sunphat ƣa nhiệt
Các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat có khả năng sử dụng dầu thô đƣợc cấy hoạt hóa trên môi trƣờng khoáng Postgate B cải tiến chứa 1% NaCl với lactat và axetat làm nguồn cơ chất.. Sau đó, các chủng này đƣợc nuôi cấy trên môi trƣờng khoáng Postgate B cải tiến chứa 1% NaCl có bổ sung lactat (1%) hoặc axetat (1%) để kiểm tra khả năng oxy hóa cơ chất hoàn toàn hay không hoàn toàn. Nếu trên cả hai môi trƣờng lactat và axetat vi khuẩn đều sinh trƣởng tốt, chứng tỏ chủng đó có khả năng oxy hóa hoàn toàn lactat thành CO2 và nƣớc. Nếu chỉ quan sát thấy sự sinh trƣởng trên môi trƣờng lactat là nguồn cơ chất duy nhất, chứng tỏ chủng đó oxy hóa không hoàn toàn cơ chất.
2.2.6. Nghiên cứu khả năng sử dụng dầu thô của các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt sunphat ƣa nhiệt
Các đơn chủng vi khuẩn khử sunphat có khả năng sử dụng dầu thô đƣợc cấy hoạt hóa trên môi trƣờng khoáng Postgate B cải tiến chứa 1% NaCl với lactat và axetat làm nguồn cơ chất. Sau đó, các chủng này đƣợc nuôi cấy trên các môi trƣờng khoáng Postgate B cải tiến chứa 1% NaCl có bổ sung hàm lƣợng dầu thô khác nhau (0,5%; 1%; 3%; 5%; 10%; 20%; 30%). Sự sinh trƣởng của các chủng vi khuẩn khử sunphat này trên dầu thô đƣợc theo dõi hàng ngày trong 3 tuần và tiến hành lấy mẫu phân tích định kỳ sau 1, 4, 7, 10, 14, 21 ngày nuôi cấy. Các mẫu này đƣợc tiến hành xác định hàm lƣợng H2S tạo thành (phƣơng pháp chuẩn độ iot). Ở hàm lƣợng dầu thô mà có hàm lƣợng H2S lớn nhất thì đó là hàm lƣợng dầu thô tối ƣu cho sinh trƣởng của chủng đó.
Xác định hàm lượng H2S bằng phương pháp chuẩn độ iot:
Lƣợng H2S do vi khuẩn khử sunphat sinh ra đƣợc xác định theo phƣơng pháp chuẩn độ iot của Rezinhicop.
- Hút 10 ml mẫu (dịch nuôi cấy) đã lắc đều cho vào bình để chuẩn. - Cho vào bình chuẩn 1ml HCl 10%. Lắc đều trong bình chuẩn.
- Dùng dung dịch Na2S2O3 0,1N chuẩn cho đến khi dung dịch trong bình chuẩn có màu vàng nhạt thì cho 1ml dung dịch tinh bột 1% vào, chuẩn tiếp cho đến khi nào mất màu tím xanh thì thôi.
- Hàm lƣợng H2S sẽ đƣợc xác định theo công thức. 2 1 1 2 2 17000 / H S mau V N V N mg l V m V1, V2: thể tích dung dịch iot, thể tích Na2S2O3. N1, N2: nồng độ iot, nồng độ Na2S2O3.