M Ở ðẦ U
2.1.1 it ượng nghiờn cứu
Một số nấm bệnh gõy hộo rũ lạc: Hộo rũ gốc mốc ủen và hộo rũ gốc mốc trắng.
2.1.2 ðịa ủiểm nghiờn cứu
+ Cỏc xó trồng lạc quanh ủịa bàn Gia Lõm, Hà Nội
+ Phũng thớ nghiệm bộ mụn Bệnh cõy, Trung Tõm Bệnh Cõy Nhiệt ðới, trường ủại học Nụng Nghiệp Hà Nộị
+ Thu thập cỏc mẫu hành, tỏi, sả ủể tiến hành lấy dịch chiết tại Gia Lõm, Hà Nộị
2.1.3 Thời gian nghiờn cứu
Từ thỏng 6 năm 2012 ủến thỏng 2 năm 2013
2.2 Vật liệu nghiờn cứu
+ Giống lạc BT 14, BT 7
+ Cõy hành, tỏi , sả, chế phẩm trichoderma
+ Dụng cụ thớ nghiệm: Dụng cụ trong phũng thớ nghiệm ủĩa Petri, ống nghiệm, giỏ ủựng ống nghiệm, Cỏc loại nguyờn liệu nấu mụi trường PGA ẳ.
2.3 Nội dung nghiờn cứu
2.3.1 ðiều tra thành phần nấm bệnh gõy hại lạc ngoài ủồng ruộng trồng tại Gia Lõm, Hà Nội vụ thu ủụng năm 2012
2.3.2 Giỏm ủịnh nấm bệnh gõy hại hạt giống lạc thu thập tại vựng Gia Lõm, Hà Nội bằng phương phỏp giấy thấm.
2.3.3 ðiều tra diễn biến nấm gõy bệnh hộo rũ lạc trồng tại Gia Lõm, Hà Nội, vụ thu ủụng năm 2012.
2.3.4 ðỏnh giỏ ảnh hưởng của một số dịch chiết thực vật ủến khả năng n y m m, s c s ng c a m m c a h t gi ng l c trong nhà l ị
2.3.5 So sỏnh cỏc cỏch chiết và dung mụi chiết dịch chiết thực vật khỏc nhau ảnh hưởng ủến khả năng nảy mầm, và tỷ lệ nấm bệnh trờn hạt giống lạc BT 14 và DT 7.
2.3.6 ðỏnh giỏ ảnh hưởng của một số dịch chiết thực vật và chế phẩm
Trichoderma spp. ủến mức ủộ phỏt sinh, phỏt triển của nấm gõy bệnh hộo rũ hại lạc trong phũng thớ nghiệm, nhà lướị
2.3.7 ðỏnh giỏ hiệu quả phũng trừ bệnh hộo rũ gốc mốc ủen và hộo rũ gốc mốc trắng gõy hại lạc của một số dịch chiết thực vật và chế phấm
Trichoderma spp. ngoài ủồng ruộng tại Gia Lõm, Hà Nội năm 2012.
2.4 Phương phỏp nghiờn cứu
2.4.1 Phương phỏp giỏm ủịnh bệnh hại trờn hạt giống lạc
Giỏm ủịnh nấm gõy hại hạt giống theo tài liệu giỏm ủịnh bệnh hại hạt giống của viện nghiờn cứu Bệnh hạt giống ðan Mạch (Mathur và Olga, 2001), kiểm tra nấm bệnh tồn tại trờn hạt giống bằng phương phỏp giấy thấm.
- Phương phỏp chia mẫu: mẫu hạt giống ủược trải ủều trờn mặt phẳng hỡnh trũn. Chia mặt phẳng làm 4 phần ủều nhaụ Lấy mỗi phần một lượng nhất ủịnh sau ủú trộn ủều sao cho ủủ lượng mẫu kiểm trạ Lượng mẫu kiểm tra: 200 hạt.
- Phương phỏp giỏm ủịnh nấm bệnh hại trờn hạt giống lạc bằng phương phỏp giấy thấm: ðặt 10 hạt trờn 1 ủĩa petri trong cú giấy thấm ủó ủược làm ẩm bằng nước cất vụ trựng. ðặt hạt thành 2 vũng, vũng ngoài 9 hạt sao cho khoảng cỏch cỏc hạt ủều nhau, vũng trong 1 hạt ủặt ở chớnh giữa ủĩa petrị Sau ủú ủặt chỳng trong phũng ủủảm bảo 12h sỏng, 12h tối ở nhiệt ủộ 22 – 250 C. Sau 7 ngày kiểm tra mẫu, soi hạt dưới kớnh lỳp ủiện lần lượt từ vũng ngoài vào vũng trong theo tõm ủĩa, ủối với nấm chưa xỏc ủịnh rừ thỡ phải khều ủược bào tử nấm ủể soi dưới kớnh hiển vị
ðỏnh giỏ mức ủộ phổ biến của bệnh theo thang 4 cấp sau: + : Tỷ lệ hạt nhiễm nấm < 5%
+++ : Tỷ lệ hạt nhiễm nấm ≥15% - 25% ++++ : Tỷ lệ hạt nhiễm nấm ≥ 25%
2.4.2 Phương phỏp kiểm tra sức nảy mầm của hạt giống
Theo phương phỏp của hội kiểm nghiệm hạt giống quốc tế (ISTA, 2003) và tiờu chuẩn ngành kiểm nghiệm hạt giống.
