Sau yếu tố nhiệt độ thì thời gian chiết tách cũng ảnh hưởng nhiều đến khả năng chiết tách các hợp chất cần phân tích.Trong thí nghiệm tiến hành ổn định các yếu tố khác và thay đổi thời gian chiết tách mẫu ở các thời điểm khác nhau. Kết quả thể hiện ở bảng 4.7
Bảng 4.7: Hàm lượng TPC thu nhận với các thời gian ly trích khác nhau Thời gian chiết
(phút) Hàm lượng TPC* (mg GAE/100g lúa) 90 32,993 0,639a 150 35,826 1,655b 180 45,311 0,900c
210 40,829 0,856d 270 40,337 0,694d
(*Kết quả được tính trên % vật chất lúa khô)
(Các giá trị trong cùng một cột có cùng chữ cái thì khác biệt không có ý nghĩa thống kê (p>0,05))
Từ số liệu thực nghiệm cho thấy khi tăng dần thời gian chiết thì hàm lượng TPC thu được càng tăng và đạt cao nhất khi thực hiện chiết ở 180 phút và có sự khác biệt có ý nghĩa giữa các nghiệm thức khác. Khi thực hiện chiết tách với thời gian càng dài cùng với các điều kiện chiết tách phù hợp thì hiệu quả của quá trình chiết tách càng cao. Tuy nhiên, thực hiện chiết tách hợp chất chống oxy hóa nên việc kéo dài thời gian chiết 210-270 phút có thể làm giảm hàm lượng polyphenol tổng số.
Sau khi thực hiện khảo sát mục 4.2.4 và 4.2.5 chúng tôi cũng tiến hành bố trí thí nghiệm tương tác giữa 2 yếu tố quan trọng trong quá trình chiết tách là nhiệt độ và thời gian. Với yếu tố nhiệt độ lấy 3 mức độ là 35; 40 và 45oC và mức độ thời gian là 150, 180 và 210 phút. Tiến hành thí nghiệm với 9 nghiệm thức và 3 lần lặp lại nhưng kết quả thống kê không thấy sự tương tác giữa hai yếu tố này. Vì thế kết quả được phép không trình bày trong luận văn này.
Tóm lại: Từ kết quả khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến hiệu quả chiết tách hàm lượng polypheol tổng số trong giống lúa huyết rồng chúng tôi sẽ chọn điều kiện ly trích tốt nhất bảng 4.8 để tiến hành chiết tách các hợp chất polyphenol khi thực hiện thí nghiệm nẩy mầm giống lúa này theo thời gian.
Bảng 4.8: Điều kiện ly trích tối ưu các hợp chất polyphenol
Dung môi Metanol Số lần chiết (lần) 3 Tỉ lệ dung môi 1:6 Thời gian chiết (phút) 180 Nhiệt độ chiết 40oC