Những nghiờn cứu về phũng trừ bệnh cõy từ dịch chiết thực vật

M Ở ðẦ U

1.1.2 Những nghiờn cứu về phũng trừ bệnh cõy từ dịch chiết thực vật

1.1.2.1 Những nghiờn cứu về thực vật dựng làm dịch chiết.

* Tỏi:

Tờn khoa học:Allium sativum

Họ Hành: Liliaceae

Tỏi là một trong những loại cõy cú rất nhiều cụng dụng ủược ứng dụng

trong ủời sống, do thành phần trong tỏi: Cả cõy chứa tinh dầu, mựi xụng

mạnh, gồm cỏc chất: allicin, citral, alliin, geraniol, linalol, diallythiosulfonat,

chứa enzym gọi là alliinase, một số vitamin A, B1, B2…. Nờn ngoài chữa

bệnh cho người tỏi cũn cú cụng dụng chống lại cỏc vi khuẩn gõy bệnh

Agrobacterium tumefaciens, Erwinia carotovora, Pseudomonas syringae pv

maculicola,. Ps. pv phaseolicola,. Ps. pv cà chua,. Xanthomonas campestris

pv campestris...

Cỏc loại nấm Alternaria brassisicola, Botrytis cinerea,

Plectosphaerella cucumerina, Magnaporthe grisea, và Oomycete

Phytophthora infestans...

* Hành

Tờn khoa học: Allium fistulosum L.

Họ Hành: Liliaceae

Hành chứa rất nhiều thành phần húa học cú tỏc dụng phũng chữa bệnh

như acid malic, phytin và alylsulfit, tinh dầu, ủặc biệt là chất khỏng sinh

alicine hũa tan trong nước. Alicine giỳp diệt khuẩn rất mạnh ủối với một số

bệnh như thương hàn, lỵ, vi trựng tả, trực khuẩn, bệnh bạch hầụ

* Gừng:

Tờn khoa học Zingber zerumbert sm.

Thuộc họ gừng Zinbiberaceaẹ

Trong gừng giú cú nhiều tinh dầu, dầu bộo và nhựạ Tinh dầu cú 13%

cỏc monoterpen và nhiều sesquiterpen, trong ủú humulen chiếm 27%,

monocylic sesquiterpen xeton, zerumbon 37,5%. Cỏc monoterpen gồm pinen,

camphen, limonen, cineol và campho, thành phần chớnh của tinh dầu gừng

giú, ức chế sự phỏt triển của Micrococcus pyorgenes var, auereus và

Mycobacterium tuberculosis.

* Sả:

Tờn khoa học: Cymbopogon citratus

Họ hũa thảo: Poaceae

Tỏc dụng chớnh của sả là ở tinh dầụ Trong lỏ sả cú tinh dầu, thành phần

chủ yếu là geraniola và citronelolạ Vỡ vậy, khi ta vũ lỏ sả thấy cú một mựi

thơm ủặc biệt phảng phất mựi thơm của chanh.

1.1.2.2 Cỏc phương phỏp nghiờn cứu về dịch chiết:

Trờn thế giới việc nghiờn cứu cỏc phương phỏp tỏch chiết dịch chiết

thực vật ủược cỏc nhà khoa học rất quan tõm ủó cú nhiều phương phỏp nghiờn

cứu ủược ủưa ra ủể khuyến cỏọ Sau ủõy là một số phương phỏp tỏch chiết

mang lại hiệu quả phũng trừ một số loại nấm hiệu quả:

