nghiên cứu cúm
Các kỹ thuật miễn dịch thường được sử dụng trong chẩn đốn huyết thanh học và nghiên cứu cúm, bao gồm:
+ Phản ứng kết hợp bổ thể: Phản ứng kết hợp bổ thể thường được sử
Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nơng nghiệp ……… 18 nguyên NP được sản xuất bằng phương pháp nhiễm virut cúm vào tế bào nuơi (thận bào thai bê), phá tế bào và thu kháng nguyên nội bào NP của virus cúm
để sử dụng cho phản ứng CF. Phản ứng CF với kháng nguyên NP là phản ứng
đặc hiệu type nên cĩ thể phát hiện được kháng thể kháng tất cả các phân type cúm A và chỉ phân biệt được kháng thể kháng các type cúm A, B, C.
+ Phản ứng ức chế ngưng kết hồng cầu: ðây là kỹ thuật quan trọng nhất, thường được sử dụng trong chẩn đốn huyết thanh học của cúm, xác định phân type virus cúm A, đánh giá hiệu lực vaccine cúm. Kháng nguyên được sử
dụng là kháng nguyên HA của hạt virus cúm tồn phần khơng cần tinh chế (cĩ thể ở dạng dịch niệu tươi, cơ đặc hoặc đơng khơ). Về nguyên tắc, kháng thể
kháng HA sẽ phong bế khả năng ngưng kết hồng cầu của virus làm cho hồng cầu khơng bị ngưng kết và lắng xuống. Hồng cầu sử dụng cho phản ứng này là hồng cầu gà, hồng cầu chuột lang hoặc hồng cầu người nhĩm máu O.
+ Phản ứng trung hịa: Phản ứng trung hịa virus cho kết quả tương
đồng với phản ứng ức chế ngưng kết hồng cầu, vì kháng thể kháng HA thường cũng là kháng thể trung hịa virus. Tuy nhiên phản ứng trung hịa cĩ
độ nhạy cao hơn nhưng thực hiện phức tạp hơn và tốn kém hơn. Phản ứng Nt thường được thực hiện trên các phiến nhựa vi lượng nuơi tế bào. Tế bào được sử dụng cho phản ứng này thường là MDCK.
+ Kỹ thuật ELISA: Thường được sử dụng trong chẩn đốn cúm B với kháng nguyên NP, vì đối với cúm B, đặc biệt là ở trẻ em, phản ứng ức chế
ngưng kết hồng cầu và phản ứng trung hịa cĩ độ nhạy rất thấp. ELISA với kháng nguyên HA tinh chế cịn được sử dụng trong các phịng thí nghiệm nghiên cứu để xác định kháng thể đặc hiệu isotype trong dịch tiết của đường hơ hấp.
+ Phản ứng khuếch tán miễn dịch: Sử dụng kháng thể kháng kháng nguyên HA tinh chế, thường được sử dụng để định lượng kháng nguyên HA trong kiểm định vaccine cúm.
19