3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1.4 Ảnh hưởng của chất điều hòa tăng trưởng thực vật lên sự gia tăng
đường kính thân và hoạt động tích lũy tinh dầu ở cây Nghệ đen in vitro
Ảnh hưởng của các chất điều hòa tăng trưởng thực vật (IAA, GA3, BA) lên sự gia tăng đường kính thân và hoạt động tích lũy tinh dầu ở cây
Nghệ đen in vitro
Các chất điều hòa tăng trưởng thực vật có tác động khác nhau lên sự gia tăng đường kính thân và hoạt động tích lũy tinh dầu ở cây Nghệđen in vitro.
Sau 2 tuần nuôi cấy, đường kính thân cây Nghệ đen in vitro tại vị trí nách lá thứ sáu ở các nghiệm thức khác nhau có sự thay đổi rõ rệt. Bổ sung vào môi trường nuôi cấy IAA 2 mg/l hoặc BA 1, 3, 5 hay 7 mg/l đều làm tăng đường kính thân, trong đó bổ sung BA 1 hoặc 3 mg/l cho đường kính thân đạt giá trị cao nhất. Ngược lại, bổ sung GA3 làm giảm đường kính thân ở nồng độ 5 hay 10 mg/l (bảng 3.5, hình 3.9, ảnh 3.12).
Tương ứng với sự gia tăng đường kính, ở các lát cắt ngang thân tại vị trí nách lá thứ sáu số hạt tinh dầu tập trung nhiều hơn khi nuôi cấy các khúc cắt thân với môi trường bổ sung IAA ở nồng độ 2 hay 5 mg/l hoặc BA 3 hay 5 mg/l. Ở nghiệm thức có BA 3 hay 5 mg/l cho giá trị cao nhất (ảnh 3.13). Trong khi đó, bổ sung GA3 1 hay 10 mg/l không làm gia tăng số hạt tinh dầu và GA3 ở nồng độ 10 mg/l cho số hạt tinh dầu thấp hơn so với đối chứng (bảng 3.5 và hình 3.9).
Bảng 3.5. Đường kính thân và số hạt tinh dầu/lát cắt ngang của cây Nghệ đen in vitroở vị trí nách lá số sáu sau hai tuần nuôi cấy với môi trường có bổ sung các chất điều hòa tăng trưởng thực vật khác nhau.
Thành phần chất điều hòa tăng trưởng thực vật
Đường kính thân (µm) Số hạt tinh dầu/lát cắt ngang Đối chứng (MS) 1859 ± 26cd 45,5 ± 0,7bc IAA 1 mg/l 1865 ± 36cd 46,2 ± 1,4bcd IAA 2 mg/l 2080 ± 38ef 51,2 ± 1,7d IAA 5 mg/l 1970 ± 55de 50,7 ± 1,1d BA 1 mg/l 2210 ± 49fg 49,5 ± 2,7cd BA 3 mg/l 2330 ± 44g 57,4 ± 2,3e BA 5 mg/l 2067 ± 56ef 55,9 ± 0,9e BA 7 mg/l 2171 ± 67f 48,1 ± 1,5cd GA3 1 mg/l 1751 ± 48bc 44,4 ± 0,8bc GA3 5 mg/l 1633 ± 28b 42,5 ± 1,4ab GA3 10 mg/l 1451 ±39a 39,1 ± 0,9a
Hình 3.9. Sự thay đổi đường kính thân và số hạt tinh dầu/thị trường kính ở vị trí nách lá thứ sáu của thân cây Nghệđen in vitro sau hai tuần nuôi cấy với môi trường bổ sung các chất điều hòa tăng trưởng thực vật khác nhau (Các số sau kí hiệu IAA, BA và GA3 chỉ nồng độ, mg/l).
Ảnh 3.12. Lát cắt dọc thân cây Nghệ đen in vitro sau 2 tuần nuôi cấy với môi trường có bổ sung các chất điều hòa tăng trư ởng thực vật khác nhau cho thấy sự thay đổi đường kính vùng lõi thân.
A, Đối chứng (MS) B, BA 3mg/l C, IAA 2mg/l D, GA3 5mg/l 1mm B 1mm A C 1 mm D 1 mm
Ảnh 3.13. Sự phân bố hạt tinh dầu ở vị trí nách lá thứ sáu của thân cây Nghệđen in vitro sau hai tuần nuôi cấy (mũi tên: hạt tinh dầu).
A, Lát cắt ngang qua thân cây Nghệ đen in vitro được trồng với môi trường đối chứng (MS).
B, Lát cắt ngang qua thân cây Nghệ đen in vitro được trồng với môi trường bổ sung BA 3 mg/l.
