CHƢƠNG 4
KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 4.1 Thành phần dƣỡng chất của thực liệu
Thực liệu (%) DM OM CP NFE CF EE NDF ADF Ash
Lá mận trắng 43,0 91,5 8,56 42,8 26,5 5,44 47,5 33,9 8,47 Lá chuối xiêm 23,5 90,6 11,6 41,0 23,3 5,21 50,7 30,4 9,44 Cọng chuối xiêm 12,4 89,3 4,74 41,1 30,0 2,34 60,9 44,7 10,7 Cúc dại 16,3 79,0 9,53 34,6 16,3 9,25 30,1 26,4 21,0 Lá ổi ruột đỏ 30,4 90,1 13,1 47,0 19,6 2,60 69,4 24,7 9,92 Lá sắn 21,2 92,9 27,2 34,5 16,1 7,26 51,1 21,6 7,09 Lá muồng trâu 25,2 91,2 19,0 43,9 17,4 3,03 23,2 18,2 8,78 Cỏ voi 19,0 84,9 9,23 35,4 29,0 5,15 46,4 26,8 15,1 Cỏ mồm 17,9 86,2 13,8 37,8 22,4 4,35 62,0 32,3 13,8 Cỏ lông tây 25,4 86,3 13,1 31,6 29,9 4,69 71,1 30,4 13,7 Cỏ paspalum 25,4 88,6 9,04 40,7 28,6 3,24 50,5 31,7 11,4 Lá còng 37,4 95,6 27,4 31,9 27,4 2,40 42,9 25,5 4,44 Anh đào giả 29,8 91,5 8,14 63,5 11,8 4,56 26,3 14,6 8,50 Vỏ măng cụt 82,3 95,3 11,4 34,1 31,3 4,09 61,9 60,3 4,67 Cỏ đậu lá nhỏ 15,7 89,1 19,3 38,7 24,1 7,0 49,1 - 10,9 Rơm 83,6 86,7 5,20 39,9 31,6 5,00 67,2 38,6 13,3
DM: vật chất khô, CP: đạm thô, EE: chất béo, NDF: xơ trung tính, NFE: chiết chất khơng đạm,
ADF: xơ axit, CF: xơ thơ, Ash: khống tổng số.
Bảng 4.1 trình bày thành phần dưỡng chất của các loại thực liệu sử dụng trong thí nghiệm. Qua đó, chúng tơi nhận thấy rơm và vỏ măng cụt có hàm lượng vật chất khơ cao nhất (83,6% và 82,3%), thấp nhất là cọng lá chuối Xiêm (12,4%), các thực liệu còn lại dao động trong khoảng 15,7–37,4%.
Cỏ voi có 84,9% OM kết quả này thấp hơn kết quả nghiên cứu của Nguyen Van Thu and Danh Mo (2008) là 87,5%. Hàm lượng OM của cỏ lông tây (86,3%) cũng thấp hơn nghiên cứu của Trương Thanh Trung (2006) và Nguyễn Thị Kim Đông (2008) lần lượt là 88,7 và 88,8%.
Hàm lượng CP trong lá sắn và lá còng là tương đương nhau (27,2%; 27,4%) và cao nhất so với các thực liệu cịn lại. Cọng chuối Xiêm và rơm có hàm lượng CP thấp nhất lần lượt là 4,74% và 5,2%.
Kết quả phân tích hàm lượng CP của cỏ voi trong thí nghiệm của chúng tôi (9,23%) phù hợp với kết quả nghiên cứu của Nguyen Van Thu và Danh Mo (2008) là (9,80%) nhưng cao hơn kết quả của Nguyễn Thị Hồng Nhân báo cáo (2007) hàm lượng CP của cỏ voi trung bình khoảng 8,1%. Cỏ lơng tây có hàm lượng CP cao hơn (13,1%) so với cỏ voi và cỏ paspalum (9,04%), kết quả này phù hợp với kết quả nghiên cứu của Trương Thanh Trung (2006), Trần Văn Hiệp (2009) là 13,7% nhưng cao hơn kết quả của Danh Mơ (2003) có kết quả phân tích là 12,1%.
