2.1. Tính chất
Quan sát bằng mắt thường, chế phẩm phải đạt các yêu cầu đã nêu.
2.2. Định tính Trimetazidin
Định tính Trimetazidin
Bằng quang phổ hấp thu UV-Vis: quét phổ từ bước sóng 400 nm đến 200 nm, mẫu
đối chiếu và mẫu thử pha ở cùng nồng độ nhau trong môi trường acid HCl 0,1 N. Yêu cầu: Phổ đồ của mẫu đối chiếu và mẫu thử phải chồng khít nhau hoặc chênh lệch độ hấp thu của mẫu thử không quá 2% độ hấp thu của mẫu đối chiếu tại bước sóng hấp thu.
Định tính bằng quang phổ hồng ngoại IR: phổ hồng ngoại của mẫu rắn
Trimetazidin dihydrochloride phải có các đỉnh ở các số sóng 1093, 1494, 1280, 1011, 1042, 1600 cm-1 (phương pháp dập viên KBr).
Định tính gốc chlorid
Hòa tan lượng bột tương ứng với 1 mg Trimetazidin dihydrochlorid trong 10 ml nước cất, lọc lấy dịch lọc trong và tiến hành phản ứng định tính ion chlorid.
Yêu cầu: kết tủa trắng với dung dịch bạc nitrat 10%(TT), tủa tạo thành tan trong dung dịch ammoniac 10% (TT), không tan trong acid nitric loãng (TT).
2.3. Độđồng đều khối lượng
Cân 20 viên bất kỳ, tính khối lượng trung bình của viên. Cân riêng từng viên, so sánh với khối lượng trung bình. Không được quá 2 viên có khối lượng chênh lệch quá 7,5% khối lượng trung bình viên và không được có viên nào chênh lệch quá 15% khối lượng trung bình viên.
2.4. Độ hòa tan
Thiết bị thử nghiệm
Máy thửđộ hòa tan dùng cánh khuấy
PHỤ LỤC 2
Môi trường khảo sát: sử dụng môi trường mô phỏng dịch tiêu hóa trong cơ thể. - Trong 2 giờ đầu: môi trường acid HCl 0,1 N (pH 1,2): thể tích 750 ml.
- Từ giờ thứ 3 đến kết thúc: môi trường đệm phosphat pH 6,8: thể tích 1000 ml. (Sau 2 giờ trong môi trường acid HCl, thêm 250 ml dung dịch Na3PO4 0,2 M vào bể thửđểđược 1000 ml đệm phosphat pH 6,8).
Nhiệt độ thử nghiệm: 36,5 – 37,5 oC. Tốc độ quay: 100 vòng/phút
Thời điểm lấy mẫu: 2 giờ, 6 giờ và 12 giờ.
Thể tích lấy mẫu: tại mỗi thời điểm rút chính xác 10 ml ở điểm giữa bề mặt môi trường và mặt trên của cánh khuấy, cách thành bình ít nhất 10 mm. Sau khi rút mẫu, bổ sung trở lại 10 ml môi trường tương ứng tại các thời điểm sau 2, 6 và 12 giờ. Lọc và đo độ hấp thu.
Định lượng Trimetazidin đã hòa tan:
Phương pháp định lượng: mẫu được lọc qua màng 0,45 µm, hàm lượng Trimetazidin dihydrochlorid trong mẫu hòa tan được xác định bằng phương pháp
đo quang phổ UV-Vis tại bước sóng 231 nm. Mẫu trắng là môi trường hòa tan tương ứng trong thử nghiệm.
Nồng độ hoạt chất phóng thích ở các thời điểm được xác định dựa trên đường chuẩn
đã được xây dựng trước. -Đường chuẩn ở pH 1,2:
Pha loãng 8,5 mL acid hydrochloric đậm đặc với nước vừa đủ 1000 mL thu được dung dịch A có pH = 1,2 (kiểm tra lại bằng pH kế)
Cân chính xác khoảng 60 mg Trimetazidin dihydrochlorid chuẩn cho vào bình định mức 100 ml. Hòa tan và điều chỉnh đến vạch bằng môi trường hòa tan pH 1,2. Pha loãng dung dịch trên thành 7 dung dịch có nồng độ tăng dần đều từ 8 - 32 mcg/l. Các mẫu được xác định nồng độ bằng phương pháp đo quang phổ UV-Vis ở bước sóng 231 nm.
Phương trình hồi quy tuyến tính được xác định bằng phương pháp bình phương cực tiểu (sử dụng công cụ Regression trong MS-Excel).
PHỤ LỤC 2
- Đường chuẩn ở p H 6,8:
Hòa tan 76 g natri phosphat (Na3PO4.12 H2O) với nước vừa đủ 1000 mL thu được dung dịch X
Hòa 230 mL dung dịch X với 740 mL dung dịch A vừa pha ở trên và 30 mL nước, thu được dung dịch B có pH 6,8 (kiểm tra lại bằng pH kế).
Cân chính xác khoảng 60 mg Trimetazidin dihydrochlorid chuẩn cho vào bình định mức 100 ml. Hòa tan và điều chỉnh đến vạch bằng môi trường hòa tan pH 1,2. Pha loãng dung dịch trên thành 7 dung dịch có nồng độ tăng dần đều từ 8 - 32 mcg/l. Các mẫu được xác định nồng độ bằng phương pháp đo quang phổ UV-Vis ở bước sóng 231 nm.
Phương trình hồi quy tuyến tính được xác định bằng phương pháp bình phương cực tiểu (sử dụng công cụ Regression trong MS-Excel).
2.5. Định lượng
Chuẩn bị dung dịch đối chiếu
Cân chính xác khoảng 60 mg Trimetazidin dihydrochlorid chuẩn cho vào bình định mức 100 ml. Hòa tan và điều chỉnh đến vạch bằng dung dịch acid HCl 0,1 N. Hút chính xác 3 ml dung dịch trên chuyển vào bình định mức 50 ml, pha loãng và điều chỉnh đến vạch bằng dung dịch HCl 0,1 N.
Chuẩn bị dung dịch thử
Cân 20 viên thuốc bất kỳ, tính khối lượng trung bình của một viên. Nghiền trộn kỹ
lượng viên trên trong cối sứđến khi thu được hỗn hợp bột đồng nhất. Mẫu thửđược chuẩn bị như sau: cân chính xác khoảng một lượng bột tương ứng với khối lượng trung bình của một viên. Chuyển vào bình định mức 100 ml, hòa tan và điều chỉnh
đến vạch bằng dung dịch acid HCl 0,1 N. Siêu âm mẫu thử trong 15 phút. Lọc qua màng lọc, bỏ 10 ml dịch lọc đầu. Hút chính xác 3 ml dịch lọc chuyển vào bình định mức 50 ml, pha loãng và điều chỉnh đến vạch bằng dung dịch acid HCl 0,1 N. Mẫu trắng là dung dịch acid HCl 0,1 N.
PHỤ LỤC 2
Hàm lượng phần trăm Trimetazidin dihydrochlorid được tính theo công thức:
% t 100 c c A m X C d A p H = × × × × ×
Trong đó: X%: hàm lượng phần trăm Trimetazidin trong mẫu. At, Ac: độ hấp thu của mẫu thử và mẫu đối chiếu. Cc: nồng độ của mẫu đối chiếu (mcg/ml).
m: khối lượng trung bình của một viên (mg). p: lượng bột thuốc cân cho mẫu thử (mg).
H: hàm lượng Trimetazidin trong một viên (mg). d: hệ số pha loãng (d = 5/3)