1 mm
A
1 mm
Ảnh hưởng của BA lên sự gia tăng đường kính thân và hoạt động tích lũy tinh dầu ở cây Nghệ đen in vitro
Ở các nghiệm thức khác nhau, đường kính thân cây Nghệ đen in vitro gia tăng từ vị trí nách lá đầu tiên (gần mô phân sinh) đến nách lá cuối cùng (thứ tám) (bảng 3.6 và hình 3.10)
Cùng với sự gia tăng đường kính thân, số hạt tinh dầu cũng gia tăng. Tại vị trí nách lá thứ nhất đến nách lá thứ ba, không có sự xuất hiện của các hạt tinh dầu. Bắt đầu từ vị trí nách lá thứ tư, hạt tinh dầu xuất hiện và tăng dần đến vị trí nách lá thứ sáu. Tại vị trí nách lá thứ bảy và tám, trong khi đường kính thân vẫn tiếp tục gia tăng và đạt giá trị cao nhất thì số hạt tinh dầu tại vị trí này lại giảm và cho kết quả thấp hơn so với vị trí nách lá thứ năm và sáu (bảng 3.7, hình 3.11 và ảnh 3.15).
Nhìn chung BA 3 hay 5 mg/l tác động làm gia tăng đường kính thân và số hạt tinh dầu trên thân cây Nghệ đen in vitro nhưng tác động rõ rệt nhất là tại vị trí nách lá thứ năm và sáu. Tại vị trí này, bổ sung vào môi trường nuôi cấy BA 3 mg/l cho đường kính thân có giá trị sai biệt so với đối chứng cùng các nghiệm thức khác và sự tập trung số hạt tinh dầu là cao nhất (bảng 3.6, 3.7, hình 3.10, 3.11 và ảnh 3.15).
Bên cạnh đó, BA 1, 3, 5 hay 7 mg/l còn tác động hình thành nên các chồi bên tăng trưởng. Với môi trường đối chứng (MS) không có các chồi bên được hình thành. Bổ sung BA với các nồng độ từ 1 đến 7 mg/l đều hình thành các chồi bên, trong đó bổ sung BA 3 hay 5 mg/l cho số chồi bên cao nhất (bảng 3.7 và ảnh 3.14).
Bảng 3.6. Sựthay đổi đường kính thân cây Nghệ đen in vitro tại các vị trí nách lá khác nhau sau hai tuần nuôi cấy với môi trường MS có bổ sung BA 1, 3, 5 và 7 mg/l (đối chứng là môi trường MS).
Vị trí Đường kính thân (µm) Đối chứng BA 1mg/l BA 3mg/l BA 5mg/l BA 7mg/l 1 132 ± 6a, 1 151 ± 4a, 12 173 ± 12a, 23 174 ± 5a, 3 156 ± 4a, 2 2 280 ± 18a, 1 316 ± 4a, 12 394 ± 19b, 3 367 ± 22b, 23 351 ± 25a, 23 3 577 ± 30b, 1 737 ± 43b, 2 961 ± 10c, 3 715 ± 41c, 2 660 ± 52b, 12 4 1011 ± 18c, 1 1239 ± 19c, 2 1447 ± 81d, 3 1238 ± 42d, 2 1140 ± 60c, 12 5 1448 ± 12d, 1 1647 ± 43d, 1 1939 ± 118e, 2 1651± 67e, 1 1661 ± 109d, 1 6 1859 ± 25e, 1 2210 ± 99e, 23 2329 ± 66f, 3 2067 ± 60f, 2 2171 ± 67e, 23 7 2275 ± 102f, 1 2491 ± 173f, 12 2513 ± 87f, 12 2340 ± 54g, 12 2605 ± 71f, 2 8 2535 ± 100g, 2 2665 ± 99f, 12 2773 ± 94g, 12 2496 ± 49h, 1 2912 ± 99g, 2
Các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau và các số trung bình trong hàng với các số
Bảng 3.7. Số chồi bên được hình thành tại vị trí nách lá thứ bảy, tám và sựthay đổi số hạt tinh dầu/lát cắt ngang qua thân cây Nghệ đen in vitro tại các vị trí nách lá khác nhau sau hai tuần nuôi cấy với môi trường MS làm đối chứng và MS bổ sung BA 1, 3, 5 và 7 mg/l.
