M Ở ðẦ U
3.6.2 Ảnh hưởng của nấm Trichoderma harzianum với nấm Aspergillus niger
niger trờn mụi trường PDẠ
Chỳng tụi tiếp tục tiến hành thử nghiệm khả năng ức chế của nấm
T.harzianum với nấm Ạ niger trờn mụi trường PDA kết quả thể hiện bảng 3.8 và hỡnh 3.15.
Qua bảng số 3.8. Chỳng tụi thấy khi cấy nấm T.harzianum và nấm Ạ
niger trờn mụi trường PDA thỡ khả năng ức chế của nấm ủối khỏng
T.harzianum khỏc nhau, sự khỏc biệt ủú thể hiện ngay sau 2 ngày chỳng tụi theo dừị Tất cả cỏc thời ủiểm cấy nấm ủối khỏng ủều cú hiệu quảức chế nấm
Ạniger. Hiệu quả ức chế nấm Ạ niger cao nhất khi nấm T.harzianum cấy trước nấm Ạ niger 24h với bỏn kớnh nấm ủối khỏng 48,0 mm cụng thức ủối chứng 54,33mm (hai cụng thức này khỏc nhau khụng cú ý nghĩa theo phan tớch Ducan) và bỏn kớnh tản nấm của nấm Ạnige 8,33mm, cụng thức ủối chứng 14,67 mm, chiều dài bỏn kớnh nấm Ạ niger giảm 1,6 lần so với cụng thức ủối chứng. Trong khi ủú cấy nấm ủối khỏng và nấm Ạ niger cựng 1 thời ủiểm trờn ủĩa petri nấm T.harzianum vẫn ức chế nấm Ạ niger nhưng hiệu quả kộm hơn, với bỏn kớnh tản nấm T.harzianum 51,33 mm tản nấm của nấm Ạ
niger cú chiều dài bỏn kớnh lớn hơn ở cụng thức T trước S 24h. Hiệu quảức chế của nấm T.harzianum kộm nhất khi cấy sau nấm Ạ niger 24h ủường kớnh tản nấm chỉ phỏt triển 33,00 mm trong khi ủú nấm Ạ niger cú bỏn kớnh tản nấm 14mm khụng cú sự sai khỏc so với cụng thức ủối chứng. Sau 7 ngày theo dừi nấm T.harzianum vẫn cú hiệu quảức chế nấm Ạ niger.
Như vậy Thời gian cấy nấm T.harzianum khỏc nhau ảnh hưởng khỏc nhau ủến khả năng ức chế nấm v, ức chế tốt nhất khi cấy trước nấm S.rolfsii 24h. Hiệu quả vẫn cao khi 2 nấm cấy cựng thời gian, cuối cựng khi Cấy nấm ủối khỏng sau khi nấm Ạ niger chiếm chỗ tuy vẫn cú hiệu quả ủối khỏng nhưng thấp.
Hỡnh 3.15: Khả năng ủối khỏng của nấm Trichoder harzianum với nấm Ạ niger trờn mụi trường PDA sau 7 ngày
A: Nấm T.harzianum cấy sau nấm Ạ niger ; B: nấm T .harzianum cấy trước nấm Ạ niger ; C : nấm T .harzianum cấy cựng nấm Ạ niger
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ……… 62
Bảng 3.8: Ảnh hưởng của nấm Trichoderma harzianum ủến sự phỏt triển tản của nấm Aspergillus niger
Bỏn kớnh tản nấm Tricoderma harzianum và Ạ niger trờn mụi trường PDĂmm)
Ngày 2 Ngày 3 Ngày 4 Ngày 5 Ngày 6 Ngày 7
Cụng Thức T A T A T A T A T A T A T trước A 24 h 46,0 b 8,3 C 50,0 c 12,3 b 51,0 b 12,3 c 51,0 b 12,3 c 51,0 b 12,3 c 51,0 b 12,33 c T và A cựng thời gian 51,3 c 11,0 bc 53,0 b 13,0 b 53,0 b 13,0 c 53,0 b 13,0 c 53,0 b 13,0 c 53,0 b 13,0 c T cấy sau A 24 h 32,0 d 14,0 a b 37,0 d 20,0 a 38,7 c 21,0 b 38,7 c 21,0 b 38,7 c 21,0 b 38,7 c 21,0 b ðối chứng Ạ niger - 14,7 a - 22,0 a - 31,3 a - 46,0 a - 57,0 a - 66,7 a ðối chứng T.harzianum 55,0 a - 75,0 a - 75,0 a - 75,0 a - 75,0 a - 75,0 a - LSD (5%) 4,7 3,2 2,3 2,6 2,1 2,7 2,1 2,6 2,1 3,3 2,1 6,4
