Cỏc chủng virus cường ủộc A/H5N1 sau 1996, qua thời gian tiến húa, cú xu hướng biến ủổi nội gen nhằm tăng tớnh gõy bệnh, và thay ủổi thành phần nội gen kháng nguyên làm mất tương quan miễn dịch giữa chúng và các chủng vacxin ủược tạo ra. Do vậy, vấn ủề này phải ủược hết sức chỳ ý trong chiến lược kiến tạo vacxin, cũng như sử dụng vacxin ủược tạo ra (Horimoto và Kawaoka, 1994) Trong tự nhiên, “lệch kháng nguyên” và “glycosyl hóa” là các hiện tượng xảy ra liên tục theo thời gian, còn “trộn kháng nguyên” tái tổ hợp subtype Hemagglutinin (HA) và Neuraminidase (NA) thường ủịnh kỳ xảy ra giữa cỏc loài mắc nhằm tạo nên các biến thể virus cúm mới mà hệ miễn dịch của cơ thể vật chủ khụng cú khả năng nhận dạng ủỏp ứng và kịp hỡnh thành miễn dịch. H5N1 sử dụng thụ thể sialic xâm nhập tế bào (Xu và cs, 1999).
ðối với bệnh truyền nhiễm, vacxin ủược coi là biện phỏp cú tớnh chiến lược, nhằm ngăn chặn lây lan, tạo bảo hộ miễn dịch (Subbarao và Luke, 2007).
Khỏng thể ủặc hiệu cú thể ủược cơ thể sinh ra do kớch thớch của khỏng nguyờn
Trường ðại Học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn tiến sĩ khoa học nông nghiệp
41
trong vacxin, và ủú là cỏc khỏng thể khỏng HA, NA, MA và nhiều loại hỡnh khỏc của virus ủương nhiễm, gúp phần vụ hiệu húa virus cỳm ủỳng ủối tượng khi chúng xâm nhập vào. Có nhiều loại kháng thể, nhưng trước hết chỉ kháng thể kháng HA(H5) có vai trò tiên quyết quan trọng trong quá trình trung hòa virus cho bảo hộ miễn dịch. Các vacxin phòng bệnh hiện nay dựa trên cơ sở hai loại chính: vacxin truyền thống và vacxin thế hệ mới (Subbarao và Joseph, 2007;
Capua và Alexander, 2008).
Vacxin truyền thống: bao gồm vacxin vụ hoạt ủồng chủng và dị chủng.
Vacxin vụ hoạt ủồng chủng (homologous vacxin), ủú là cỏc loại vacxin ủược sản xuất chứa cùng những chủng virus cúm gà giống như chủng gây bệnh trên thực ủịa (Swayne, 1999). Vacxin vụ hoạt dị chủng (heterologous vacxin) là vacxin sử dụng cỏc chủng virus cú khỏng nguyờn HA giống chủng virus trờn thực ủịa, nhưng có kháng nguyên NA dị chủng.
Vacxin thế hệ mới hay vacxin cụng nghệ gen: là loại vacxin ủược sản xuất dựa trờn sử dụng kỹ thuật gen loại bỏ cỏc vựng “gen ủộc” ủang ủược nghiờn cứu và ủưa vào sử dụng phổ biến, bao gồm:
- Vacxin tỏi tổ hợp cú vector dẫn truyền: sử dụng virus ủậu gia cầm làm vector tái tổ hợp song song gen H5 và N1 phòng chống virus type A/H5N1 (Pfeiffer và cs, 2010). Ví dụ, hãng Merial của Pháp sản xuất vacxin TrovacAIV- H5 lấy nguồn gen H5 từ chủng A/Turkey/Ireland/83 (H5N2), sử dụng ủược cho gia cầm lúc 1 ngày tuổi.
- Vacxin dưới nhóm chứa protein kháng nguyên NA, HA tái tổ hợp và tách chiết làm vacxin (Perkin và Swayne, 2002; Pfeiffer và cs, 2009).
- Vacxin tái tổ hợp có vector dẫn truyền: sử dụng adenovirus hoặc virus Newcastle hoặc virus ủậu chim làm vector dẫn truyền, lắp ghộp gen khỏng nguyên H5 vào hệ gen của adenovirus, tạo nên virus tái tổ hợp làm vacxin phòng chống virus cúm A/H5N1 (Hoelscher và cs, 2006; Gao và cs, 2006; Qiao và cs, 2006).