Nồng độ BA (mg/l)
0 1 3 5 7
Số hạt tinh dầu/lát cắt ngang
1 0 ± 0a, 1 0 ± 0a, 1 0 ± 0a, 1 0 ± 0a, 1 0 ± 0a, 1 2 0 ± 0a, 1 0 ± 0a, 1 0 ± 0a, 1 0 ± 0a, 1 0 ± 0a, 1 3 0 ± 0a, 1 0 ± 0a, 1 0 ± 0a, 1 0 ± 0a, 1 0 ± 0a, 1 4 9,7± 1,8b, 1 17,4 ± 1,5b, 23 19,0 ± 3,1b, 23 21,0 ± 2,5b, 3 13,0 ± 1,5b, 12 5 23,3 ± 2,7c, 1 30 ± 1,8c, 12 39,0 ± 1,5cd, 3 38,0± 3,6c, 23 33,3 ± 2,0c, 23 6 45,5 ± 0,8e, 1 49 ± 2,7e, 1 57,4 ± 2,3e, 2 55,9 ± 1,0e, 2 48,1 ± 1,6d, 1 7 44,5 ± 1,9e, 1 42,3 ± 2,2d, 1 43,5 ± 2,4d, 1 44,8 ± 1,9d, 1 47,3 ± 2,2d, 1 8 33,0 ± 1d, 1 36,8 ± 1,9cd, 1 34 ± 2,3c, 1 36,1 ± 1,6c, 1 37,7 ± 1,5c, 1 Số chồi bên tăng trưởng
7 và 8 0,0 ± 0,0a 1,3 ± 0,3b 2,2 ± 0,2c 2,0 ± 0,3c 1,1 ± 0,1b
Đối với mỗi chỉ tiêu về số hạt tinh dầu và số chồi bên, các số trung bình trong cột với các mẫu tự
khác nhau và các số trung bình trong hàng với các số thứ tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở
Hình 3.10. Sự thay đổi đường kính thân cây Nghệ đen in vitro tại các vị trí nách lá khác nhau sau hai tuần nuôi cấy với môi trường MS bổ sung BA 1, 3, 5 và 7 mg/l (đối chứng là môi trường MS).
Hình 3.11. Sựthay đổi số hạt tinh dầu/lát cắt ngang qua thân cây Nghệ đen in vitro
tại các vị trí nách lá khác nhau sau hai tuần nuôi cấy với môi trường MS bổ sung BA 1, 3, 5 và 7 mg/l (đối chứng là môi trường MS).
Ảnh 3.14. Khúc cắt thân cây Nghệđen in vitro sau hai tuần nuôi cấy với môi trường bổ sung BA 3 mg/l mang chồi bên tăng trưởng ở phần gốc thân (vị trí nách lá thứ bảy và tám).
Ảnh 3.15. Sự phân bố hạt tinh dầu tại các nách lá 5, 6, 7 và 8 (A –D) ở thân cây Nghệ đen in vitro sau hai tuần nuôi cấy với môi trường bổ sung BA 3 mg/l.
C 1 mm D 1 mm
1 mm B
3.1.5 Ảnh hưởng của BA lên trọng lượng khô và hàm lượng tinh dầu ở cây
Nghệ đen trong vườn
Xử lý BA 3 mg/l trên tất cả các lá của cây Nghệ đen trong vườn ở giai đoạn 9 tháng trồng và quan sát kết quả sau một tháng xử lý, trọng lượng khô và thể tích tinh dầu ở củ cấp một ngừng tăng trưởng thay đổi không đáng kể, trong khi các chỉ tiêu này gia tăng có ý nghĩa đ ối với củ cấp ba đang tăng trưởng, dù vẫn còn thấp hơn so với củ cấp một (bảng 3.8, hình 3.12, 3.13 và ảnh 3.16)
Bảng 3.8. Trọng lượng khô và thể tích tinh dầu của củ cấp một và củ cấp ba ở giai đoạn 10 tháng trồng của cây Nghệ đen trong vườn sau khi xử lý.
Cấp củ
Trọng lượng khô (mg/g TLT) Thể tích tinh dầu (ml/100 g TLT) Đối chứng BA 3 mg/l Đối chứng BA 3 mg/l 1 299 ± 8a, 1 319 ± 11a, 1 1,33 ± 0,04a, 1 1,40 ± 0,05a, 1 3 186 ± 4b, 1 247 ± 4b, 2 0,93 ± 0,03b, 1 1,20 ± 0,03b, 2
Đối với mỗi chỉ tiêu về trọng lượng khô và hàm lượng tinh dầu, các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau và các số trung bình trong hàng với các số thứ tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở mức p = 0,05.
Hình 3.12. Trọng lượng khô củ cấp một và củ cấp ba ởgiai đoạn 10 tháng trồng của cây Nghệ đen trong vườn sau khi xử lý.
Hình 3.13. Sự thay đổi thể tích tinh dầu củ cấp một và củ cấp ba ở giai đoạn 10 tháng trồng của cây Nghệ đen trong vườn sau khi xử lý.
Ảnh 3.16. Củ ở giai đoạn 10 tháng trồng của cây Nghệ đen trong vườn sau khi xử lý. A, Đối chứng B, BA 3 mg/l 5 cm B A 5 cm