1. Mức độ vơ trùng của hóa chất, ngun vật liệu và mẫu tế bào
100% mẫu qua các giai đoạn ni cấy và mẫu trước khi tiêm khơng có vi khuẩn, nấm. Mức độ mycoplasma đạt ở mức cho phép theo máy
Luminometer single tube FB12 Berthold Detection Systems, Đức. Mức độ endotoxin đạt ở mức độ cho phép theo máy Lonza ELx808LBS Absorbance Plate Reader, Thụy Sĩ.
2. Mức độ biểu hiện marker bề mặt trên tế bào nuôi cấy ở các mũi tiêm bằng kỹ thuật FACS
TBG trung mô thu nhận từ mô mỡ sau khi phân lập và trước các mũi tiêm đều được kiểm tra mức độ biểu hiện marker bề mặt bằng kỹ thuật FACS để đảm bảo tế bào phân lập được và tiêm vào bệnh nhân là tế bào trung mô. Đặc điểm biểu hiện marker bề mặt của tế bào trung mơ là âm tính với CD14, CD45 và dương tính với CD90, CD105, CD73, CD106.
Bảng 3.18. Mức độ biểu hiện marker bề mặt mẫu tế bào sau phân lập
Marker bề mặt CD14 (ĐC âm) CD45 (ĐC âm) CD90 (ĐC dương) CD105 (ĐC dương) CD73 (ĐC dương) CD166 (ĐC dương) Tỉ lệ dương tính (%) với marker (X ± SD) 9.99 ± 5.27 3.52 ± 0.12 52.31 ± 9.76 46.07 ± 9.19 45.41 ± 7.49 47.53 ± 7.58
Bảng 3.19. Mức độ biểu hiện marker bề mặt trên tế bào nuôi cấy ở các mũi tiêm bằng kỹ thuật FACS
Marker bề mặt
Tỉ lệ dương tính (%) với marker
(X ± SD)
CD14
(ĐC âm) (ĐC dương)CD90 (ĐC dương)CD105 (ĐC dương)CD73 (ĐC dương)CD166
Mũi 2 0.00 ± 0.00 98.71 ± 15.56 86.60 ± 5.45 94.71 ± 5.22 95.14 ± 3.15
Mũi 3 0.00 ± 0.00 99.00 ± 0.20 86.52 ± 4.79 95.61 ± 3.08 96.74 ± 2.70
Mũi 4 0.00 ± 0.00 98.98 ± 0.13 87.15 ± 3.65 95.56 ± 3.30 95.43 ± 3.56
dương tính ở các marker CD90,CD73, CD105, CD166 của TBG trung mơ ở mức trung bình (45 – 52%), đối chứng âm CD14, CD45 vẫn có biểu hiện là 3.52 – 9.99 %. Nhưng ở các mũi tiêm 2,3,4, tế bào trải qua q trình ni cấy mức độ dương tính rất cao (86 – 99%), đối với đối chứng âm CD14 là hoàn toàn 0%.
3.4.4 Mối tương quan giữa kết quả TBG với kết quả điều trị 1. Hiệu quả mũi tiêm 2 và 3 (mũi tiêm chọc tủy sống thắt lưng)