Ghi chỳ: T: Nấm Trichoderma harzianum; A: nấm Aspergillus niger
3.7 Kết quả nghiờn cứu ảnh hưởng của dịch chiết ủển tỷ lệ nấm bệnh trờn hạt giống lạc.
Qua ủiều tra và thu thập hạt giống lạc tại ủịa phận huyện Gia Lõm, chỳng tụi thấy 2 giống lạc BT 14 và DT 7 ủược bà con nụng dõn trồng nhiều và cho năng suất cao nhất trong mấy năm gần ủõy, ủặc biệt là bà con nụng dõn tự ủể giống lạc cho vụ sau do ủú việc nghiờn cứu ảnh hưởng của dịch chiết thực vật ủến tỷ lệ nấm bệnh trờn hạt giống lạc và ảnh hưởng của dịch chiết thực vật ủến tỷ lệ nảy mầm là hết sức quan trọng, từ ủú ta co thể khuyến cỏo bà con nụng dõn trong cụng tỏc phũng trừ bệnh, Chỳng tụi tiến hành thớ nghiệm với giống lạc BT14 và DT 7, ngõm hạt với dịch chiết tỏi 5%,10%, 15% và sả 15% (Nồng ủộ cú hiệu quảức chế nấm bệnh tốt nhất ủược nghiờn cứu ở thớ nghiệm trong phũng) trong khoảng thời gian 10 phỳt (là khoảng thời gian ủược nghiờn cứu là cú hiệu quả cao nhất) sau ủú ủặt hạt theo phương phỏp giấy thấm.
3.7.1 Ảnh hưởng của dịch chiết ủển tỷ lệ nấm bệnh trờn hạt giống lạc DT7
Trước hết chỳng tụi tiến hành nghiờn cứu ảnh hưởng của dịch chiết tỏi, sảở cỏc nồng ủộ 5%, 10%, 15%. Dịch chiết ủược chiết với 2 dung mụi khỏc nhau là nước cất (dịch chiết thụ) và với cồn 70o. Sau ủú ủặt hạt trờn giấy thấm và theo dừi tỷ lệ nấm bệnh của mỗi cụng thức sau 7 ngày kết quả ủược thể hiện ở bảng 3.9 và biểu ủồ 3.6.
Bảng 3.9: Ảnh hưởng của dịch chiết thực vật ủến nấm bệnh trờn hạt giống lạc DT7
Tỷ lệ nấm trờn hạt giống (%) Cụng thức Nồng ủộ
(%) Ạ niger Ạ flavus Penicillium spp Mucor spp
ðối chứng 46,0 a 8,7 a 8,0 a 12,3 a T thụ 5 43,3 a 7,0 a 5,3 b 9,3 a T thụ 10 21,3 b 2,0 c 5,3 b 2,0 c T thụ 15 12,7 c 1,7 c 1,0 c 8,0 b Sả thụ 15 42,3 a 4,3 b 1,7 c 11,0 a T với cồn 5 0,7 d 0,3 c 0,0 c 0,3 c T với cồn 10 1,0 d 1,0 c 0,0 c 0,0 c T với cồn 15 0,3 d 0,0 c 0,3 c 0,0 c S với cồn 15 3,3 d 1,0 c 0,3 c 1,0 c LD 5% 4,7 2,1 1,9 3,7
Ghi chỳ: T: dịch chiết tỏi; S: dịch chiết sả.
Giỏ trị trung bỡnh trong cựng một cột mang chữ cỏi khỏc nhau thỡ sai khỏc cú ý nghĩa thống kờ ở mức α = 0.05
Biểu ủồ 3.6: Ảnh hưởng của dịch chiết thực vật ủến tỷ lệ nảy mầm trờn hạt giống lạc DT 7.
Qua bảng số liệu 3.9 và biểu ủồ 3.6 chỳng tụi thấy cỏc nồng ủộ dịch chiết và dung mụi chiết khỏc nhau cú ảnh hưởng khỏc nhau ủến tỷ lệ nấm bệnh trờn hạt giống.
