STT Vi khuẩn Nấm men Nấm mốc
1
Gr+
Bacillus cereus Candida albicans Fusarium sp.
2 Bacillus subtilis Colletotrichum sp.
3 Staphylococcus aureus 4 Pseudomonas aeruginosa 5 Gr- Escherichia coli 6 Salmonella enterica 2.11.2.1 Hoạt tính kháng khuẩn
Bảng 2.21 Thành phần môi trƣờng LB (Luria Bertani Medium)
STT Thành phần Khối lƣợng 1 Tryptone 10 g 2 Yeast extract 5 g 3 NaCl 10 g 4 Agar 15-20 g 5 Nƣớc cất đủ 1 lít
Các vi khuẩn kiểm nghiệm đƣợc nuôi trong môi trƣờng LB Broth cho đến khi đạt đƣợc độ đục 0.5 theo tiêu chuẩn McFarland. Dịch vi khuẩn này đƣợc sử dụng để kiểm tra hoạt tính kháng khuẩn của các dung dịch 7-12 tƣơng ứng với các hợp chất
63
- 0,1mL dịch vi khuẩn đƣợc trải trên đ a Petri chứa môi trƣờng LB Agar theo phƣơng pháp trãi đ a. Các đ a giấy thấm vô trùng chứa 20 l các dung dịch đƣợc đặt lên ề mặt đ a Petri đã dàn đều vi khuẩn.
- Tiếp theo, các đ a Petri đƣợc để yên trong 4oC cho dung dịch thấm vào mơi trƣờng thạch trong 2 giờ và sau đó đƣợc đem ủ ở 37o
C trong 16-18 giờ. Đ a kháng sinh Gentamycin (Alphachem Company, Việt Nam) đƣợc sử dụng nhƣ đối chứng dƣơng cho các thí nghiệm. Đối chứng âm đƣợc thực hiện ằng dung môi DMSO.
- Khả n ng kháng khuẩn của các dung dịch B1/B3/MM đối với các chủng vi khuẩn đƣợc đo ằng đƣờng kính vịng vơ khuẩn sau 16-18h nuôi ủ.
2.11.2.2 Hoạt tính kháng nấm
Trƣờng hợp nấm men Candida al icans đƣợc thực hiện tƣơng tự nhƣ kiểm tra vi khuẩn với môi trƣờng dinh dƣỡng là môi trƣờng Hansen. Đ a kháng sinh Ketoconazole (Alphachem Company, Việt Nam) đƣợc sử dụng nhƣ đối chứng dƣơng cho các thí nghiệm. Đối chứng âm đƣợc thực hiện ằng dung môi DMSO.