Khảo sát hiệu quả thủy phân của ba loại chế phẩm cellulase thô thu được (CP1, 2, 3) và Cellusoft L. Thực hiện như mục 3.2.2.6 (Phương pháp khảo sát quá trình thủy phân bã mía).
ü Khảo sát nguyên liệu bã mía thích hợp quá trình thủy phân
ü Khảo sát tỉ lệ phối trộn hệ cellulase từ hai chủng T.reesei và A.niger
ü Khảo sát hàm lượng cellulase/ bã thích hợp
3.3.2.1. Khảo sát nguồn nguyên liệu thủy phân
Thực hiện phản ứng thủy phân bã mía theo mục 3.2.2.6 với tỉ lệ 5% (v/w) Cellusoft L. Thực hiện với phản ứng thủy phân với cả ba loại bã mía : chưa tiền xử lý, tiền xử lý ở nhiệt độ phòng, 12 giờvà tiền xử lý ở 900C, 1.5 giờ. Loại bã nào cho thủy phân tạo nhiều đường khử nhất sau 72 giờ phản ứng sẽ được chọn làm nguyên liệu thủy phân cho các thí nghiệm tiếp theo.
Trang 51
Tiến hành phản ứng thủy phân bã mía được chọn ở 3.3.2.1 theo mục 3.2.2.6 với hàm lượng Cellusoft L/bã thay đổi lần lượt : 3%, 5%, 7%, 9%.
3.3.2.3. Khảo sát tỉ lệ phối trộn cellulase lỏng thô CP 1A+1T
Tiến hành phối trộn CP1A và CP1T theo tỉ lệ CP1A/CP1T (v/v) như sau : 10/0, 7.5/2.5, 6/4, 5/5, 4/6, 2.5/7.5, 0/10. Xác định hoạt tính CMCase (UI/ml) theo từng tỉ lệ phối trộn.
Tiến hành phản ứng thủy phân bã mía được chọn ở 3.3.2.1 theo mục 3.2.2.6 với các tỉ lệ phối trộn trên và tỉ lệ enzyme/bã 9% (v/w). Dựa vào lượng đường sinh ra xác định được tỉ lệ phối trộn X thích hợp nhất.
3.3.2.4. Khảo sát hàm lượng chế phẩm cellulase CP 1A+ 1T / bã
Tiến hành phản ứng thủy phân bã mía được chọn ở 3.3.2.1 theo mục 3.2.2.6 với tỉ lệphối trộn X được chọn ở mục 3.3.2.3 và tỷ lệ enzyme/bã thay đổi lần lượt 0, 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 4 (UI/g) trong thời gian 72 giờ.
3.3.2.5. Khảo sát tỉ lệ phối trộn enzyme thô dạng rắn, sấy CP 2A+2T
Tiến hành phối trộn CP2A và CP2T theo tỉ lệ CP2A /CP2T (w/w) theo khối lượng khô như sau : 0/0.1, 0.025/0.075, 0.04/0.06, 0.05/0.05, 0.06/0.04, 0.075/0.025, 0.1/0.
Tiến hành phản ứng thủy phân bã mía được chọn ở 3.3.2.1 theo mục 3.2.2.6 với các tỉ lệ phối trộn trên và tỉ lệ enzyme/bã 10% (w/w). Dựa vào lượng đường sinh ra xác định được tỉ lệ phối trộn Y thích hợp nhất.
3.3.2.6. Khảo sát hàm lượng chế phẩm cellulase CP 2A+2T / bã
Tiến hành phản ứng thủy phân bã mía được chọn ở 3.3.2.5 theo mục 3.2.2.6 với tỉ lệ phối trộn Y được chọn ở mục 3.3.2.5 và tỷ lệ enzyme/bã thay đổi lần lượt 0, 5%, 10%, 15%, 20% (g/g) trong thời gian 72 giờ.
3.3.2.7. Khảo sát tỉ lệ phối trộn enzyme dạng hỗn hợp sau lên men CP3A+3T
Tiến hành phối trộn CP3A và CP3T theo tỉ lệ CP3A /CP3T (w/w) theo khối lượng khô như sau : 0/0.1, 0.025/0.075, 0.04/0.06, 0.05/0.05, 0.06/0.04, 0.075/0.025,
Trang 52
0.1/0.
Tiến hành phản ứng thủy phân bã mía được chọn ở 3.3.2.1 theo mục 3.2.2.6 với các tỉ lệ phối trộn trên và tỉ lệ enzyme/bã 10% (w/w). Dựa vào lượng đường sinh ra xác định được tỉ lệ phối trộn Z thích hợp nhất.
3.3.2.8. Khảo sát hàm lượngchế phẩm cellulase CP 3A+3T/bã
Tiến hành phản ứng thủy phân bã mía được chọn ở 3.3.2.1 theo mục 3.2.7 với tỉ lệ phối trộn Z được chọn ở mục 3.3.2.7 và tỷ lệ enzyme/bã thay đổi lần lượt 0, 5%, 10%, 15%, 20% (w/w) trong thời gian 72 giờ.