- Vacxin DNA: sản phẩm DNA plasmid tái tổ hợp chứa gen HA, NA, NP, M2 ủơn lẻ hoặc ủa gen (Kilpatrick và cs, 2006, Kaewcharoen và cs, 2005).
- Vacxin nhược ủộc virus cỳm nhõn tạo: ủược sản xuất bằng kỹ thuật di truyền ngược (reverse genetics), ủú là việc lắp ghộp virus cỳm nhõn tạo chứa ủầy ủủ hệ gen, trong ủú cỏc gen khỏng nguyờn H5 cú vựng "ủộc" ủó ủược biến ủổi bằng kỹ thuật gen (Liu và cs., 2003; Swayne và Suarez, 2000). Trung Quốc cũng là nước sản xuất nhiều giống virus vacxin chống cúm, ví dụ, vacxin vô hoạt nhũ dầu ủơn chủng lấy nguồn gen H5 và N2 từ chủng A/Turkey/England/N- 28/73(H5N2), loại subtype H5N2 cú ủộc lực yếu; hay giống vacxin vụ hoạt nhũ dầu ủơn chủng lấy nguồn gen H5 và N1 từ chủng A/Goose/Guangdong/1996(H5N1), loại cú ủộc lực yếu (Swayne và Suarez, 2000;
Pfeiffer và cs, 2010). Cỏc loại vacxin này ủó ủược nhập và sử dụng tại Việt Nam từ năm 2006 (Tô Long Thành, 2006).
1.5.1. Tình hình sử dụng vacxin cúm gia cầm trên thế giới
Số lượng vacxin ủó ủược sử dụng trờn thực ủịa chưa ủược thụng bỏo cụ thể, nhưng cú một số nguồn thụng tin cho rằng Mexico ủó sử dụng 1 tỷ 300 triệu liều virus vụ hoạt và 850 triệu liều vacxin tỏi tổ hợp ủậu gà trong chương trỡnh sử dụng vacxin chống bệnh cỳm từ ủầu thỏng 1/1995 và ủó thanh toỏn ủược bệnh cỳm gia cầm thể ủộc lực cao do virus H5N2 và thỏng 6/1995, mặc dự virus H5N2 chủng ủộc lực thấp vẫn lưu hành. Indonesia cũng sử dụng vacxin AI H5 vụ hoạt.
Từ năm 1995, Pakistan cũng sử dụng vacxin phòng cúm ở cả ổ dịch H7N3 thể ủộc lực cao. Cỏc vacxin vụ hoạt chế từ chủng virus H9N2 ủộc lực thấp ủó và ựang ựược sử dụng ở một số nước châu Á, vùng Cận đông và đông Âu. Gần ủõy, vacxin vụ hoạt nhũ dầu H7 ủó ủược dựng cho cỏc vựng nguy cơ cao ở phớa Bắc Italia và tại một công ty nuôi gà con một ngày tuổi ở Mỹ.
Trung Quốc là nước sử dụng nhiều vacxin cỳm nhất. Trung Quốc ủó cú bản tường trỡnh về kết quả của cỏc loại vacxin ủang ủược sử dụng tại nước này, bao gồm:
- Vacxin vụ hoạt chủng H5, N-28: ủược phờ chuẩn từ thỏng 12/2003 và ủược sử dụng rộng rói ở Trung Quốc trong cỏc ổ dịch cỳm gia cầm thể ủộc lực cao vào ủầu năm 2004.
