Chương 2 : ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIấN CỨU
2.4. Phương phỏp nghiờn cứu
2.4.3. Đỏnh giỏ tỏc dụng của OS35 trờn chức năng cương dương
2.4.3.1. Đỏnh giỏ tỏc dụng của OS35 trờn khả năng cương dương ở thỏ đực trưởng thành
- Thỏ đực được đặt trong phũng yờn tĩnh, hạn chế tối đa mọi kớch thớch. - Thỏ được chia ngẫu nhiờn thành 2 lụ:
+ Lụ 1: uống sildenafil liều 4,5 mg/kg với thể tớch 1 ml/kg + Lụ 2: uống OS35 liều 60mg/kg với thể tớch 1 ml/kg
- Sau khi uống thuốc, bắt đầu quan sỏt thỏ để đỏnh giỏ cỏc chỉ số nghiờn cứu sau:
+ Chiều dài dương vật 5 phỳt 1 lần tại cỏc thời điểm từ 0 phỳt (khi uống thuốc) cho đến khi dương vật hết cương. Nghiờn cứu viờn khụng trực tiếp đo chiều dài dương vật thỏ để trỏnh kớch thớch trực tiếp lờn thỏ mà chụp ảnh, sau đú, sử dụng phần mềm Image J để đo chiều dài dương vật.
+ Thời gian dương vật trở lại bỡnh thường.
2.4.3.2. Đỏnh giỏ ảnh hưởng của OS35 lờn ỏp lực thể hang (ICP) trờn chuột cống trắng đực trưởng thành
Thớ nghiệm được tiến hành theo phương phỏp của Mehta [82], cụ thể như sau:
- Chuột cống trắng đực, trưởng thành được chia ngẫu nhiờn thành 2 lụ: + Lụ 1 (n = 8): uống sildenafil liều 10 mg/kg.
+ Lụ 2 (n = 7): uống OS35 liều 150 mg/kg.
Chuột được cho uống thuốc thử 1 lần duy nhất (sau khi đó gõy mờ và đo được ICP trước khi dựng thuốc).
Cỏc bước thực hiện như sau: - Chuẩn bị:
+ Chuột được gõy mờ bằng dung dịch ketamin liều 25 mg/kg, cố định nằm ngửa trờn bàn mổ, sỏt trựng.
+ Kết nối hệ thống Powerlab, điện cực kớch thớch, đầu đo ỏp lực, phần mềm Labchart.
+ Bước 1: Bộc lộ động mạch cảnh và đặt catheter vào động mạch cảnh đo huyết ỏp động mạch.
+ Bước 2: Bộc lộ dõy thần kinh hang.
+ Bước 3: Bộc lộ thể hang, đưa kim 26G vào thể hang, nối với một ống PE-50 chứa nước muối sinh lý pha heparin 100 IU/ml để đo ICP.
+ Bước 4: Đo ỏp lực thể hang, huyết ỏp động mạch trước khi kớch thớch dõy thần kinh hang.
+ Bước 5: Kớch thớch điện dõy thần kinh hang bằng một bộ phận kớch thớch theo nhịp nối với điện cực lưỡng cực Đo ỏp lực thể hang, huyết ỏp động mạch sau khi kớch thớch dõy thần kinh hang. Số lần kớch thớch là 1 lần trước khi uống thuốc và 3 lần sau khi uống thuốc (15 phỳt, 30 phỳt và 45 phỳt sau khi dựng thuốc), mỗi lần kớch thớch kộo dài 1 phỳt. Dũng điện kớch thớch dõy thần kinh hang cú cường độ 5V, tần số 20 Hz, độ rộng xung 2 ms.
+ Bước 6: Phõn tớch số liệu offline bằng phần mềm Labchart pro. Kết quả sau phõn tớch cho ra cỏc thụng số về ỏp lực thể hang, huyết ỏp động mạch (đơn vị mmHg).
- Cỏc chỉ số nghiờn cứu tại cỏc thời điểm trước khi dựng thuốc, 15 phỳt, 30 phỳt và 45 phỳt sau khi dựng thuốc:
+ ICP trước khi kớch thớch dõy thần kinh hang (ICP nền) (mmHg) + ICP cực đại sau kớch thớch dõy thần kinh hang (ICP max) (mmHg) + Thời gian đỏp ứng với kớch thớch (ms)
+ Huyết ỏp động mạch trung bỡnh (MAP)
+ Tỉ số ICP cực đại/huyết ỏp động mạch trung bỡnh (ICP max/MAP) - Cỏc chỉ số nghiờn cứu được so sỏnh giữa cỏc lụ và so sỏnh sau khi uống thuốc và trước khi uống thuốc.