Hàm lượng NDF trong cỏ lơng tây là cao nhất (71,1%), thấp hơn là lá ổi ruột đỏ, rơm, cỏ mồm, vỏ măng cụt có lượng xơ trung tính lần lượt là 69,4%, 67,2%, 62%,
và 61,86%. Lượng NDF của cỏ lơng tây trong thí nghiệm có cao hơn kết quả nghiên
cứu của Trần Văn Hiệp (2009) là 69,4% và Nguyễn Hữu Lai (2008) 69,0%. Điều này có thể là do khác nhau về địa điểm và thời điểm lấy mẫu. Kết quả nghiên cứu của Viện khoa học kỹ thuật nông nghiệp miền Nam và Viện Dinh dưỡng Động vật, (2003) thí lá sắn có 47,0% NDF, kết quả này thấp hơn kết quả phân tích của chúng tơi (51,1 %NDF). Lá muồng trâu và anh đào giả có hàm lượng NDF thấp nhất (23,2% và 26,3%) so với các loại thực liệu còn lại.
Hàm lượng CF của lá còng, lá mận trắng, cọng chuối xiêm, cỏ voi, cỏ lông tây, cỏ paspalum và vỏ măng cụt cao hơn so với các thực liệu cịn lại. Anh đào giả có hàm lượng CF là 11,8% kết quả này phù hợp với kết quả nghiên cứu của Lưu Hữu Mãnh (1999) là 11,5%.
Hàm lượng béo thô (EE) của các thực liệu dao động trong khoảng 2,34 - 9,25 %, cao nhất là cúc dại và thấp nhất là cọng chuối Xiêm. Kết quả phân tích EE của lá sắn (7,26%) phù hợp với Viện khoa học kỹ thuật nông nghiệp miền Nam và Viện Dinh dưỡng Động vật (2003) là 7,36%. Nhìn chung thì các thực liệu sử dụng trong thí nghiệm có hàm lượng dưỡng chất khá cao, trong đó lá cịng, lá sắn, lá muồng trâu có hàm lượng CP khá cao nhất.
4.2 Hàm lƣợng % tannin có trong thực liệu
Lov1: phương pháp Loventhal I, Lov2: phương pháp Loventhal II, Oxy: phương pháp oxy hóa DĐVN I, Bot: phương pháp bột da DĐVN IV, TB: trung bình, SE: độ sai lệch.
Kết quả của bảng 4.2 trình bày hàm lượng tannin trong các thực liệu khi sử dụng các phương pháp phân tích khác nhau. Nhìn chung thì phương pháp phân tích thứ nhất cho kết quả có khuynh hướng cao hơn so với ba phương pháp cịn lại, tuy nhiên khơng có sự khác biệt có ý nghĩa giữa các phương pháp phân tích này.
Khi sử dụng phương pháp I thì hàm lượng tannin trong lá ổi ruột đỏ (13,5%), và lá mận trắng (11,1%) cao hơn so với các thực liệu khác. Theo kết quả nghiên cứu của Phạm Xuân (7–10% tannin), Ngamsaeng et al (15,8 % tannin). Hàm lượng tannin của lá mận trong nghiên cứu của chúng tơi thì phù hợp kết quả của Min et al là (12-14% ). Lá muồng có hàm lượng tannin thấp nhất (1,21%). Mặc khác, hàm lượng tannin của lá chuối Xiêm cao hơn lá sắn nhưng thấp hơn cúc dại và vỏ măng cụt. Nói chung phương pháp I chúng tơi nhận thấy các loại cỏ có hàm lượng tannin thấp (cỏ mồm 1,67%; cỏ voi 1,93%; cỏ paspalum 2,28% và cỏ lơng tây 2,08%). Cây anh đào giả có hàm lượng tannin (1,62%) tương đương với cỏ mồm (1,67%).
