sinh trƣởng của vi khuẩn khử sunphat trên môi trƣờng dầu thô thì chứng tỏ vi khuẩn khử sunphat của mẫu đó có khả năng sử dụng dầu thô làm nguồn cơ chất.
2.2.2. Đánh giá hàm lƣợng dầu tổng số bị sử dụng bởi vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt
Các mẫu vi khuẩn khử sunphat có khả năng sinh trƣởng tốt trên cơ chất dầu thô (từ thí nghiệm 2.2.1) đƣợc cấy hoạt hóa trên môi trƣờng khoáng Postgate B cải tiến chứa 1% NaCl với lactat và axetat làm nguồn cơ chất. Sau đó, các mẫu này đƣợc nuôi cấy trên môi trƣờng khoáng Postgate B cải tiến chứa 1% NaCl và cơ chất dầu thô 1%. Sau 4 tuần nuôi cấy, hàm lƣợng dầu tổng số và thành phần dầu thô bị sử dụng bởi vi khuẩn khử sunphat sẽ đƣợc xác định bằng phƣơng pháp tách dầu trong nƣớc:
Lọc mẫu nuôi cấy vi khuẩn khử sunphat trong môi trƣờng chứa 1% dầu thô bằng giấy lọc. Dầu và các sản phẩm lơ lửng không tan trong nƣớc đƣợc giữ trên giấy lọc. Giấy lọc sau đó đƣợc đƣợc rửa vài lần bằng cách nhúng trong cốc đựng chloroform và đƣợc thu hồi vào một cốc cân. Sau khi thực hiện xong bƣớc này, phần lớn mẫu dầu sau thí nghiệm còn bám trên thành chai đựng mẫu. Vì vậy, tiến hành tráng rửa chai vài lần bằng chroroform và thu hồi vào cùng cốc cân nói trên. Để dung môi trong cốc cân bay hơi qua đêm ở điều kiện nhiệt độ 20oC. Sau khi bay hơi hết dung môi. Cân cốc cân để xác định khối lƣợng dầu.
2.2.3. Phân lập đơn chủng vi khuẩn khử sunphat ƣa nhiệt có khả năng sử dụng dầu thô dầu thô
Các mẫu vi khuẩn khử sunphat có khả năng sử dụng dầu thô cao (từ thí nghiệm 2.2.2) đƣợc cấy hoạt hóa trên môi trƣờng môi trƣờng khoáng Postgate B cải tiến chứa 1% NaCl với lactat và axetat làm nguồn cơ chất. Sau đó, các mẫu này đƣợc pha loãng đến các nồng độ thích hợp và nuôi cấy trên môi trƣờng thạch khoáng Postgate B cải tiến chứa 1% NaCl với dầu thô (1%) là nguồn cơ chất duy nhất. Sự sinh trƣởng của các mẫu vi khuẩn khử sunphat này trên môi trƣờng thạch đƣợc theo dõi hàng ngày trong 1 tháng. Các khuẩn lạc chiếm ƣu thế và các khuẩn lạc có hình thái khác nhau đƣợc tách riêng và cấy truyền trên môi trƣờng dầu thô 1% để giữ giống và dùng trong
các nghiên cứu tiếp theo. Khi đó ta thu đƣợc các chủng thuần khiết (sau khi cấy lại trên môi trƣờng thạch để kiểm tra độ sạch của chủng đã phân lập).