Nguyên lý:
Để xác định đạm trong thực phẩm người ta dung H2SO4 đậm đặc và chất xúc tác đặc biệt là CuSO4 và K2SO4 theo tỷ lệ 1/10 hoặc 1/3 để vô cơ hóa mục đích để chuyển toàn bộ đạm trong thực phẩm về dạng muối (NH4)2SO4. Sau đó dùng NaOH đẩy NH3 ra, dùng hơi nước lôi cuốn NH3 ra khỏi thiết bị chưng cất vào cốc hứng chứa H2SO4 0.1N chuẩn độ lại H2SO4 dư.
Các phản ứng:
(NH4)2SO4 + 2NaOH Na2SO4 + 2NH3 + 2H2O 2NH3 + H2SO4 (NH4)2SO4
NaOH + H2SO4dư Na2SO4 + 2H2O
Cách tiến hành
- lấy chính xác 1g mẫu cho cẩn thận vào bình kjeldahl, thêm 2g hỗn hợp chất xúc tác (CuSO4/ K2SO4) và 10ml H2SO4 đậm đặc để nghiêng trên bếp đun từ từ. Trong quá trình vô cơ hóa màu sắc của mẫu chuyển từ màu nâu đen sang màu vàng rồi xanh trong hoặc không màu là được.
- Rửa thiết bị chưng cất: Tiến hành sục rửa thiết bị chưng cất và kiểm tra các khớp nối phải đảm bảo độ kín.
- Chuẩn bị cốc hứng: Cho vào cốc hứng 10ml dung dịch H2SO4 0.1N và vài giọt metyl đỏ, đặt cốc hứng ngập dưới đầu ống sinh hàn của thiết bị chưng cất. Sau đó cho
NH2 COOH
Xt, t°c
mẫu đã vô cơ hóa vào bình cầu chứa mẫu, thêm vài giọt phenolphtalein và cho từ từ dung dịch NaOH 40% cho tới khi có màu hồng đậy kín các khớp nối và tiến hành chưng cất lôi cuốn hơi nước. Định lượng trực tiếp NH3 bay ra bằng H2SO4 0.1N dư có trong cốc hứng dùng NaOH 0.1N chuẩn độ lại lượng H2SO4 dư đó
Tính kết quả:
Hàm lượng đạm toàn phần theo phần trăm:
tp
Trong đó:
A: là số ml d2 H2SO4 0.1N dùng trong cốc hứng.
B: là số ml d2 NaOH 0.1N dùng trong chuẩn độ.
P: là trọng lượng mẫu
0.0014: là số gam Nitơ tương ứng với 1ml d2 H2SO4 0.1N