Trường ðại Học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn tiến sĩ khoa học nông nghiệp
43
Bảng1.3. Một số loại vacxin phũng cỳm gia cầm H5N1 ủang ủược sử dụng trên thế giới (FAO/EMPRESS/2009)
Stt Chủng virus sử dụng Subtype Loại vacxin Nước sản
xuất) 1 A/Chicken/Mexico/232/94/CPA A/H5N2, ủộc lực thấp Vụ hoạt nhũ dầu Mexico 2 A/TY/California/20902/2002 A/H5N2, ủộc lực thấp Vụ hoạt nhũ dầu Mỹ
3 A/Turkey/England/N-28/73 A/H5N2, ủộc lực thấp Vụ hoạt nhũ dầu Trung Quốc, Indonesia 4 A/Turkey/
Minnesota/3689-1551/81
A/H5N2 Vô hoạt nhũ dầu ðức
5 A/duck/Potsdam/1402/86 A/H5N2, ủộc lực thấp Vụ hoạt nhũ dầu Hà Lan 6 A/Turkey/Wisconsin/68 A/H5N9, ủộc lực thấp Vụ hoạt nhũ dầu Mỹ; Italia 7 A/chicken/Italy/22A/98 A/H5N9, ủộc lực thấp Vụ hoạt nhũ dầu Mỹ; Italia 8 A/duck/Potsdam/2243/84 A/H5N6, ủộc lực thấp Vụ hoạt nhũ dầu Hà Lan 9 A/Goose/Guangdong/1996 A/H5N1, ủộc lực cao Vụ hoạt nhũ dầu Trung Quốc 10 A/Ck/Legok/2003 A/H5N1, ủộc lực cao Vụ hoạt nhũ dầu Indonesia 11 A/Ck/Mansehra/2006 A/H5N1, ủộc lực cao Vụ hoạt nhũ dầu Pakistan 12 rg-A/ck/VN/C58/04 mang gen N3
từ chủng
A/Duck/Germany/1215/73 (H2N3) và 6 nội gen của chủng PR8
A/H5N3 RG Di truyền ngược, nhũ dầu
Mỹ
13 A/Goose/Guangdong/1996 (Re-1), và 6 nội gen của chủng PR8
A/H5N1 RG Di truyền ngược, nhũ dầu
Trung Quốc
14 BHG/QH/05 (Re-3) và 6 nội gen của chủng PR8
A/H5N1 RG Di truyền ngược, nhũ dầu
Trung Quốc 15 DK/AH/06 (Re-5) và 6 nội gen của
chủng PR8
A/H5N1 RG Di truyền ngược, nhũ dầu
Trung Quốc 16 CK/SX/06 (Re-4) và 6 nội gen của
chủng PR8
A/H5N1 RG Di truyền ngược, nhũ dầu
Trung Quốc 17 Vacxin virus ủậu với cDNA của
gen H5 và N1 lấy từ chủng A/Goose/Guangdong/1996
A/H5 phái sinh từ H5N1 ủộc lực cao
Tái tổ hợp sống, ủụng khụ
Trung Quốc
18 Vacxin Newcastle sống (LaSota) và gen H5 của chủng A/Barheadedgoose/Qinghai/3/2005
A/H5N1, ủộc lực cao Newcastle tỏi tổ hơp sống mang gen H5, ủụng khụ
Trung Quốc
19 Virus ủậu với cDNA của gen H5 lấy từ chủng from A/Turkey/
Ireland/83
A/H5 phái sinh từ H5N8 ủộc lực thấp
Tỏi tổ hợp, ủụng khô, tiêm dưới da
Mỹ
- Vacxin vô hoạt virus cúm sản xuất theo công nghệ di truyền ngược (subtype H5N1, chủng Re-1 thuộc clade 0): ủược phờ chuẩn thỏng 1/2005.
Vacxin ủược ủỏnh giỏ là rất cú hiệu quả trong tạo miễn dịch chống cỳm với hiệu giá kháng thể cao và thời gian bảo hộ dài hơn. Bên cạnh việc sử dụng vacxin Re-
1, Trung Quốc cũn sử dụng một số loại vacxin khỏc ủược sản xuất theo cựng công nghệ là vacxin Re-3, vacxin Re-4 và vacxin Re-5. Bốn loại vacxin sản xuất theo cụng nghệ di truyền ngược ủược sản xuất từ 4 chủng virus cỳm gia cầm khác nhau: Vacxin Re-1 sử dụng gen H5 và N1 của virus A/Goose/GD/1/96 (clade 0); Vacxin Re-3 sử dụng gen H5 và N1 của virus A/bar-headed goose/Qinghai/3/2005 (clade 2.2); Vacxin Re-4 sử dụng gen H5 và N1 của virus A/chicken/Shanxi/2/2006 (clade 7); và Vacxin Re-5 sử dụng gen H5 và N1 của virus A/duck/Anhui/1/2006 (clade 2.3.4).