Lỏ tươi của Moringa oleifera Lam, Vernonia amygdalina and Annona

muricata ủược rử sạch bằng nước cất sau ủú nghiền nỏt bằng mỏy xay, cho

nước vàọ Dung dịch ủể qua ủờm và lọc bằng vải lọc. chỳng ủược quay ly tõm

ở tốc ủộ 1000 vũng/phỳt trong 15 phỳt. 3 nồng ủộ ủó ủược chuẩn bị từ trước

bằng cỏch lấy 10, 20, 30g dịch chiết cho vào 100ml nước cất vụ trựng. Cỏc

hạt giống bị nhiễm bệnh ở mức cao bởi C. destructivum ủó ủược xỏc ủịnh

bằng phương phỏp giấy thấm. Xử lý cỏc hạt bằng cỏch thấm vào hạt cỏc dung

dịch cú nồng ủộ khỏc nhau trong 6, 12, 18h. hạt giống ủó ủược xử lý ủược

làm khụ bằng giấy thấm trong vũng 8-10h ủể kiểm trạ Hạt giống cũng ủược

thấm benomyl 3% trong 30 phỳt và những hạt giống khụng ủược xử lý làm

ủối chứng. mỗi lần xử lý 5 lần nhắc lại của 25 hạt. quan sỏt tỷ lệ nhiễm dười

kớnh hiển vi (Theo African Journal of Biotechnology Vol. 7, pp. 3683-3685,

20 October, 2008)

Cõy ủược sử dụng trong nghiờn cứu là Azardiachta indica. Dịch chiết

ủược lấy từ rễ và lỏ. Lỏ tươi ủược rửa sạch bằng nước khử trựng rồi ủể trong

ủiều kiện khụng khớ khụ. Sau ủú nghiền lỏ rồi cho nước cất vào với tỉ lệ 1:1

lọc qua vải mỏng và 100% dịch chiết của cõy ủược chiết rạ Dịch chiết ủược

ủổ vào bỡnh tam giỏc ủậy kớn bằng nỳt cụtton, hấp ở 1000 C trong 10 phỳt ủể

chống nhiễm bệnh. Nồng ủộ dịch chiết khỏc nhau 5, 10, 15, 20% ủược ủổ vào

ủĩa petri chứa mụi trường PDA ủó khử trựng. Nguồn bệnh ủó ủược phõn lập

phỏt triển trờn mụi trường PDA ủược ủặt ở giữa cỏc ủĩa petri thử với cỏc nồng

ủộ khỏc nhau của dịch chiết. ủở 27+-20C trong 6 ngày rồi quan sỏt khả năng

khỏng nấm của dịch chiết (Theo Global Journal of Biotechnology &

Biochemistry, 2008).

57 mẫu lỏ tươi của thực vật ủược lấy ở cỏc vựng khỏc nhau của Hàn

Quốc. mỗi loại lấy 300g lỏ tươi ủược dầm nhỏ bằng cỏch dựng mỏy nghiền

trong vũng 1 phỳt và chiết cựng 600ml methanol trong 2h. Dịch chiết ở thể

vẩn ủược lọc qua giấy lọc và phần bó lại ủược lọc với methanol. Dịch lọc này

ủược cụ lập trong chõn khụng bằng cỏch sử dụng mỏy quay làm bay hơi ủể

thu ủược khoảng 25 ml chất lỏng. sau khi ganl lọc phần dung dịch phần cũn

lại hũa tan trong 10ml DMSO phần nước và dung dịch DMSO trộn lại với nhau

cho thờm nước cất ủể thu ủược 50ml dung dịch. Mỗi 1,5 ml dung dịch tương

ứng 9g vật liệu dựng trong thớ nghiệm khỏng nấm chống lại 6 loại nấm gõy bệnh:

ủạo ụn, ủốm vằn, mốc xỏm cà chua, thối củ và thõn cà chua, bệnh ủầu lỏ và phấn

trắng lỳa mạch (Theo Plant Pathol. J, 2004) The Plant Pathology Journal The

Korean Society of Plant Pathology In Vivo Antifungal Activities of 57 Plant

Extracts Against Six Plant Pathogenic Fungi).

Lỏ tươi của Calotropis procera, Cannabis sativus and Daturạ alba

ủược hỏi và rửa sạch hoàn toàn bằng nước cất. Dịch chiết lấy ủược chuẩn bị

bằng cỏch lấy 75g lỏ tươi của mỗi cõy và nghiền nhỏ với 25ml nước cất vụ

trựng bằng chày và cốị Dịch chiết ủược lọc bằng vải sau ủú lọc qua giấy lọc.

Dịch chiết này ủược lưu trữ ở 4oC ủể nghiờn cứu sau nàỵ Trong phũng thớ

nghiệm. Từ cỏc dịch chiết thu ủược cú cỏc nồng ủộ dung dịch 0.5, 1, 1.5, và

2% chuẩn bị ủể ủỏnh giỏ khả năng chống lại sự phỏt triển của nấm (Theo

Mycopath, 2006, In vitro efficacy of plant leaf extracts against Sclerotium

rolfsii Sacc). 20g lỏ của cõy trồng ủược rửa sạch sau ủú tiến hành chiết dịch

bằng cỏch dựng chày và cối gió nỏt với 40ml nước cất khử trựng sau ủú lọc

qua vải lọc và giấy lọc. Dịch chiết thu ủược tiến hành ly tõm 6000 vũng/ phỳt

trong 30 phỳt. Dịch chiết này ủược giữ lại và ủược sử dụng trong khảo

nghi m (Theo Avdhesh Narain, S Mycology và B nh lý h c th c v t, i

học Nụng nghiệp, Orissa, ðại học Agricujture và Techhnology,

Bhubaneswar).

