M Ở ðẦ U
3.2Thành phần nấm bệnh và tỷ lệ nhiễm nấm Aspergillus niger trờn hạt
giống lạc thu thập tại Hà Nội
để ủỏnh giỏ tỡnh hỡnh nhiễm nấm trờn hạt giống lạc chỳng tụi ủó thu thập giống lạc BT14 ởủịa bàn xung quanh Gia Lõm chủ yếu là ở cỏc xó đỡnh Xuyờn, Dương Quang. Chỳng tụi ủó xỏc ủịnh ủược 6 loài nấm bệnh trờn hạt giống lạc trong ủú cú 4 loài ủó ủược cụng bố là nấm hại trờn lạc (Kulwant Singh và c.t, 1991) (M.J. Richardson, 1990) Gồm Aspergillus niger van
Tiegh, Aspergillus flavus Link, Boytryodiplodia phaseoly (Maubl.),
Xuất hiện phổ biến trong số cỏc loài nấm hại hạt trờn là nhúm nấm
Aspergillus spp. trong ủú Ạ niger cú tỷ lệ nhiễm 23%, Ạ flavus cú tỷ lệ nhiễm 15.8%, ớt phổ biến là Boytryodiplodia phaseoly (Maubl.) với tỷ lệ nhiễm là 9.5% và rất ớt phổ biến là Penicillium spp. cú tỷ lệ hạt nhiễm là 4.2%.
Cỏc nấm hại hạt phần lớn thuộc lớp nấm bất toàn, bộ Moniliales trong ủú họ Moniliaceae chiếm ủa số.
Bảng 3.2: Thành phần nấm bệnh trờn cỏc mẫu hạt giống lạc BT14 thu thập vụ thu ủụng năm 2012
Stt Tờn khoa học Họ Bộ Mức phổ biến
1 Aspergillus niger van Tiegh Moniliaceae Moniliales ++ 2 Aspergillus flavus Link Moniliaceae Moniliales ++ 3 Boytryodiplodia phaseoly (Maubl.) Sphaeropsidacea Moniliales +
4 Penicillium spp. Moniliaceae Moniliales ổ
5 Mucor spp. Mucoraceae Mucorales +++
6 Rhizopus spp. Mucoraceae Mucorales ổ
Ghi chỳ : ổ Rất ớt phổ biến (tỉ lệ hạt nhiễm < 5%) + Ít phổ biến (Tỉ lệ hạt nhiễm < 5-15%) ++ Phổ biến (tỉ lệ hạt nhiễm < 15-30%) +++ rất phổ biến (Tỉ lệ hạt nhiễm >30 %)
Ngoài ra, trờn hạt giống lạc mà chỳng tụi thu thập ủược cũn cú nhúm nấm mốc bỏm trờn vỏ hạt giống lạc rất phổ biến chỳng chiếm tỷ lệ khỏ cao riờng nấm Mucor spp cú tỷ lệ hạt nhiễm 40.0% chỳng ảnh hưởng rất lớn tới tỷ lệ nảy mầm của hạt giống lạc bởi sự phỏt triển tản nấm rất nhanh của loài nấm này trong ủiều kiện nhiệt ủộ phũng.
3.3 Diễn biến bệnh hộo rũ gốc mốc trắng và hộo rũ gốc mốc ủen hại giống lạc BT 14 tại 3 xó của Gia Lõm, Hà Nội vụ ủụng năm 2012
Bệnh hộo rũ gốc mốc trắng và hộo rũ gốc mốc ủen trờn lạc vụ ủụng năm 2012 ủó ủược nghiờn cứu bởi rất nhiều tỏc giả và cho thấy nguồn bệnh của cỏc bệnh này ủều cú nguồn gốc từ trong ủất, hạt giống và trờn tàn dư cõy
trồng. Do ủặc ủiểm của 3 vựng ủất Kim Sơn, đỡnh Xuyờn, Dương Quang quanh năm trồng lạc nờn nguồn bệnh của hai bệnh hộo rũ gốc mốc trắng và hộo rũ gốc mốc ủen luụn tiềm ẩn và gõy hại nặng cho giai ủoạn cõy con. Do ủú chỳng tụi tiến hành ủiều tra tỡnh hỡnh và diễn biến của 2 bệnh này từ giai ủoạn cõy con ủến giai ủoạn ủõm tia tạo củ. Kết quảủiều tra ủược trỡnh bày ở bảng 3.3 và biểu ủồ 3.1, biểu ủồ 3.2