Với nấm Aspergillus niger cú tỷ lệ trờn hạt giống lạc DT 7 cao nhất, tại cụng thức ủối chứng tỷ lệ nấm này 46% sau khi cú xử lý dịch chiết thực vật thỡ tỷ lệ nhiễm nấm Ạ niger cú sự khỏc biệt giữa cỏc cụng thức. Tỷ lệ nấm Ạ
niger thấp nhất là ở tất cả cỏc cụng thức dịch chiết tỏi và sả chiết cồn với dịch chiết tỏi với cồn cú nồng ủộ 5%, 10%, 15% và sả 15% lần lượt cú tỷ lệ nấm Ạ niger 0,7%, 1,0%, 0,3% và 3,3%. như vậy khi xử lý hạt giống bằng dịch chiết thực vật cựng với cồn 70 ủộ làm cho tỷ lệ hạt giống bị nhiễm nấm giảm hơn 90% so với cụng thức ủối chứng qua (tỷ lệ nấm Ạ niger 46%) .
Tiếp ủến là cụng thức xử lý tỏi thụ 15% cú tỷ lệ nấm Ạ niger 12,7% giảm so với ủối chứng 72,5%, sau ủú ủến cụng thức xử lý dịch chiết tỏi thụ 10% cú tỷ lệ nấm Ạ niger 21,3% Giảm so với cụng thức ủối chứn hơn 50%. Cỏc cụng thức xử lý tỏi thụ 5% cú tỷ lệ nấm 43,3% và sả thụ 15,0 % cú tỷ lệ nấm 42,3 % hai cụng thức này khụng cú sự sai khỏc so với Cụng thức ủối chứng khụng xử lý dịch chiết. Với nấm mốc vàng Ạflavus cú tỷ lệ thấp hơn so với nấm Ạ niger trờn cỏc mẫu lạc giống DT7 mà chỳng tụi kiểm trạ Tại cụng thức ủối chứng nấm này cú tỷ lệ hạt giống bị nhiễm 8,67%. cỏc cụng thức xử lý hạt giống với dịch chiết cú hiệu quảức chế nấm Ạflavus tốt nhất là cỏc cụng thức tỏi thụ 15% tỷ lệ nấm 1,67% , tỏi thụ 10 với tỷ lệ nấm A,flavus 2% và cỏc cụng thức chiết dịch chiết với cồn tỏi với cồn 5% 0,33% tỏi với cồn 10% và sả với cồn 15% tỷ lệ nấm 1%, ủặc biệt tỏi với cồn cú nồng ủộ 15% khụng cú hạt nào nhiễm nấm. ở những cụng thức này giảm tỷ lệ hạt bị nhiễm nấm từ 95% - 100% so với Cụng thức ủối chứng. Xử lý hạt giống với dịch chiết sả thụ nồng ủộ 15% cũng giảm 50% tỷ lệ hạt bị nhiờm bệnh (tỷ lệ hạt bị nhiễm nấm Ạflavus
giảm tỷ lệ hạt nhiễm nấm Ạflavus, sau khi xử lý cụng thức này tỷ lệ hạt nhiễm nấm Ạflavus 7%.
Tỷ lệ hạt giống bị nhiễm nấm mốc xanh, mốc lục Penicilium spp. là 8% ở cụng thức ủối chứng. Những cụng thức cú hiệu quả giảm tỷ lệ nấm này cao tỏi thụ 15% (1%), sả thụ 15% (tỷ lệ hạt nhiễm nấm 1,67%), cỏc cụng thức chiết với cồn cả dịch chiết tỏi và sả tỷ lệ nấm từ 0,0 – 0,3%. cỏc cụng thức này ủều làm giảm tỷ lệ hạt giống bị nhiễm nấm mốc xanh mốc lục trờn 90% so với ủối chứng. Hai cụng thức xử lý hạt giống với dịch chiết tỏi thụ 5% và 10% cũng cú hiệu quả giảm tỷ lệ nấm mốc xanh, mốc lục ủến 33,3%.