Lỏ trươi ủược rửa kỹ lưỡng dưới vũi nước sau ủú ủể khụ sử dụng cho

việc chuẩn bị chiết xuất tươị Lỏ tươi ủược cho vào mỏy hay cối nghiền nỏt

cũng với nước cất theo tỷ lệ 1:1 (w/v) sau ủú lọc qua vải gấp thành 4 và phần

dịch chiết ủược ly tõm 3000 vũng/phỳt trong 20 phỳt. Phần nổi lờn phớa trờn

lọc bằng giấy lọc và phần dịch chiết thu ủược sẽ dựng ủể thử nghiệm (Theo

Bangladesh J. Bot, 2008).

ðể chiết dịch ta lấy 100 gam lỏ của mỗi loại lỏ thờm vào 1000 ml nước

cất (1:10 w / v). Sau ủú, chiết trong ủiều kiện lạnh cho 24h. Trong trường

hợp của tỏi; tỏi ủó ủược cắt thành miếng nhỏ và sau ủú nghiền nỏt bởi mỏy

xaỵ Chất chiết xuất từ thực vật ủược lọc qua hai lần vảị ðiều này tập trung

(10%), như dầu thụ một chiết xuất dung dịch nước, ủược sử dụng trong cỏc

hoạt ủộng khỏng nấm thớ nghiệm (Theo Khoa Bệnh lý học thực vật, Dokki,

Giza, Ai Cập).

1.1.2.3 Những nghiờn cứu về tỏc dụng của dịch chiết thực vật

Một số nước trờn thế giới phũng trừ bệnh bằng chiết suất từ thực vật ủó

bước ủầu mang lại hiệu quả rừ rệt (Van Loon L.C, 2001).

Năm 1957, ở Hà Lan lần ủầu tiờn người ta phỏt hiện ra hoạt ủộng ủối

khỏng của cõy cỳc vạn thọ ủối với tuyến trựng gõy tổn thương rễ hại cõy

trồng. Dewa và cộng sự (2001) phỏt hiện ra rễ gừng và lỏ ủu ủủ cú tỏc dụng

hạn chế sự phỏt triển của nấm Ceratocystis sp. gõy thối quả.

Theo một số nghiờn cứu dựng dầu thực vật như dầu hạt hướng dương,

dầu oliu, dầu ủậu phộng, ủậu tương, hạt nho, cõy rum phũng trừ ủược bệnh

mốc sương trờn cõy tỏo, hoa hồng và ớt gõy nguy hại tới mụi trường, tuy nhiờn

dầu thực vật cú thểủể lại một lớp nhờn trờn bề mặt lỏ cõy gõy khú khăn về

quang hợp của lỏ (Brooklyn Bontani Garden, 2000).

Ngoài ra dịch chiết thực vật ủược dựng phổ biến là dầu Neem cú nguồn

gốc từ cõy Neem, Ấn ðộ. Chất chiết xuất từ hạt cõy neem ủược sử dụng như

thuốc trừ sõu, diệt cụn trựng khi ở giai ủoạn sõu non. Gần ủõy thuốc diệt nấm

bệnh chiết xuất từ hạt cõy Neem ủó ủược thương mại húa, dầu Neem cú tỏc

dụng diệt nấm tốt hơn loại dầu thực vật khỏc, do trong hạt neem cú chứa cỏc

hợp chất lưu huỳnh là chất cú tớnh diệt trừ sõu bệnh caọ Dầu Neem cú tỏc

dụng kiểm soỏt nấm mốc sương, gỉ sắt, ủốm ủen, nấm botrytis ...(Brooklyn

Bontani Garden, 2000).

Dịch chiết tỏi cũng ủó ủược nghiờn cứu ứng dụng do dịch chiết tỏi cú

ủặc tớnh khỏng sinh và khỏng nấm ngăn chặn ủược một số bệnh trờn cõy trồng

như nấm mốc sương trờn dưa chuột, ủốm ủen hoa hồng. Theo nghiờn cứu

trong dịch chiết tỏi cú chưa hợp chất lưu huỳnh và chất khỏng sinh allicin nờn

khi phun vào cõy kớch thớch hệ thống kớch khỏng của cõy (Brooklyn Bontani

Garden, 2000).