Bảng 3.3: Diễn biến bệnh hộo rũ gốc mốc trắng và hộo rũ gốc mốc ủen hại giống lạc BT 14 tại 3 xó của Gia Lõm, Hà Nội vụ ủụng năm 2012
Tỷ lệ bệnh (%)
Hộo rũ gốc mốc ủen Hộo rũ gốc mốc trắng
Giai ủoạn
sinh trưởng Kim Sơn đỡnh Xuyờn Dương Quang Kim Sơn đỡnh Xuyờn Dương Quang Cõy con 0,2 0,6 0,3 1,3 1,5 0,4 Cõy con 0,6 0,9 0,8 1,6 1,8 0,7 Phõn cành 0,9 1,2 1,4 1,8 2,4 1,0 Phõn cành Ờ ra hoa 1,0 1,6 1,6 1,9 2,8 1,7 Ra hoa 1,8 1,9 1,8 2,4 3,1 2,4 đõm tia 2,0 3,4 2,6 2,8 3,6 2,8 đõm tia 2,4 3,8 2,9 3,4 3,8 3,0 Biểu ủồ 3.1 : Diễn biến bệnh hộo rũ gốc mốc ủen trờn giống lạc BT 14 tại Gia Lõm, Hà Nội vụủụng năm 2012
Biểu ủồ 3.2 : Diễn biến bệnh hộo rũ gốc mốc trắng trờn giống lạc BT 14 tại Gia Lõm, Hà Nội vụủụng năm 2012
Qua bảng 3.3 và biểu ủồ 3.1 và biểu ủồ 3.2 nhận xột:
Trong giai ủoạn cõy lạc ở thời kỳ cõy con ủến thời kỳủõm tia tạo củ là giai ủoạn mẫn cảm với cỏc bệnh nấm cú nguồn gốc từ ủất, nhất là cỏc bệnh vựng rễ hộo rũ gốc mốc trắng do nấm Sclerotium rolfsii và hộo rũ gốc mốc ủen do nấm Aspergillus niger. Hai bệnh này gõy hại hết cỏc giai ủoạn từ cõy con ủến giai ủoạn ủõm tia tạo củở cả 3 xó Kim Xuyờn, đỡnh Xuyờn và Kim Sơn. Tuy nhiờn, ở cỏc xó ủiều tra khỏc nhau thỡ tỷ lệ cõy nhiễm 2 bệnh trờn là khỏc nhaụ
* Bệnh hộo rũ gốc mốc ủen Aspergillus niger
Trong lần ủiều tra ủầu tiờn, tương ứng với giai ủoạn cõy con thấy bệnh xuất hiện với tỷ lệ từ 0,2%- 0,6% ở cỏc ủiểm ủiều trạ Cao nhất ởđỡnh Xuyờn với tỷ lệ bệnh 0,6% thấp nhất là ở Kim Sơn là 0,2% sau ủú ủến xó Dương Quang với tỷ lệ 0,3% . Tỷ lệ cõy bị nhiễm tăng dần ủến giai ủoạn ủõm tia tạo củ với tỷ lệ nhiễm 2,4% - 3,8%. Cao nhất vẫn là ởđỡnh Xuyờn và thấp nhất ở Kim Sơn sau ủú ủến xó Dương quang tỷ lệ bệnh 2,9%
* Bệnh hộo rũ gốc mốc trắng Sclerotium rolfsii
Bệnh hộo rũ gốc mốc trắng cũng xuất hiện cựng thời ủiểm mà chỳng tụi ủiều tra lần ủầu tiờn ở giai ủoạn cõy con với tỷ lệ bệnh giao ủộng từ 0,4 ủến 1,5% Cao nhất là ở đỡnh Xuyờn với tỷ lệ bệnh là 1,5% thấp nhất là Dương Quang với tỷ lệ cõy bị bệnh là 0,4% tiếp ủú ủến xó Kim Sơn 1,3%. Bệnh hộo rũ gốc mốc trắng cũng như bệnh hộo rũ gốc mốc ủen tỷ lệ bệnh tăng dần từ giai ủoạn cõy con ủến giai ủoạn cõy ủõm tia tạo củ. đặc biệt bệnh tăng nhanh vào cuối giai ủoạn ủiều tra từ cuối thỏng 10 ủến thỏng 11 ủõy là giai ủoạn cõy ra hoa ủõm tia tạo củ gặp ủiều kiện thời tiết bất thường nờn tỷ lệ bệnh tăng nhanh. Tỷ lệ bệnh hộo rũ gốc mốc trắng cao nhất ởđỡnh Xuyờn với tỷ lệ bệnh 3,8% sau ủú ủến Kim Sơn tỷ lệ bệnh 3,4 % và thấp nhất là Dương Quang là 3,0%.
