Chƣơng 2 ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1. ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU
Lựa chọn đối tƣợng nghiên cứu
Đối tƣợng nghiên cứu là 94 ngƣời phơi nhiễm dioxin đã đƣợc xét nghiệm dioxin trong huyết thanh máu và 20 ngƣời không phơi nhiễm dioxin (sống ở khu vực quận Hà Đông, Hà Nội, nơi không bị phun rải chất độc da cam/dioxin).
Đối tƣợng phơi nhiễm dioxin trong nghiên cứu này thuộc đề tài cấp Nhà nƣớc “Nghiên cứu sự biến động sức khỏe, bệnh tật và nồng độ dioxin ở ngƣời có nồng độ dioxin cao, đề xuất các giải pháp và điều trị”, mã số KHCN-33.04/11-15. Tiêu chuẩn chọn đối tƣợng: ngƣời có tiền sử phơi nhiễm rõ ràng với chất độc da cam/dioxin; ngƣời dân sống tại điểm nóng chất độc da cam/dioxin (khu vực sân bay Biên Hòa và sân bay Đà Nẵng) với thời gian trên 05 năm. Các đối tƣợng phơi nhiễm đƣợc khám lâm sàng, làm các xét nghiệm xác định bệnh liên quan đến dioxin (thuộc danh mục 17 bệnh, tật, dị dạng, dị tật có liên quan đến phơi nhiễm dioxin - phụ lục). Xét nghiệm dioxin trong huyết thanh máu tiến hành tại Trung tâm Nghiên cứu Y dƣợc học quân sự, Học viện Quân y và Trung tâm Nhiệt đới Việt – Nga.
Đối tƣợng nhiễm dioxin đƣợc nghiên cứu giải trình tự tồn bộ hệ gen biểu hiện (WES) thuộc đề tài NAFOSTED “Giải trình tự tồn bộ hệ gen biểu hiện (exome) ở một số con/cháu các nạn nhân chất độc da cam/dioxin bị thiểu năng trí tuệ”, mã số 106-YS.01-2014.34. Đối tƣợng là một cựu chiến binh, sinh năm 1930, đã tham gia chiến đấu từ năm 1970 đến 1972 tại chiến trƣờng Quảng Trị, nơi Quân đội Mỹ phun rải chất độc da cam. Đối tƣợng đƣợc xác định có nồng độ dioxin trong máu cao (19,65 ppt). Đối tƣợng có một con gái bị thiểu năng trí tuệ, dị tật bẩm sinh.
Cỡ mẫu nghiên cứu
Số mẫu phơi nhiễm dioxin trong nghiên cứu đƣợc xác định theo cơng thức tính cỡ mẫu nghiên cứu cắt ngang nhƣ sau:
⁄
Với mức ý nghĩa thống kê α = 0,05, hệ số tin cậy Z (1-α/2)= 1,96. Khoảng sai lệch d=0,1. Tỷ lệ ƣớc tính p=0,43 (dựa vào tỷ lệ đa hình exon 10, gen AhR ở quần thể ngƣời Nam Á theo nghiên cứu của Craig J. Rowlands và cs năm 2010 là 0,43). Từ đó tính đƣợc n=94,16. Chọn 94 mẫu phơi nhiễm dioxin.
Đối với cỡ mẫu nghiên cứu giải trình tự tồn bộ hệ gen biểu hiện (WES), do giới hạn của phạm vi nghiên cứu, nên bƣớc đầu chúng tôi chỉ tiến hành trên một mẫu nhiễm dioxin.