Bờnh cạnh những loài nấm làm giảm chất lượng hạt giống như mốc ủen, mốc vàng, mốc xanh, mốc lục trờn hạt giống Lạc DT7 cũng tồn tại thành phần nấm hoại sinh Mucor spp. ảnh hưởng lớn ủến tỷ lệ nảy mầm. Ở cụng thức ủối chứng tỷ lệ nấm Mucor spp 12,3%. Khi xử lý hạt giống bằng dịch chiết thực vật chiết với cồn 70 ủộ và dịch chiết tỏi thụ nồng ủộ 10% tỷ lệ nấm trờn hạt giống giảm trờn 90%. Tỷ lệ nấm giảm 35,11% so với ủối chứng khi xử lý hạt giống với dịch chiết tỏi thụ 15% (Tỷ lệ hạt nhiễm nấm Mucor spp 8%). Cỏc cụng thức khi xử lý dịch chiết tỏi thụ 5% (tỷ lệ hạt nhiễm nấm 9,33%) và sả thụ nồng ủộ (15%) (tỷ lệ hạt nhiễm nấm 11%) khụng cú tỏc dụng giảm tỷ lệ hạt giống nhiễm nấm Mucor spp.
Như vậy Trờn giống lạc DT 7 tỏc dụng làm giảm cỏc nấm Ạ niger, Ạflavus, penicillium spp., Mucor spp. lờn ủến 90% so với cụng thức ủối chứng khi xử lý hạt giống với dịch chiết tỏi thụ 10% và cỏc dịch chiết tỏi, sảở cỏc nồng ủộ 5%, 10%, 15% với cồn 70. làm giảm 40% - 50% tỷ lệ nấm trờn hạt giống khi xử lý hạt giống với dịch chiết tỏi 10%. Cỏc cụng thức xử lý hạt giống với dịch chiết tỏi 5% và sả 5% khụng cú tỏc dụng làm giảm tỷ lệ nhiễm nấm bệnh trờn hạt giống lạc DT 7.
3.7.2 Ảnh hưởng của dịch chiết thực vật ủến tỷ lệ nấm bệnh trờn hạt giống lạc BT14
Bờn cạnh kiểm tra khả năng ức chế nấm trờn hạt giống lạc BT 7 chỳng tụi cũng tiến hành kiểm tra khả năng ức chế nấm bệnh trờn hạt giống lạc BT 14 ủược thu thập tại Hà Nội và vựng Phụ cận vụ thu ủụng năm 2013. Kết quả kiểm tra ủược thể hiện bảng 3.10 và biểu ủồ.
Bảng 3.10 ; Ảnh hưởng của dịch chiết thực vật tinh và thụ ủển tỷ lệ nấm trờn hạt giống lạc BT 14
Tỷ lệ nhiễm nấm trờn hạt giống (%) Cụng thức Nồng ủộ
(%) Ạ niger Ạ flavus Penicillium spp. Mucor spp.
ðối chứng 10,0 a 0,7 b 1,3 a 9,3 a T thụ 5 3,3 b 0,7 b 0,3 a 2,3 bc T thụ 10 1,0 b 1,3 b 0,7 a 0,0 d T thụ 15 2,7 b 0,7 b 0,3 a 2,3 bc Sả thụ 15 12,0 a 5,7 a 1,0 a 3,3 b T với cồn 5 2,3 b 1,3 b 0,0 b 0,3 d T với cồn 10 1,0 b 0,0 b 0,0 b 0,0 d T với cồn 15 0,3 b 0,0 b 0,3 a 0,0 d S với cồn 15 3,3 b 1,3 b 0,3 a 1,0 cd LD 5% 3,4 2,3 1,3 1,9
Ghi chỳ: T: dịch chiết tỏi; S: dịch chiết sả.
Giỏ trị trung bỡnh trong cựng một cột mang chữ cỏi khỏc nhau thỡ sai khỏc cú ý nghĩa thống kờ ở mức α = 0.05
Biểu ủồ 3.7: Ảnh hưởng của dịch chiết tỏi, sảủển tỷ lệ nấm bệnh trờn hạt giống lạc BT 14
Qua bảng 3.10 và biểu ủồ 3.7 chỳng tụi cú nhận xột saụ
Tỷ lệ hạt giống bị nhiễm nấm Ạ niger, Ạflavus, Penicillium spp và nấm mốc Mucor spp trờn hạt giống lạc BT 14 ớt hơn trờn giống lạc DT 7. Khi sử lý dịch chiết thực vật ở cỏc nồng ủộ khỏc nhau và dung mụi chiết khỏc nhau ảnh hưởng khỏc nhau ủến tỷ lệ nấm bệnh trờn hạt giống lac BT 14.
