- Kết quả giải trình tự ADNr ITS dòng nấm PaeR
3.3.1. Khả năng nhân sinh khối sản xuất nấm tắm xám P.javanicus
Thắ nghiệm nhân sinh khối nấm lớn P. javanicus (PaeR1) trên cơ chất gạo, với ựối chứng là nấm xanh M. anisopliae (MaR1) ựược tiến hành theo công nghệ của Cuba. Kết quả ựánh giá khả năng sinh bào tử của nấm (bảng 3.11) cho thấy nấm P. javanicus phát triển nhanh trên môi trường gạo, sau 5 ngày nuôi cấy lượng bào tử ựã ựạt 3,52 x 106 bt/g trong khi nấm MaR1 chỉ ựạt 1,87 x 106 bt/g. Sau 10 ngày nuôi cấy, số lượng bào tử nấm PaeR1 ựạt 1,98 x 109 bt/g còn nấm MaR1 chỉ ựạt 1,06 x 109 bt/g.
Bảng 3.11. Khả năng phát triển sinh khối nấm P. javanicus (PaeR1) và nấm xanh M. anisopliae (MaR1) trên môi trường gạo (Viện BVTV, 2012)
Nấm tắm xám (PaeR1) đ/C nấm xanh (MaR1)
Ngày
theo dõi Màu sắc Lượng bào tử/g Màu sắc Lượng bào tử/g T
0C H% 5 ngày Tắm nhạt 3,52 x 106 Xanh nhạt 1,87 x 106 7 ngày Tắm nhạt 6,05 x 107 Xanh nhạt 2,95 x 107 10 ngày Tắm xám 1,98 x 109 Xanh lục 1,06 x 109 12 ngày Tắm xám 2,14 x 109 Xanh lục 1,45 x 109 28,3 76,7
Trong kết quả thắ nghiệm (bảng 3.11) còn nhận thấy, tốc ựộ sinh bào tử của nấm P. javanicus tăng mạnh nhất là thứ 7 ựến ngày thứ 10 với mức tăng gần tăng từ 6,05 x 107 ựến 1,98 x 109 bt/g. Trong khi từ 10 - 12 ngày sau nuôi cấy lượng bào tử nấm chỉ tăng từ 1,98 x 109 bt/g lên 2,14 x 109 bt/g. Kết quả này mở ra ựịnh hướng về thời gian thu hoạch nấm P. javanicus thắch hợp là sau 10 ngày nuôi cấy.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 63
Hình 3.16. Sinh khối nấm tắm xám P. javanicus (PaeR1) và nấm xanh
M. anisopliae (MaR1) sau 10 ngày nuôi cấy trên cơ chất gạo (Viện BVTV, 2012)
Kết quả ựánh giá lựa chọn thành phân môi trường nhân sinh khối nấm P. javanicus (bảng 3.12) cho thấy, trong 4 loại môi trường thì môi trường MT4 với thành phần là gạo có bổ xung CaCO3 nồng ựộ 0,5 % cho lượng bào tử cao nhất ựạt 2,4 x 109 bt/g sinh khối tươi và ựạt 2,61 x 109 bt/g sinh khối khô.
Kết quả thắ nghiệm (bảng 3.12) còn nhận thấy trong các môi trường hỗn hợp từ các loại nguyên liệu rẻ tiền như ngô, cám, bột ựậu lành, bã bia khô, bã ựậu phụ, ựể nhân sinh khối nấm thì môi trường MT2 và MT3 với thành phần gồm: 60 gram cám gạo, 30 gram bột ngô nghiền mảnh và 10 gram bã bia khô hoặc 10 gram bột ựậu lành (ghi chú dưới bảng 3.12) cho lượng bào tử tương ựối tốt ựạt từ 2,36 x 109 - 2,42 x 109/gram sinh khối khô, trong ựiều kiện nhiệt ựộ phòng thắ nghiệm là 28,30C và ẩm ựộ 76,7%.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 64 Bảng 3.12. Số lượng bào tử nấm P. javanicus (PaeR1) sau 10 ngày
nhân sinh khối trên các loại môi trường nhân sinh khối khác nhau (Viện BVTV, 2012)
Lượng bào tử nấm sau 10 ngày nhân nuôi Công
thức
Môi
trường Số bào tử /gram sinh khối tươi ( x 109)
Số bào tử /gram sinh khối khô
( x 109) T0C H (%) I MT1 1,35 c 1,54 a II MT2 2,17 b 2,42 b III MT3 2, 09 b 2,36 b IV MT4 2,40 a 2,61c CV% 3,62 3,95 LSD 0,05 0,145 0,176 28,3 76,7
Ghi chú: MT1 : Bột ngô mảnh 80gram + bã ựậu phụ 20gram
MT2 : Cám gạo 60 gram +bột ngô mảnh 30 gram +bã bia khô 10gram MT3 : Cám gạo 60 gram +bột ngô mảnh 30 gram +bột ựậu nành 10 gram MT4 : Gạo hấp chắn 100 gram + 30 ml dung dịch CaCO3 0,5%.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 65 Kết quả thắ nghiệm xác ựịnh lượng nước tối ưu ựể pha vào môi trường trường MT4 (bảng 3.13) cho thấy, hàm lượng nước có ảnh hưởng rõ rệt ựối với số lượng bào tử nấm P. javanicus (PaeR1) hình thành sau 10 ngày nhân sinh khối. Biên ựộ dao ựộng của số lượng bào tử giữa các công thức pha với lượng nước khác nhau là từ 1, 62 x 109 bt/g ựến 2,63 bt/g sinh khối khô. Bảng 3.13. Khả năng sinh bào tử của nấm P. javanicus (PaeR1) trong các môi
trường nhân sinh khối với các ngưỡng ẩm ựộ khác nhau (Viện BVTV, 2012) Số lượng bào tử sau 10 ngày
Công thức Lượng nước /300 g môi trường MT4 (ml) Lượng dịch giống nấm nuôi cấy (ml) Số bào tử/g tươi (x 109) Số bào tử/g khô (x 109) T0C TB H (%) TB 1 80 50 1,46c 1,62c 2 100 50 2,45a 2,63a 3 120 50 2,32a 2,59a 4 150 50 2,02b 2,38b CV% 4,26 3,34 LSD 0,05 0,176 0,154 28,1 78,7
Trong số các công thức tương ứng với mức nước ban ựầu pha vào môi trường MT4 thì công thức 80 nước/300g môi trường cho lượng bào tử trần thấp nhất chỉ ựạt 1,62 x 109 bt/g sinh khối khô. Khi hàm lượng nước tăng lên mức 100 và 120ml /300 gram môi trường thì lượng bào tử nấm tăng tương ứng là 2,59 x 109 bt/g và 2,63 x 109 bt/g sinh khối khô. Tuy nhiên khi tăng lượng nước lên mức 150ml nước/300 gram môi trường thì môi trường có hiện tượng bết dắnh nên nấm phát triển kém, lượng bào tử nấm giảm xuống còn 2,38 x 109 bt/g sinh khối khô (bảng 3.13). Như vậy lượng nước pha vào môi trường MT4 từ 100-120ml/300g môi trường là ngưỡng thắch hợp ựể sinh khối nấm P. javanicus (PaeR1) phát triển .
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 66