Kết quả phân tích hàm lượng tannin trong phương pháp II thấp hơn so với phương pháp I. Trong đó lá ổi ruột đỏ và lá mận trắng có hàm lượng tannin cao nhất nhưng thấp hơn kết quả phân tích ở phương pháp I (lá ổi ruột đỏ 10,9% và lá mận
Thực liệu Lov1 Lov2 Oxy Bot TBSE
Cọng chuối xiêm 2,43 ± 0,01 2,19 ± 0,13 2,38 ± 0,09 2,39 ± 0,05 2,340,054 Lá chuối xiêm 3,37 ± 0,019 3,02 ± 0,06 2,97 ± 0,65 2,36 ± 1,02 2,930,210 Cúc dại 5,43 ± 0,15 5,25 ± 0,19 5,63 ± 0,29 5,33 ± 1,82 5,410,082 Lá ổi ruột đỏ 13,5 ± 0,76 10,9 ± 0,19 11,1 ± 0,17 12,6 ± 0,36 12,00,617 Lá mận trắng 11,1 ± 0,26 10,2 ± 0,09 9,22 ± 0,06 10,6 ± 0,4 10,30,405 Lá muồng 1,21 ± 0,02 1,59 ± 0,15 1,61 ± 0,07 1,73 ± 0,02 1,540,113 Lá sắn 3,73 ± 0,13 3,09 ± 0,08 3,23 ± 0,10 3,92 ± 0,06 3,490,198 Lá còng 2,57 ± 0,09 2,57 ± 0,08 2,70 ± 0,13 2,37 ± 0,25 2,550,068 Vỏ măng cụt 4,69 ± 0,39 3,76 ± 0,08 3,90 ± 0,12 5,25 ± 0,32 4,400,350 Cỏ mồm 1,67 ± 0 19 1,51 ± 0,34 1,43 ± 0,23 1,70 ± 0,02 1,580,064 Cỏ paspalum 2,28 ± 0,11 2,05 ± 0,13 2,23 ± 0,07 2,79 ± 0,06 2,320,138 Cỏ lông tây 2,08 ± 0,33 1,58 ± 0,08 1,41 ± 0,14 1,37 ± 0,03 1,610,163 Cỏ voi 1,93 ± 0,39 1,44 ± 0,37 1,00 ± 0,03 1,37 ± 0,32 1,450,178 Anh đào giả 1,62 ± 0,25 1,23 ± 0,19 1,07 ± 0,06 1,66 ± 0,07 1,400,145
trắng 10,2%). Hàm lượng tannin lá muồng trâu ở phương pháp I (5,43 %) và phương pháp II (5,25%) chênh lệch với nhau khơng nhiều. Trong khi đó, lá cịng có hàm lượng tannin không khác biệt khi sử dụng phương pháp I và II (2,57%). Ở phương pháp II cây anh đào giả lại có hàm lượng tannin thấp nhất (1,23%) ngược lại so với phương pháp II. Hàm lượng tannin của các loại cỏ cũng khá ổn định (cỏ mồm 1,51%; cỏ voi 1,54%; cỏ paspalum 2,05% và cỏ lông tây 1,58%). Ở phương pháp 2 ta thấy hàm lượng tannin của lá muồng trâu (1,59%) cao hơn phương pháp I (1,21%). Theo Rural Forest Community Issues (1979) hàm lượng tannin của cúc dại là 6,7%, cao hơn kết quả nghiên cứu của chúng tôi.
Hàm lượng tannin trong phương pháp III không khác biệt nhiều so với phương pháp II. Tương tự, lá ổi ruột đỏ (11,08%) và lá mận trắng (9,22%) có hàm lượng cao nhất so với các thực liệu khác. Lá mận trắng ở phương pháp III có hàm lượng tannin thấp hơn so với phương pháp I và phương pháp II. Giống như 2 phương pháp trên các loại cỏ ở phương pháp 3 có hàm lượng tannin thấp và ổn định. Hàm lượng tannin của cỏ mồm, cỏ lông tây, cỏ voi giảm dần từ phương pháp I đến phương pháp III. Qua bảng 4.2 ta thấy anh đào giả và cỏ voi có hàm lượng tannin thấp nhất (1,07%).
Nhìn chung thì kết quả phân tích của phương pháp IV cũng khơng có khác biệt nhiều so với ba phương pháp trên. Lá ổi ruột đỏ và lá mận trắng có hàm lượng tannin tương ứng là 12,6 và 10,6%. Hàm lượng tannin của lá sắn ở phương pháp IV (3,92%) cao hơn so với các phương pháp I, phương pháp II và phương pháp III. Kết quả này phù hợp với nghiên cứu của Wanapat (1999) là 3,9%.
Kết quả bảng 4.2 cho thấy bốn phương pháp phân tích đều cho kết quả về hàm lượng tannin ở các loại cỏ thấp hơn so với các thực liệu khác, trong khi lá mận trắng và lá ổi ruột đỏ đều có hàm lượng tannin cao nhất. Tuy hàm lượng tannin không khác biệt khi sử dụng các phương pháp khác nhau nhưng hiệu quả kinh tế thì có khác biệt. Phương pháp phân tích thứ nhất có chi phí phân tích thấp nhất (68.326 đồng) và cao nhất là phương pháp thứ 2 (218.326 đồng).