3.4 Nghiờn cứu ảnh hưởng của một số dịch chiết thực vất và nấm ủối khỏng ủến nấm gõy bệnh hộo rũ gốc mốc ủen và hộo rũ gốc mốc trắng phõn lập trờn mẫu lạc tại Gia Lõm Hà Nộị
3.4.1. Ảnh hưởng của dịch chiết hành, tỏi, sả ủến nấm Sclerotium rolfsii gõy bệnh hộo rũ gốc mốc trắng trờn lạc. gõy bệnh hộo rũ gốc mốc trắng trờn lạc. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Cỏc mẫu lạc trong quỏ trỡnh ủiều tra ủược chỳng tụi phõn lập và thử hiệu lực ức chế của một số dịch chiết thực vật chiết suất từ hành, tỏi, sảở cỏc nồng ủộ 5%, 10%, 15% sau ủú bổ sung vào mụi trường PDA và theo dừi hiệu quảức chế nấm của cỏc loại dịch chiết này thụng qua theo dừi ủường kớnh tản nấm Sclerotium rolfsii trờn mụi trường cú bổ sung dịch chiết ở cỏc nồng ủộ khỏc nhau và mụi trường PDA thụng thường làm ủối chứng. Theo dừi ủường kỡnh tản nấm trong 7 ngày ủể xỏc ủịnh hiệu quảức chế nấm Sclerotium rolfsii của cỏc loại dịch chiết. Kết quả thớ nghiệm thể hiện ở bảng 3.4 và biểu ủồ 3.3
Bảng 3.4: Ảnh hưởng của dịch chiết hành, tỏi, sả ủến nấm Sclerotium rolfsii gõy bệnh hộo rũ gốc mốc trắng trờn mụi trường PDA
đường kớnh tản nấm S. rolfsii (mm) Cụng thức
Nồng ủộ
(%) Ngày 1 Ngày 2 Ngày 3 Ngày 4 Ngày 5 Ngày 6
Ngày 7 T 5 5 0,8d 2,0 3,5 4,7 12,2 18,0 23,3 T10 10 0,0 d 0,0 0,0 0,0 0,0 1,0 2,1 T 15 15 0,0 d 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 H5 5 7,8 a 14,7 19,5 28,2 49,5 66,3 90,0 H10 10 5,5 b 13,8 18,0 24,2 45,2 64,0 90,0 H15 15 4,7 b 11,2 20,3 27,2 44,0 63,0 90,0 S 5 5 8,7 a 13,7 20,3 27,2 53,5 66,5 90,0 S 10 10 7,7 a 13,3 19,5 25,8 51,3 63,83 90,0 S 15 15 6,7 b 12,8 18,2 23,5 49,5 59,17 90,0 đc 8,3 a 15,2 24,7 29,7 54,5 66,83 90,0 LSD (5%) 0,9 1,4 0,9 1,1 1,3 1,9 0,9
Ghi chỳ: T: dịch chiết tỏi; S: dịch chiết sả; H: dịch chiết hành.
Giỏ trị trung bỡnh trong cựng một cột mang chữ cỏi khỏc nhau thỡ sai khỏc cú ý nghĩa thống kờ ở mức α = 0.05
Biểu ủồ 3.3: Hiệu quảức chế nấm Sclerotium rolfsii của một số dịch chiết thực vật trờn mụi trường PDẠ
Theo bảng 3.4 và biểu ủồ 3.3 cỏc dịch chiết hành, tỏi, sảở cỏc nồng ủộ khỏc nhau cú hiệu quảức chế sự phỏt triển của nấm Sclerotium rolfsii là khỏc nhau Riờng dịch chiết tỏi ở cả 3 nồng ủộ 5%, 10%, 15 % là cú hiệu quả ức chế nấm Sclerotium rolfsii tốt nhất sau ngày ủầu tiờn ủường kớnh tản nấm
Sclerotium rolfsii là 0.83mm với nồng ủộ 5% cũn hai cụng thức ở nồng ủộ 10%, 15% ức chế sự phỏt triển của hạch nấm Sclerotinia rolfsii ủến 6 ngày cấy trờn mụi trường PDA ủường kớnh tản nấm của nấm Sclerotium rolfsii trờn mụi trường bổ sung dịch chiết hành 10% là 2.13mm ủối chứng là 90mm ( tản nấm mọc kớn ủĩa và lan lờn nắp) cũn nồng ủộ 15% ức chế nấm Sclerotium rolfsii hoàn toàn. đặc biệt dịch chiết tỏi làm cho tản nấm Sclerotium rolfsii
mọc bất thường so với ủối chứng.