Theo Báo cáo về kinh nghiệm sử dụng vacxin cúm gia cầm của Trung Quốc (Chen, 2009) từ năm 2004 ủến năm 2008, Trung Quốc ủó sử dụng 22,64 tỷ liều vacxin Re-1, 1,26 tỷ liều vacxin Re-4 và 4,4 tỷ liều vacxin Re-5.
- Vacxin sống virus ủậu tỏi tổ hợp phũng cỳm gia cầm H5: ủược phờ chuẩn thỏng 1/2005 và ủược nhiều nước sử dụng như Trung Quốc, Mexico... sử dụng loại vacxin này cú thể phõn biệt ủược miễn dịch do tiờm phũng vacxin hay bị nhiễm tự nhiên.
1.5.2. Tình hình sử sụng vacxin cúm gia cầm tại Việt Nam
Từ tháng 7/2005, “Dự án sử dụng vacxin nhằm khống chế và thanh toán bệnh cỳm gia cầm” ủó triển khai tại Việt Nam. Nước ta ủó tiến hành tiờm phũng thử nghiệm cỏc loại vacxin cỳm gia cầm ngoại nhập trờn ủịa bàn tỉnh Nam ðịnh và Tiền Giang. Sau ủú ủó triển khai tiờm phũng trờn ủịa bàn cả nước và thực hiện liờn tục qua cỏc năm. Mỗi năm cú 2 ủợt tiờm phũng vào thỏng 4-5 và thỏng 9-10, trước thời ủiểm dịch cỳm gia cầm cú nguy cơ bựng phỏt cao nhất. Một số loại vacxin ủược sử dụng ở Việt Nam như:
- Vacxin nhũ dầu vô hoạt H5N2 (Trung Quốc): là loại vacxin dị chủng bất hoạt, sử dụng chủng virus A/Turkey/England/N28/73 (H5N2).
- Vacxin di truyền ngược vô hoạt dạng nhũ dầu H5N1 (Trung Quốc): là loại vacxin ủồng chủng bất hoạt (Re-1) sử dụng chủng virus A/Goose/Guangdong/1/96 và (Re-5) sử dụng chủng A/Duck/Anhui/2006. Trong ủú vacxin Re-1 ủó ủược sử dụng từ năm 2005, cũn vacxin Re-5 mới ủược ủưa
Trường ðại Học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn tiến sĩ khoa học nông nghiệp
45
vào sử dụng từ năm 2011 thay cho vacxin Re-1 vì công ty Trung Quốc sản xuất và cung cấp loại vacxin Re-1 ngừng sản xuất loại vacxin Re-1.
Bảng 1.4. Kết quả tiêm phòng vacxin cúm gia cầm chương trình quốc gia (tổng hợp từ báo cáo của Cục Thú y qua các năm2005-2010)
- Vacxin Nobilis Influenza H5 (Hà Lan): ủõy là loại vacxin dị chủng, sử dụng chủng virus A/chicken/Mexico/232/94/CPA (H5N2).
- Vacxin Trovac AIV H5 (vacxin ủậu-cỳm dạng sống, ủụng khụ): là vacxin chứa virus ủậu gà sống làm vectơ cú mang gen virus cỳm gia cầm chủng A, sử dụng chủng A/Turkey/Ireland/1378/83. Tuy nhiên vacxin này hiện nay khụng ủược sử dụng nữa do khụng hiệu quả ở ủiều kiện Việt Nam, và nhiều ủàn gà sử dụng vacxin này không có hiệu quả bảo hộ chống lại virus A/H5N1 ở Việt Nam (Báo cáo của Trung tâm Chẩn đốn Thú y Trung ương)
Năm
Số liều vacxin tiêm cho gà
(triệu)
Số liều vacxin tiêm cho vịt
(triệu)
Tổng số liều VX cho gà và vịt
(triệu)
2005 166,40 78,10 244,5
2006 – ðợt 1 100,60 35,40 136
2006 – ðợt 2 91,30 47,33 138,6
2007 – ðợt 1 101,20 89,30 190,5
2007 – ðợt 2 90,46 65,97 156,43
2008 – ðợt 1 84,32 66,42 150,74
2008 – ðợt 2 61,73 55,53 117,26
2009 – ðợt 1 84,86 67,62 152,48
2009 – ðợt 2 79,07 91,49 170,56
2010 – ðợt 1 89,85 50,77 140,62
2010 – ðợt 2 29,72 42,54 72,26
CHƯƠNG 2