Với nấm Ạ niger khi xử lý hạt giống lạc với dịch chiết tỏi nồng ủộ 5% tỷ lệ nấm 3,33%, giảm 66,7% hạt bị nhiễm nấm so với ủối chứng, khi xử lý bằng dịch chiết tỏi thụ nồng ủộ 10% tỷ lệ hạt nhiễm nấm 1%, dịch chiết tỏi thụ 15% tỷ lệ hạt nhiễm nấm 2,67%, Xử lý với cỏc cụng thức chiết với cồn 70 ủộ tỷ lệ nhiờm nấm rất thấp, 1% khi nồng ủộ xử lý 5%. 0,33% với nồng ủộ 15% và sả 15%, 1 % với nồng ủộ 10%, cỏc cụng thức này ủều cú hiệu quả như nhau ủến làm giảm tỷ lệ hạt nhiễm nấm Ạ niger và giảm tỷ lệ hạt nhiễm nấm mốc ủen từ 66% ủến 96%. Cũn cụng thức xử lý sả thụ nồng ủộ 15% tỷ lệ hạt nhiễm nấm sau khi xử lý 12%, tỷ lệ này cao hơn cả cụng thức ủối chứng
10% do vậy dịch chiết sả thụ nồng ủộ 15% khụng cú tỏc dụng làm giảm tỷ lệ nấm bệnh trờn hạt giống lạc BT 14.
Với nấm Ạflavus gõy mốc vàng trờn hạt giồng lạc BT 14 tỷ lệ nhiễm nấm mốc vàng rất thấp 0,7% gần như khụng cú nờn khi xử lý dịch chiết ở cỏc nồng ủộ và dung mụi chiết khỏc nhau ủều khụng ảnh hưởng ủến tỷ lệ nấm bệnh ngoại trừ khi xử lý bằng dịch chiết sả thụ nồng ủộ 15% làm tỷ lệ hạt giống bị nhiễm nấm 5,7%. Hiệu quả của dịch chiết sả và tỏi thể hiện rừ hơn với nấm mốc xanh và mốc lục trờn hạt giống lạc BT14 cỏc cụng thức T thụ 5%, Tỏi thụ 10%, Tỏi thụ 15%, sả thụ 15%, và cụng thức sả chiết với cồn nồng ủộ 15% ủều khụng làm giảm tỷ lệ nhiễm nấm so với ủối chứng 1,3%, 2 nồng ủộ dịch chiết tốt nhất giảm tỷ lờ nấm tỏi với cồn nồng ủộ 5% và tỏi với cồn nồng ủộ 10%, khi xử lý ở 2 nồng ủộ này tỷ lệ hạt bị nhiễm nấm 0,0% .
Nấm Mucor spp nhiễm trờn hạt giống lạc với tỷ lệ 9,3%, khi xử lý dịch chiết tỏi thụ 10%, Tỏi với cồn 10%, tỏi với cồn 15%, Tỏi với cồn 5% làm giảm tỷ lệ hạt nhiễm nấm xuống cũn 0,0% và 0,3%. Khi xử lý với cỏc cụng thức T thụ 5%, T thụ 10% và sả thụ ở hai cỏch chiết nồng ủộ 15% ủều giảm tỷ lệ hạt nhiễm nấm xuống trờn 77% so với cụng thức ủối chứng.
Như vậy trờn giống lạc BT 14 tỷ lệ hạt nhiễm cỏc nấm Ạ niger, Ạflavus, Penicillium spp và Mucor spp rất thấp. xử lý hạt giống với dịch Chiết tỏi chiết với cồn ở cỏc nồng ủộ 5%, 10%, 15% ủều cú hiệu quả giảm tỷ lệ nấm bệnh trờn hạt giống trờn 90% so với ủối chứng, tiếp ủú là dịch chiết tỏi thụ 5%, 10% và 15%. Dịch chiết sả 15% khụng cú tỏc dụng làm giảm tỷ lệ hạt nhiễm nấm trờn hạt giống lạc BT 14 ủụi khi cũn tạo mụi trường thuận lợi hơn cho nấm mốc phỏt triển.
3.8 Ảnh hưởng của dịch chiết thực vật ủến tỷ lệ nảy mầm của hạt giống lạc thu thập tại Hà Nội vụ thu ủụng năm 2012.