Dịch chiết hành và dịch chiết sả cú hiệu quả ức chế nấm Sclerotium
rolfsii kộm hơn rất nhiều so với dịch chiết tỏị Sau 1 này ủường kớnh tản nấm
Sclerotium rolfsii trờn mụi trường bổ sung dịch chiết hành 5%, 10%, 15% lần lượt là 7.83mm; 5.5mm và 4.67mm. trờn dịch chiết sả là 8.67; 7.67 và 6.67 mm so với ủối chứng là 8.6 mm. Như vậy dịch chiết sảở nồng ủộ 5% , 10% và dịch chiết hành ở nồng ủộ 5% khụng cú hiệu lực ức chế nấm Sclerotium
rolfsii. Dịch chiết sả nồng ủộ 15% và dịch chiết hành ở nồng ủộ 10% và 15% cú hiệu quả thấp, sau 1 ngày và mất hiệu quảức chế sau 7 ngày nuụi cấy trờn mụi trường PDẠ
Như vậy ta cú thể kết luận dịch chiết Tỏi cú hiệu quả ức chế nấm
Sclerotium rolfsii ở cả 3 nồng ủộ nhưng hiệu quả nhất là ở nồng ủộ 10 và 15%. Dịch chiết hành khụng cú hiệu quảức chế Nấm Sclerotium rolfsii ở cả 3 nồng ủộ. Dịch chiết sả chỉ cú khả năng ức chế nấm S.rolfsii ở nồng ủộ 15%.
Hỡnh 3.6 a : Cụng thức ủối chứng Hỡnh 3.6 b: Mụi trường dịch chiết tỏi 1 5%
Hỡnh 3.6 c: Mụi trường dịch chiết tỏi 1 0% Hỡnh 3.6 d: Mụi trường dịch chiết tỏi 5%
Hỡnh 3.6: Tản nấm Sclerotium rolfsii trờn mụi trường bổ sung dịch chiết tỏi 5%, 10%, 15% sau 7 ngàỵ
3.4.2 Ảnh hưởng của dịch chiết hành, tỏi, sảủến nấm Aspergillus niger gõy bệnh hộo rũ gốc mốc ủen trờn lạc. bệnh hộo rũ gốc mốc ủen trờn lạc.
đểủỏnh giỏ ảnh hưởng của dịch chiết hành, tỏi, sảủến nấm Aspergillus
niger trờn mụi trường PDA chỳng tụi tiến hành thớ nghiệm bổ sung cỏc nồng ủộ của dịch chiết Hành, tỏi, sả vào mụi trường PDA sau ủú cấy nấm
Aspergillus niger lờn mụi trường và theo dừi ủường kớnh tản nấm trong 7 ngàỵ Kết quảủược thể hiện ở bảng 3.5 và biểu ủồ 3.4
Bảng 3.5: Ảnh hưởng của dịch chiết hành, tỏi sả ủến nấm Aspergillus niger trờn mụi trường PDA
đường kớnh tản nấm Aspergillus niger (mm) Cụng thức Nồng ủộ (%) Ngày 1 Ngày 2 Ngày 3 Ngày 4 Ngày 5 Ngày 6 Ngày 7 H 5 5 10,2 b 20,5 b 32,0 41,8 49,7 61,3 70,5 a H10 10 9,2 bc 16,5 c 30,5 40,3 49,0 60,2 68,5 a H15 15 9,2 bc 16,3 c 29,8 39,8 48,8 57,3 68,7 a T 5 5 5,0 d 5,5 e 8,3 13,5 18,5 24,7 32,2 c T 10 10 5,0 d 5,0 e 6,3 6,7 11,7 16,3 24,0 d T 15 15 5,0 d 5,0 e 5,0 5,0 7,8 10,0 13,0 e S 15 15 8,8 c 14,7 d 23,2 33,3 43,0 51,3 58,3 b đC 15,0 a 23,0 a 31,5 45,0 53,8 64,3 72,7 a LSD 5% 1,08 1,6 1,7 2,1 2,4 3,9 5,5
Ghi chỳ: T: dịch chiết tỏi; S: dịch chiết sả; H: dịch chiết hành.