- Phương phỏp giấy thấm TP (Top of paper) ðặt hạt ủược kiểm tra sức nảy mầm lờn trờn lớp giấy thấm ủó no nước trong cỏc dụng cụ Jacobsen (cú thể thay thế dụng cụ Jacobsen bằng hộp nhựa, ủĩa Petri). ðậy nắp hộp hoặc cho vào tỳi nilon ủể giảm tối thiểu sự bay hơi nước và ủể giữ ẩm cho giấy thấm. ðặt hộp trong tủ nảy mầm hoặc trong buồng nảy mầm ủ ở ủiều kiện nhiệt ủộ 20 – 250C. Kiểm tra sức nảy mầm của mẫu hạt qua sau 5 hoặc 7 ngày, ủếm số mầm bỡnh thường, ghi số lượng vào bảng ủiều tra (dựa theo tiờu chuẩn ủó quy ủịnh ủể xỏc ủịnh mầm bỡnh thường, mầm bất bỡnh thường, hạt thối, hạt tươi). Tớnh số mầm bỡnh thường cho cả 2 lần ủếm ủể xỏc ủịnh tỉ lệ nảy mầm của hạt.
- Phương phỏp cỏt ẩm S (Sand) ðặt hạt trờn cỏt vụ trựng ủó ủược phun ủủẩm và cũng tiến hành kiểm tra sức nảy mầm của hạt như phương phỏp giấy thấm.
Tiến hành kiểm tra 200 hạt/ mẫu, 50 hạt hoặc 100 hạt cho một lần nhắc lại tựy vào kớch thước của hạt.
2.4.3 Phương phỏp ủiều tra thành phần và mức ủộ phổ biến nấm bệnh hại lạc ngoài ủồng
Phương phỏp ủiều tra ngoài ủồng ruộng ỏp dụng theo phương phỏp nghiờn cứu Bảo vệ thực vật của viện bảo vệ thực vật năm 2006.
Chọn 1 ủiểm ủiều tra trờn một xó trồng lạc ủại diện cho giống lạc phổ biến (Giống lạc BT 14, DT 7) tại vựng Gia Lõm, Hà Nộị Mỗi ủiểm ủiều tra chọn 3 ruộng lạc (mỗi ruộng ủiều tra trờn 250 m2). ðiều tra theo phương phỏp 5 i m ng chộo gúc t i m i ru ng, m i i m 50 cõy i v i b nh gõy ch t
cõy và 5 cõy ủối với bệnh gõy hại trờn lỏ lạc, ủiều tra ủịnh kỳ 7 ngày 1 lần từ giai ủoạn cõy con ủến khi thu hoạch. Quan sỏt triệu chứng trờn toàn bộ cõy trồng ởủiểm ủiều tra, ủỏnh giỏ mức ủộ phổ biến của bệnh ở từng cấp.
2.4.3.1 ðiều tra tỡnh hỡnh phỏt sinh, phỏt triển của hộo rũ gốc mốc ủen, hộo rũ gốc mốc trắng tại Gia Lõm, Hà Nội
Chọn 1 ủiểm ủiều tra trờn một xó trồng lạc ủại diện cho giống lạc phổ biến (Giống lạc BT14) tại vựng Gia Lõm, Hà Nộị Mỗi ủiểm ủiều tra chọn 3 ruộng lạc (mỗi ruộng ủiều tra cú diện tớch trờn 250 m2). ðiều tra theo phương phỏp 5 ủiểm ủường chộo gúc tại mỗi ruộng, mỗi ủiểm 50 cõy, ủiều tra ủịnh kỳ 7 ngày 1 lần từ giai ủoạn cõy con ủến thời kỳ cõy ra hoạ ðiều tra diễn biến bệnh hộo rũ gốc mốc ủen do nấm Aspergillus niger và bệnh hộo rũ gốc mục trắng Sclerotium rolfsii.
Chẩn ủoỏn bệnh ngoài ủồng ruộng: Dựa vào triệu chứng biểu hiện bệnh bờn ngoài ủiển hỡnh.
Chỉ tiờu theo dừi: Tỷ lệ bệnh (%).