4.3 Phƣơng pháp phân tích tannin tối ƣu và đánh giá sự tiêu hóa thực vật bằng phƣơng pháp in vitro bằng phƣơng pháp in vitro
4.3.1 Phƣơng pháp phân tích tannin tối ƣu
Bảng 4.3: So sánh kết quả phân tích tannin giữa 4 phương pháp
Phƣơng pháp phân tích So sánh TB tannin P
Lov1 – Lov2 4,11 ± 0,99 vs 3,6 ± 0,84 0,69 Lov1 - Oxy 4,11 ± 0,99 vs 3,57 ± 0,82 0,67 Lov1 - Bot 4,11 ± 0,99 vs 3,96 ± 0,94 0,91
Lov2 - Oxy 3,6 ± 0,84 vs 3,57 ± 0,82 0,98
Lov2 - Bot 3,6 ± 0,84 vs 3,96 ± 0,94 0,78
Oxy - Bot 3,57 ± 0,82 vs 3,96 ± 0,94 0,76
Lov1: phương pháp Loventhal I, Lov2: phương pháp Loventhal II, Oxy: phương pháp oxy hóa DĐVN I, Bot: phương pháp bột da DĐVN IV.
Qua bảng 4.3 cho chúng tôi nhận xét là cả 4 phương pháp phân tích tannin đều cho kết quả tốt, sai khác khơng có ý nghĩa thống kê (P>0,05). Tuy nhiên phương pháp Lov1 đơn giản, dễ thực hiện, lượng hóa chất tiêu tốn ít hơn, chi phí thấp hơn.
4.3.2 Ảnh hƣởng của tannin lên sự tiêu hóa bằng phƣơng pháp in vitro
a Lƣợng khí sinh ra (ml/gOM) của thực liệu có bổ sung và khơng bổ sung tannin
Bả ng 4.4: Lư ợng khí (ml /g O M) của thự c liệu có bổ sung và không bổ sung tannin
Thời điểm (h) TL Ta SE/P CD CLT R K BS TL Ta TL*Ta 6 20,1 11,6 18,3 14,8 18,5 2,61/0,09 2,13/0,24 3,69/0,65 12 29,0 19,0 26,7 23,3 26,6 2,84/0,07 2,32/0,33 4,02/0,43 18 46,6a 32,6b 42,2ab 37,7 43,2 3,58/0,05 2,92/0,20 5,06/0,42 24 69,0 55,6 65,3 60,4 66,4 5,37/0,24 4,38/0,35 7,60/0,56 30 107,6 92,5 105,8 98,6 105,3 7,30/0,31 5,96/0,44 10,30/0,44 36 137,5 117,8 135,9 125,5 135,3 8,01/0,20 6,54/0,31 11,32/0,74 48 167,2 143,7 168,2 153,3 166,1 8,33/0,10 6,79/0,21 11,78/0,89 60 174,9 147,4 177,4 160,9 172,4 8,36/0,05 6,82/0,26 11,82/0,89 72 176,7ab 149,3 a 181,3b 163,7 174,5 8,15/0,03 6,65/0,27 11,53/0,86 84 179,0ab 151,3 a 184,7b 166,4 176,9 8,16/0,03 6,67/0,29 11,55/0,86 96 179,9ab 152a 187,0b 167,8 178,2 8,16/0,02 6,66/0,29 11,54/0,84
Bảng 4.4 trình bày lượng khí sinh ra ở in vitro của các thực liệu khơng và có bổ sung thêm tannin. Nhìn chung thì lượng khí sản sinh ra tăng dần theo thời gian ủ. Sự sản sinh khí ở cỏ lơng tây là thấp hơn so với cỏ đậu và rơm. Từ thời điểm 6-30 giờ thì lượng khí sinh ra ở cỏ đậu cao hơn so với rơm, tuy nhiên khơng có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa các nghiệm thức (P>0,05). Sau thời điểm 30 giờ thì khả năng sinh khí của cỏ đậu thấp hơn so với rơm và sự khác biệt có ý nghĩa ở thời điểm 72-96 giờ (P<0,05). Bên cạnh đó việc bổ sung tannin có khuynh hướng làm tăng lượng khí được sản sinh ra ở các thực liệu (P>0,05).
Tại thời điểm 6 giờ thì thể tích khí khơng có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa các nghiệm thức (P>0,05), cỏ đậu cao nhất là 20,1ml/g OM và thấp nhất là cỏ lông tây (11,6ml/g OM). Sau 24 giờ thì sản lượng khí vẫn cao hơn ở nghiệm thức có chứa cỏ đậu (69ml/g OM). Lượng khí được sinh ra sau 48 giờ ở nghiệm thức có cỏ đậu, cỏ lơng tây và rơm có giá trị lần lượt là 167,2; 143,7 và 168,2ml/g OM. Tại thời điểm 72 giờ thì có sự khác biệt giữa các nghiệm thức về thể tích khí sinh ra (P<0,05). Tại thời điểm này thì lượng khí sinh ra ở nghiệm thức có rơm là cao nhất (181,3ml/g OM) và thấp nhất vẫn là nghiệm thức cỏ lông tây (149,3ml/g OM). Sau 96 giờ lên men thì rơm có tổng sản lượng khí sinh ra là 187,0ml/g OM nhưng khơng có khác biệt so với cỏ đậu là 179,9ml/gOM, trong khi đó thì cỏ lơng tây có tổng lượng khí thấp nhất (152ml/g OM).