Giỏ trị trung bỡnh trong cựng một cột mang chữ cỏi khỏc nhau thỡ sai khỏc cú ý nghĩa thống kờ ở mức α = 0.05 (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Biểu đồ 3.4: Ảnh hưởng của dịch chiết hành, tỏi, sảủến nấm Ạ niger trờn mụi trường PDA
Theo bảng 3.5 và biểu ủồ 3.4 cỏc dịch chiết hành, tỏi, sảở cỏc nồng ủộ khỏc nhau cú hiệu quảức chế sự phỏt triển của nấm Aspergillus niger là khỏc nhau Riờng dịch chiết tỏi ở cả 3 nồng ủộ 5%, 10%, 15 % là cú hiệu quả ức chế nấm Aspergillus niger tốt nhất. Ở nồng ủộ 5% dịch chiết tỏi ủó ức chế nấm ủến ngày thứ 2 mới bắt ủầu thấy tản nấm mới mọc ra từ phần tản nấm cấỵ Cụng thức dịch chiết tỏi ở nồng ủộ 10% ức chế nấm ủến ngày thứ 3 mới bắt ủầu mọc, cũn ở nồng ủộ 15% ức chế sự phỏt triển của nấm Aspergillus
niger ủến ngày thứ 5. Trong khi ủú ủối chứng ủường kớnh tản nấm
Aspergillus niger cấy trờn mụi trường PDA là 15mm sau ngày ủầu tiờn, cỏc cụng thức Hành nồng ủộ 5%, 10%,15% và sả 15% cú hiệu quảức chế nấm
Aspergillus niger như nhau với ủường kớnh tản nấm lần lượt là 10.2mm; 9.2mm; 9.2mm và 8.8 mm. Nhưng hiệu quảức chế này bị mất dần sau 7 ngày theo dừị Với ủường kớnh tản nấm Aspergillus niger của cụng thức ủối chứng là 72.7mm cũn cụng thức bổ sung dịch chiết hành 5% là 70,5mm; hành 10% là 68,5%; Hành 15% là 68,7%. Trong khi ủú cụng thức xử lý bằng dịch chiết tỏi vẫn cú hiệu quả ức chế tốt nhất sau 7 ngày với ủường kớnh tản nấm với cụng thức xử lý Tỏi 5% là 32,2 mm; 10% là 24,0 mm và 15% là 13,0 mm
Như vậy ta cú thể kết luận dịch chiết Tỏi cú hiệu quả ức chế nấm
Hỡnh ảnh 3.7a: Tản nấm Ạ niger trờn mụi trường cú bổ sung dịch chiết hành, tỏi sau 1 ngày nuụi cấy
Hỡnh ảnh 3.7b: Tản nấm Ạ niger trờn mụi trường cú bổ sung dịch chiết tỏi sau 3 ngày nuụi cấỵ
Hỡnh ảnh 3.7c: Tản nấm Ạ niger trờn mụi trường nuụi cấy cú bổ sung dịch chiết tỏi, hành sau 5 ngày
Hỡnh 3.7: Tản nấm Ạ niger trờn mụi trường nuụi cấy cú bổ sung dịch chiết hành, tỏi, sả
Hỡnh 3.8: Tản nấm Ạ niger trờn mụi trường cú bổ sung dịch chiết tỏi sau 7 ngày nuụi cấy
3.5 Nghiờn cứu ảnh hưởng của dịch chiết thực vật ủến nấm ủối khỏng
Trichoderma harzianum.
Trong phạm vi nghiờn cứu của ủề tài tụi cú sử dụng vi sinh vật ủối khỏng nấm Trichoderma harzianum ủể ức chế nấm gõy bệnh hộo rũ gốc mốc trắng và hộo rũ gốc mốc ủen. Do ủú ủỏnh giỏ ảnh hưởng của dịch chiết hành, tỏi, sả ủến sự phỏt triển của nấm ủối khỏng cũng là một chỉ tiờu quan trọng trong sự phối kết hợp trong quy trỡnh sử dụng vi sinh vật ủối khỏng và dịch chiết thực vật trong phũng trừ nấm bệnh vựng rễ hại lạc. Vậy nờn tụi tiến hành thớ nghiệm kiểm tra ủỏnh giỏ ảnh hưởng của dịch chiết thực vật ủến nấm ủối
khỏng mà tụi sử dụng trong ủề tài nghiờn cứu của tụi Kết quảủỏnh giỏ bước ủầu ủược thể hiện ở bảng 3.6
Bảng 3.6: đỏnh giỏ ảnh hưởng của dịch chiết hảnh, tỏi, sả ủến nấm ủối khỏng Trichoderma harzianum trờn mụi trường PDA
đường kớnh tản nấm Aspergillus niger (mm) Cụng
thức Nồ(%) ng ủộ Ngày 1 Ngày 2 Ngày 3 Ngày 4 Ngày 5 Ngày 6 Ngày 7
H 5 5 24,7 b 48,5 84,33 90,0 90,0 90,0 90,0 H10 10 23,2 c 45,8 76,5 90,0 90,0 90,0 90,0