- Tiến hành thẩm định độ đúng tại LOQ cho tỷ lệ thu hồi 97% 103%
Tính đặc hiệu
Phân tích các mẫu trắng từ ít nhất 6 nguồn cung cấp dịch sinh học thích hợp (huyết tương nước tiểu hoặc những loại dịch sinh học khác)
Mỗi mẫu trắng được kiểm tra về độ nhiễu
qui trình phân tích phải đáp ứng được tính đặc hiệu ở LLOQ
Nếu định lượng đồng thời nhiều chất thì mỗi chất phân tích phải được kiểm tra để đảm bảo rằng khơng cĩ sự gây nhiễu lẫn nhau
Các chất gây nhiễu trong dịch sinh học: thành phần nội sinh, các chất chuyển hĩa, các sản phẩm phân hủy, các thuốc dùng đồng thời với thuốc đang nghiên cứu nếu cĩ
Nên được đánh giá trong suốt quá trình xây dựng phương pháp, thẩm định phương pháp và cĩ thể tiếp tục trong suốt giai đoạn áp dụng phương pháp để phân tích mẫu thật
Khi báo cáo kết quả phải bao gồm cả sắc ký đồ của mẫu trắng (dịch sinh học), mẫu chất chuẩn đối chiếu pha trong dịch sinh học và mẫu thử thu được sau khi dùng thuốc
Đại học Y Dược TPHCM Nguyễn Đức Tuấn
Tiến hành sắc ký mẫu huyết tương trắng, mẫu thử tự tạo (mẫu huyết tương chứa chuẩn đối chiếu), và mẫu chuẩn đối chiếu pha trong dung mơi tại 3 nồng độ trong phạm vi định lượng (trong đĩ phải cĩ 1 nồng độ gần hoặc bằng LLOQ)
Yêu cầu
Thời gian lưu của pic của chất khảo sát trong mẫu tự tạo phải tương đương với thời gian lưu của pic của chất khảo sát trong mẫu đối chiếu, đồng thời mẫu huyết tương trắng khơng cĩ đỉnh trùng với đỉnh hoạt chất
Với đầu dị PDA, phổ UV-Vis tại thời gian lưu của pic của chất khảo sát trong mẫu tự tạo giống phổ UV-Vis tại thời gian lưu của pic của chất khảo sát trong mẫu đối chiếu
Pic của chất khảo sát tách hồn tồn các pic khác trong sắc ký đồ của mẫu tự tạo
Sử dụng chức năng kiểm tra độ tinh khiết phải cho thấy pic của chất khảo sát khơng cĩ thành phần khác trong mẫu tự tạo (với đầu dị PDA)