Việc bổ sung thêm tannin làm tăng lượng khí sinh ra mặc dù khơng có khác biệt của các nghiệm thức (P>0,05). Tại thời điểm 24 giờ thì lượng khí sinh ra ở nghiệm thức khơng có bổ sung tannin là 60,4ml/gOM và nghiệm thức có bổ sung tannin là 66,4ml/g OM. Sau 96 giờ lên men thì lượng khí vẫn có khuynh hướng cao hơn ở nghiệm thức có bổ sung tannin (178,2ml/g OM) so với nghiệm thức không bổ sung tannin (167,8ml/g OM).
.
Hàm số sinh gas của các loại thực liệu và việc bổ sung và không bổ sung tannin theo thời gian ủ như sau:
Cỏ lông tây: y = - 0,0244x2 + 4,1236x – 14,802 R2 = 0,963 Rơm: y = - 0,027x2
+ 4,737x – 14,801 R2 = 0,972
Cỏ đậu: y = - 0,0278x2 + 4,7161x – 12,266 R2 = 0,973 Không bổ sung tannin:
y = - 0,0254x2 + 4,3744x – 14,257 R2 = 0,970
Bổ sung: y = -0,027x2 + 4,6775x – 13,625 R2 = 0,970
b Lƣợng khí methane sinh ra (ml/gOM) của thực liệu có bổ sung và khơng bổ sung tannin
Bảng 4.5: Lượng khí methane (ml/gOM) của thực liệu có bổ sung và không bổ sung tannin Thời điểm (h) TL Ta SE/P CD CLT R K BS TL Ta TL*Ta 6 0,09a 0,03ab 0,02b 0,05 0,05 0,02/0,01 0,01/0,90 0,02/0,84 12 0,40 0,21 0,18 0,36 0,167 0,08/0,11 0,06/0,05 0,11/0,45 18 1,41a 1,02ab 0,54b 1,34 0,64 0,21/0,04 0,17/0,01 0,29/0,28 24 3,24 3,1 1,65 3,73 1,60 0,52/0,10 0,42/0,004 0,73/0,24 30 6,00 6,30 4,2 7,64 3,36 0,69/0,11 0,56/0,001 0,97/0,05 36 8,08 8,35 5,89 10,2 4,68 0,86/0,13 0,70/0,001 1,22/0,06 48 9,63 10,16 7,81 12,6 5,85 0,95/0,227 0,78/0,001 1,35/0,02 60 9,96 10,49 8,54 13,2 6,09 1,02/0,408 0,83/0,001 1,44/0,02 1 72 9,98 10,6 8,84 13,5 6,13 1,03/0,496 0,84/0,001 1,46/0,02 84 10,0 10,6 9,15 13,7 6,19 1,049/0,6 0,86/0,001 1,48/0,01 96 10,1 10,7 9,36 13,8 9,36 1,05/0,668 0,86/0,001 1,48/0,01
TL: thực liệu, CD: cỏ đậu, CLT: cỏ lông tây, R: rơm, K: không bổ sung tannin, BS: bổ sung tannin, Ta: tannin
Đồ thị 4.2: Lượng khí sinh ra (ml/gOM) của thực liệu có bổ sung và khơng bổ sung tannin
Sản lượng khí methane được sinh ra ở các nghiệm thức theo thời gian lên men được trình bày trong bảng 4.5. Từ thời điểm 6-18 giờ thì sản lượng khí methane sinh ra ở các nghiệm thức thì khác biệt có ý nghĩa thống kê (P<0,05). Thể tích khí methane sinh ra cao hơn ở nghiệm thức cỏ đậu, kế đến là cỏ lông tây và thấp nhất là rơm ở các thời điểm này. Tại thời điểm 24 giờ thì lượng khí methane của nghiệm thức cỏ đậu là 3,24ml/g OM, cao hơn so với nghiệm thức cỏ lông tây (3,1ml/g OM) và rơm (1,65ml/g OM). Tuy nhiên khơng có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa các nghiệm thức (P>0,05). Sau 30 giờ lên men thì lượng khí methane sản sinh ở nghiệm thức cỏ lơng