Sau khi thực hiện các thử nghiệm kiểm tra hoạt probiotic của 16 chủng vi sinh vật phân lập được chúng tôi nhận thấy có hai chủng K6 và K7 vừa có khả năng sống sót trong môi trường pH thấp (pH3 và pH2) vừa có khả năng kháng vi sinh vật. Chúng tôi tiến hành thực định danh 2 chủng vi khuẩn này bằng bộ kit định danh. ( Bảng4.7 , hình 4.5)
Bộ kit này dựa trên nguyên tắc: áp dụng khả năng lên men các loại nguồn cabonhydrate khác nhau của những chủng khác nhau để phân biệt chúng. Khi vi khuẩn lên men nguồn carbon chúng sẽ sinh acid, làm giảm pH môi trường và làm cho chất chỉ thị bromocresol tím trong môi trường chuyển từ màu tím thành màu vàng. Riêng giếng 25, khảo sát khả năng sử dụng muối mật của vi khuẩn, sẽ chuyển từ màu tím sang màu đen nếu phản ứng dương tính. Kết quả được xem xét theo sự
64
đổi màu hay không của môi trường ở từng giếng, sau đó sẽ được xử lý bằng phần mềm định danh API.
Bảng 4.7: Kết quả định danh bằng bộ kit API50 CHL
Tên chủng Tên định danh Độ tương đồng
K6 Lactobacillus acidophilus 99,9% K7 Bifidobacterium bifidum 99,2% Các hình ảnh kết quả định danh thể hiện qua hình 4.5
K6.Lactobacillus acidophilus
K7. Bifidobacterium bifidum
Hình 4.5: Hình kết quả định danh bằng bộ kit API50 CHL
Sau khi định danh ta được kết quả hai chủng Lactobacillus acidophilus và
65
trường cực đoan tốt. Điều này đã được một số nghiên cứu khác chứng minh như theo nghiên cứu của Conway và cs thực hiện năm 1987, nghiên cứu đã khảo sát khả năng sống trong môi trường đường ruột người của 4 chủng vi khuẩn lactic gồm chủng Lactobacillus acidophilus ADH, Lactobacillus acidophilus N2, Lactobacillus bulgaricus và Streptococcus thermophilus. Kết quả khảo sát 4 chủng này về khả năng sống trong môi trường pH thấp cho thấy rằng trong 4 chủng này thì chủng
Lactobacillus acidophilus có khả năng sống tốt nhất, trong đó Lactobacillus acidophilus ADH sống tốt hơn Lactobacillus acidophilus N2, tốt hơn Lactobacillus bulgaricus và thấp nhất là Streptococcus thermophilus [16]. Một nghiên cứu khác của Nguyễn Thị Hồng Nhung năm 2010 đã phân lập chủng Bifidobacterium bifidum từ mẫu phân su trẻ em, qua quá trình sàng lọc hoạt tính probiotic cao kết quả cho thấy rằng chủng Bifidobacterium bifidum có khả năng sống trong môi trường pH thấp, khả năng chịu muối mật, cholesterol [4].
4.4 Khảo sát giống