản lý điều kiện môi trường nuôi tốt cũng như chăm sóc sức khỏe đàn cá góp phần giảm thiểu khả năng gây bệnh của các tác nhân là ký sinh trùng. Mặc dù, vẫn chưa thấy những tác hại đáng kể nào của ký sinh trùng đối với đàn cá tầm giống trong nghiên cứu này, nhưng sẽ mang đến những tác hại lớn trong tương lai nếu không có những giải pháp kiểm soát kịp thời cho đối tượng nuôi. Một số biện pháp phòng trị bệnh được một số tác giả đề xuất.
Read và cs (2007) khi nghiên cứu Trichodina spp. trên cá silver Perch (Bidyanus bidyanus) giai đoạn giống, đã đưa ra một số giải pháp trị bệnh Trichodinosis như tắm nước muối (NaCl) với liều lượng 10 ppt trong 60 phút, hay tắm formalin 25 ppm liên tục trong 8 giờ không cho ăn, sục khí liên tục. Đồng thời tác giả cũng đề ra một số giải pháp
phòng bệnh như định kỳ tắm NaCl (2 – 5 ppt), duy trì chất lượng nước tốt, kiểm soát chế độ cho ăn, bổ sung đầy đủ dinh dưỡng cho cá. Đối với Gyrodactyrus sp., tác giả đề xuất ngâm formalin 30 ppm, kèm theo sục khí, không cho ăn hoặc tắm cho cá giống bằng formalin 150 ppm trong 30 phút; trichlorfon 0,25 ppm tắm không thời hạn; tắm với nước muối (15 ppt) trong 1giờ, lặp lại hằng ngày. Đồng thời, kết hợp với biện pháp quản lý chất lượng nước và chế độ dinh dưỡng hợp lý. Đỗ Thị Hòa (2004) cho biết, có thể điều trị bệnh do Trichodina spp. trên cá ở Việt nam bằng cách tắm nước muối 2 – 3% trong 5 – 15 phút, CuSO4 (3 – 5 ppm) tắm cho cá trong 5 – 15 phút cũng có hiệu quả tốt.
Đối với bệnh do Ichthyophthirus multifiliis, Đỗ Thị Hòa (2004) khuyến cáo nên cách ly đàn cá bị bệnh với đàn cá khỏe để tránh lây nhiễm theo trục ngang. Để trị bệnh trùng quả dưa cần chú ý đến 2 giai đoạn trong chu ký sống gồm giai đoạn bào nang bơi lội tự do trong môi trường nước và giai đoạn dinh dưỡng (ký sinh). Đối với giai đoạn bơi lội tự do trong nước, có thể sử dụng thuốc diệt trùng để xử lý nguồn nước nuôi, diệt trùng ở giai đoạn này là hiệu quả nhất, giai đoạn sống ký sinh (dinh dưỡng) của trùng quả dưa thường khó điều trị hơn, nếu sử dụng thuốc diệt trùng thì cần lặp lại 2 – 3 lần mới có hiệu quả. Việc điều trị trùng quả dưa có thể sử dụng phương pháp tăng nhiệt độ lên giới hạn không thích hợp cho trùng như: tăng nhiệt độ lên 320
C duy trì trong 5 ngày có thể giảm đáng kể trùng ký sinh trên cá (Hoffman và cs, 1974). Ichthyophthiriosis có thể được kiểm soát bằng cách giữ cá ở bể có dòng nước chảy mạnh trong 10 ngày ở cá hồi vân (Svobodova và cs, 1995). Tắm bằng formalin với nồng độ 60 – 250 ppm trong 20 – 60 phút trong 4 ngày hoặc có thể tắm chung với acetic acid, peracetic acid hay H2O2 (nồng độ 10 ppm trong 25 – 40 phút trong 4 – 6 ngày); hoặc có thể tắm CuSO4 với nồng độ 250 – 500 ppm trong 30 giây cũng cho hiệu quả tốt đối với trị bệnh do Ichthyophthirus gây ra cho cá giống.
3.2. Thành phần vi khuẩn phân lập trên cá tầm giống bệnh thu tại Lâm Đồng: 3.2.1. Thành phần vi khuẩn gây bệnh trên cá tầm giống: 3.2.1. Thành phần vi khuẩn gây bệnh trên cá tầm giống:
3.2.1.1. Cá tầm bị xuất huyết: Dấu hiệu bệnh lý: Dấu hiệu bệnh lý:
Bệnh thường gặp ở cá tầm giống thu tại Lâm Đồng là bệnh xuất huyết. Tại vây, trên da, đầu và hậu môn của cá xuất hiện các điểm xuất huyết. Ban đầu với những điểm xuất huyết nhỏ, sau lan rộng ra, một số trường hợp bệnh nặng gây ra lở loét vùng bị nhiễm. Một dấu hiệu điển hình nữa là màu sắc cá tối đen, cá bơi lờ đờ, thường xuyên trồi lên mặt nước. Bệnh lây nhiễm nhanh và gây chết rải rác cho cá tầm giống.
(adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Bảng 3.6. TSXH các dạng dấu hiệu bị xuất huyết của cá tầm thu tại Lâm Đồng
Dấu hiệu bệnh lý Cá tầm Nga Cá tầm Siberi TSXH Tỷ lệ (%) TSXH Tỷ lệ (n=49) (n=32) (%)
Dấu hiệu bên ngoài Xuất huyết Phần bụng 27 55,1 19 59,4 Đường bên 18 36,7 13 40,6 Hình 3.4. Cá tầm bị xuất huyết
Vây 30 61,2 22 68,8
Miệng 12 24,5 7 21,9
Dấu hiệu bên trong
Gan sẫm màu 31 63,3 23 71,9
Gan nhợt nhạt 8 16,3 9 28,1
Ruột tích dịch 4 8,2 3 9,4
Trong thời gian nghiên cứu, đã thu 49 mẫu cá tầm Nga và 32 mẫu cá tầm Siberi từ đàn cá bị bệnh xuất huyết tại các trại nuôi ở Lâm Đồng. Trong quá trình kiểm tra mẫu cá bệnh, cá có những biểu hiện đặc trưng thường chỉ biểu hiện ở 1 đến 2 dấu hiệu trên cơ thể mà ít xuất hiện cùng lúc tất cả các dấu hiệu trên. Xuất huyết vây và gan sẫm màu là hai biểu hiện xuất hiện thường xuyên với tỷ lệ cao nhất trên cả cá tầm Nga (61,2% và 63,3%) và Siberi (68,8% và 71,9%). Cũng từ kết quả trên, những dấu hiệu khác như xuất huyết miệng, ruột tích dịch hay gan nhợt nhạt có TSXH thấp ở 2 loài cá tầm này. Kết quả nghiên cứu phù hợp với Võ Thế Dũng và cs (2012). Quan sát cá bị bệnh xuất huyết trong quá trình thu và kiểm tra mẫu, cá có những dấu huyết nhẹ ở ngoài da, bỏ ăn hoặc kém ăn, thường xuyên nổi lờ đờ trên mặt nước.
Kết quả phân lập vi khuẩn trên nhóm cá bị bệnh xuất huyết
Qua thời gian nghiên cứu, tiến hành thu mẫu cá tầm giống có dấu hiệu bệnh xuất huyết. Mẫu được thu ở các trại nuôi cá tầm tại Đà Lạt. Mẫu vi khuẩn được phân lập từ gan của cá bệnh, nuôi cấy trên môi trường TSA, ở nhiệt độ 25oC, sau 24 giờ quan sát khuẩn lạc, ghi chép hình thái, màu sắc khuẩn lạc, nuôi cấy thuần sau đó định danh vi khuẩn.
Trên môi trường TSA thu được 3 dạng khuẩn lạc chính: khuẩn lạc tròn, bề mặt bóng, lồi, màu trắng, đường kính 1,0 – 1,5 mm; Dạng khuẩn lạc tròn, trắng đục, nhỏ li ti (đường kính ≤ 0,5mm) và một dạng khuẩn lạc nhỏ li ti (đường kính ≤ 0,5mm), tròn, hơi bóng.
Dựa vào các đặc điểm về hình dạng khuẩn lạc, nhuộm gram, kết hợp với các phản ứng sinh hóa, kết quả cho thấy có 3 loài vi khuẩn là Aeromonas hydrophyla, A. Salmonicida và Pseudomonas luteola.
3.2.1.2. Thành phần vi khuẩn gây bệnh xuất huyết trên cá tầm giống:
Từ mẫu, phân lập từ các mẫu bệnh phẩm của cá bệnh, nuôi cấy trên môi trường TSA ở nhiệt độ 250C, sau 24 – 28 giờ, nhuộm gram cùng với một số phản ứng sinh hóa, đã phân lập được 3 loài. Kết quả trình bày ở bảng sau:
Bảng 3.7. Thành phần các loài vi khuẩn phân lập từ cá tầm giống bị bệnh xuất huyết
Ngành Lớp Bộ Họ Giống Loài Proteobacteria Gammaproteo –bacteria Aeromon –adales Aeromonada –ceae Aeromonas A. hydrophila Aeromonas A. salmonicida Pseudom